邹佳宁
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组NuBCP－9和Tumstatin(74－98)抗肿瘤融合多肽
- 本发明涉及NuBCP－9和Tumstatin(74－98)融合基因工程抗肿瘤肽。该杂合肽根据大肠杆菌偏爱密码子设计合成引物，用SOE法PCR出以柔性肽(G<Sub>4</Sub>S)<Sub>3</Sub>连接的NuBC...
- 奚涛杨家森邹佳宁那广水邢莹莹
- 文献传递
- 重组NuBCP-9/Tumstatin(74-98)融合多肽的构建、表达和活性研究
- 2009年
- 目的:构建抗肿瘤融合肽NuBCP-9/Tumstatin(74-98)(简称NT)原核表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),获得具有多靶点抗肿瘤活性的融合肽。方法:将抗肿瘤小肽NuBCP-9和Tumstatin(74-98)用柔性肽(G4S)3连接,根据大肠杆菌偏爱密码子,采用重叠延伸PCR技术扩增融合肽序列,并将其克隆至pET32a(+)质粒中,构建pET32a-NT表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白表达量并优化表达条件,经亲和色谱、酶切和超滤等方法分离、纯化得到重组融合肽;采用MTT法测定融合肽对人脐静脉内皮细胞ECV304和人肺癌细胞A549的抑制活性影响。结果:成功构建了重组表达载体pET32a-NT,优化表达条件获得了25%的可溶性蛋白表达量。活性研究表明,在融合肽终浓度为20μmol/L时,对ECV304和A549的抑制率分别为60.8%和65.2%。结论:融合肽初步表现出抗肿瘤活性,为进一步药效药理学研究奠定了基础。
- 杨家森邹佳宁方威邢莹莹奚涛
- 关键词：肿瘤抑素原核表达
- 人SMYD3基因启动子荧光素酶报告载体的构建与分析被引量：3
- 2009年
- 目的:克隆5′长度不同的SMYD3基因启动子序列并进行活性鉴定。方法:采用PCR方法克隆出SMYD3基因转录起始位点上游不同长度的基因片段,构建T载体并利用酶切与测序进行鉴定;将该基因亚克隆至pGL3-Basic荧光报告基因载体上;瞬时转染Hep3B细胞后用双荧光报告检测系统检测不同片段的荧光活性。结果:T载体酶切与测序结果正确,成功构建了pGL3-Basic+370～1400bp荧光报告载体并利用双荧光素酶报告基因检测系统分析了重组质粒的荧光活性。结论:pGL3-Basic+370～1400bp重组质粒转染组与阳性对照组相比并未表现出显著的荧光活性,本研究认为SMYD3基因的启动子核心区域位于-1334bp的上游。
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- 关键词：荧光素酶启动子
- SMYD3靶向调控原癌基因c-Met表达及Hsp90抑制剂对SMYD3作用机制的研究
- 邹佳宁
- 关键词：C-METHGF新生霉素
