范胜涛
- 作品数：37 被引量：55H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划云南省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 吉林省汉坦病毒宿主动物携带病毒的遗传进化分析被引量：8
- 2014年
- 目的对吉林省汉坦病毒（Hantavirus，Hv）宿主动物携带病毒进行遗传进化分析。方法采集吉林省不同地区鼠肺样品，应用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，IFA）鉴定出HV感染的阳性样本，利用Trizol试剂提取病毒RNA，RT-PCR法扩增阳性样本中M和S片段基因，并进行测序，应用DNASTAR软件对M和S片段基因的核苷酸同源性进行分析，并与汉城病毒（Seoulvirus，SEOV）参考株进行比较；利用MegAligh软件进行蛋白序列中氨基酸差异性分析；利用MEGA5.0软件进行系统发生分析。结果共捕获719只啮齿动物，其中褐家鼠（R.norvegicus）555只，黑线姬鼠（A.agrarius）74只，小家鼠（胍m12sclzllzs）90只，HV抗原阳性率为1.39％（10／719）；10份阳性样本中，7份来自褐家鼠，2份来自小家鼠，1份来自黑线姬鼠。用全长s引物扩增得到的10株病毒全长s基因片段，经同源性分析比较发现，各序列间的核苷酸同源性在92.8％～95.1％之间，与其他SEOV核苷酸同源性在90.2％～94.7％之间；用M引物扩增得到的部分基因片段，经同源性分析比较发现，各序列间的核苷酸同源性在96.5％～99.5％之间，而与其他SEOV核苷酸同源性在91.5％～97.7％之间；10株病毒全部属于SEOV。黑线姬鼠G蛋白365～769位点问有5个氨基酸差异位点（V494L、C546S、Y626C、M630L和V637I），小家鼠G蛋白365～769位点问主要有5个氨基酸差异位点（C378G／R、F420L、Q436P／R、E535G／A和C589G／W），但同种间在378、436、535和589位点也有差异；黑线姬鼠N蛋白1～430位点间存在P298L变异；小家鼠N蛋白变异位点较多，主要在M24K／N、A37D、1140M、M173K、D192E、L219V、P229A、D237E、H265Y、V284L、T333S、A389G和V425E变异。分离得到的10株病毒根据不同的来源地可分为两个不同的进化分支。结论研究表明吉林省宿主动物携带的HV仍以SEOV为主，其遗传进化呈现多
- 范胜涛高晓龙李元果应瑛国娇张钊伟刘红吴静杨松涛赵永坤秦川高玉伟夏咸柱
- 关键词：汉坦病毒进化
- 一种重组蛋白K-S及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种重组蛋白K‑S及其制备方法和应用，属于生物技术领域，方案包括在所述S1蛋白的核苷酸序列上，对6个关键位点进行突变，突变位点及碱基分别为：G1251T，T1355G，G1450C，A1501T，A1841G...
- 李琦涵范胜涛徐兴丽李丹丹赵恒于丽蒋国润廖芸张莹王丽春张晶晶段素琴高扬曾烽原徐祥雄
- 文献传递
- 核定位人源α-突触核蛋白转基因小鼠的建立
- 2024年
- 目的 建立一种核定位人源α-突触核蛋白(α-synuclein, α-syn)转基因小鼠,并探究人源α-syn核输入对小鼠行为的影响。方法 构建hSNCA-NLS和EGFP的慢病毒载体,利用显微注射法建立转基因小鼠模型,通过PCR和Western Blot方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型和蛋白表达情况。采用免疫荧光鉴定人源α-syn在小鼠脑组织中的共定位情况,同时采用旷场、转棒、O迷宫实验评价转基因小鼠的行为改变情况。结果 hSNCA-NLS基因成功插入小鼠基因组中,人源α-syn成功表达,并且有明显的核定位现象。进一步研究发现,核定位人源α-syn转基因小鼠在2月龄时开始表现出了运动功能障碍,发生了星形胶质细胞增生和炎症反应,于9月龄时表现出了明显的焦虑样症状,γ-氨基丁酸(GABA)基因表达减少,这些表现一直持续到小鼠12月龄。结论 成功构建了核定位人源α-syn转基因小鼠,小鼠表现出明显的运动功能障碍和焦虑样症状。该模型的成功建立可以为研究α-syn核定位现象在帕金森病中的作用提供一定的研究基础。
- 韦梦晨范胜涛吴海婷张艺薇王子鸥黄璋琼
- 关键词：小鼠核定位转基因运动功能障碍
- 一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用
- 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用，在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸，取出未成熟卵母细胞放置其中培养，培养液上方添加...
- 黄璋琼范胜涛马开利唐东红吴正存江勤芳李云
- 一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用
- 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用，在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸，取出未成熟卵母细胞放置其中培养，培养液上方添加...
- 黄璋琼范胜涛马开利唐东红吴正存江勤芳李云
- 一种用于评价食蟹猴脂肪组织中FABP4基因mRNA表达的qPCR检测方法
- 本发明涉及基因检测技术领域，特别是涉及一种用于评价食蟹猴脂肪组织中FABP4基因mRNA表达的qPCR检测方法。本发明提供的引物组可实现食蟹猴FABP4基因及内参基因GAPDH的特异性扩增，对样本中的非目的基因没有扩增信...
- 王陈芸唐东红叶尤松龙维虎李哲丽李咏洁张桃苹范胜涛黄璋琼江勤芳杨万静杨汝佳
- 一种用于食蟹猴精液质量评价的Sirt1 mRNA表达的qPCR检测方法
- 本发明提供了一种用于食蟹猴精液质量评价的Sirt1mRNA表达的qPCR检测方法，属于检测方法，具体方法为以食蟹猴新鲜精液提取的总RNA逆转录合成得到的cDNA为模板，利用PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增，获得S...
- 王陈芸唐东红叶尤松龙维虎李哲丽李咏洁张桃苹范胜涛黄璋琼江勤芳杨万静杨汝佳高羽
- 病毒性疾病基因修饰小鼠模型的研究进展
- 2024年
- 随着腺相关病毒、慢病毒载体转染及靶向核酸酶等基因修饰技术迅速发展,其被广泛应用于构建病毒性疾病基因修饰小鼠模型,这对于研究病毒的结构、功能及致病机制具有重要的价值。本文就近年来构建的基因修饰小鼠病毒感染模型进行梳理,讨论基因修饰技术在多种病毒性疾病小鼠模型中的研究进展,分析这些模型对在病毒性疾病的预防和治疗中的应用前景,以期为病毒性疾病相关的治疗药物和疫苗研究提供参考。
- 吴海婷范胜涛张才星李牧遥张艺薇黄璋琼
- 关键词：基因修饰病毒性疾病小鼠模型
- 干扰素对ICR乳鼠感染肠道病毒71型的保护作用被引量：10
- 2011年
- 目的探讨干扰素(Interferon,IFN)对ICR乳鼠感染肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的保护作用。方法将FY23-EV71感染经重组人IFNα1b和IFNλ1预处理的Vero和KMB17细胞,微量滴定法检测病毒滴度;取ICR乳鼠分为PBS对照组、EV71对照组和IFN保护组,临床观察2周,取乳鼠组织,观察病理学变化,并检测病毒含量。结果两种IFN对KMB17细胞和Vero细胞感染EV71均有保护作用,且IFNα1b的保护作用优于IFNλ1;IFN保护组乳鼠较EV71对照组乳鼠在临床表现、体重、病理变化和组织病毒含量等方面均表现出对EV71感染的保护作用。结论 IFN能抑制EV71的增殖,并对病毒致病性和组织嗜性有一定的影响。
- 范胜涛王丽春赵红玲李薇李龙刘龙丁李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型组织嗜性免疫保护
- 肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3. 1(+),构建重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1。分别转染人支气管上皮细胞16HBE,于转染后24、48和72 h收集样本,进行细胞内天然免疫相关信号分子表达的检测和刺激T细胞增殖的检测。结果经双酶切及测序鉴定,重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1构建正确。与阴性对照组比较,EV71-VP1组IFNγ、OX40L、RANKL、TNF-α和IL-2的水平上调,而CA16-VP1组的上调幅度较小。EV71-VP1及CA16-VP1组16HBE细胞的胞内外提取物均可明显刺激分泌IFNγ的T细胞增殖(P <0. 05)。结论 EV71和CA16 VP1蛋白在人上皮细胞16HBE中表达后,可差异性诱导细胞中天然免疫信号分子表达及相似的非特异性刺激T细胞增殖能力。
- 李好张莹王丽春姜莉范胜涛杨二霞董承红蒋国润张小龙廉亚茹李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型获得性免疫
