钟望
- 作品数：5 被引量：23H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- hPRRSV GD07株Nsp2基因真核表达载体的构建和表达
- 2013年
- 为了深入研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2蛋白的免疫特性、结构与功能,试验根据GenBank公布的PRRSV CH-1a株Nsp2基因的核苷酸序列设计1对特异性引物,PCR扩增目的基因,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-Nsp2,并对其进行经PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定;将构建的重组质粒转染到Marc-145细胞中,用SDS-PAGE、Western-blot对表达产物进行鉴定。结果表明:RT-PCR扩增出的Nsp2基因大小与预期一致,经SDS-PAGE及Western-blot鉴定Nsp2蛋白在Marc-145细胞中成功表达。
- 牛晓芸王艳丽钟望贺东生
- 关键词：真核表达
- 猪流行性腹泻病毒的分离及RT-PCR方法的建立被引量：2
- 2013年
- 应用RT-PCR方法对2012年华南地区某大型猪场疑似猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)病料检测,选取阳性病料接种vero细胞,培养至15代,出现明显的细胞病变。为了更好的检测该病毒,根据M基因设计引物,建立了一个快速的RT-PCR方法。
- 田野苏丹萍钟望张显浩张海明陈瑞爱贺东生
- 关键词：猪流行性腹泻病毒RT-PCR
- 华南地区猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其S基因抗原表位片段的遗传变异分析被引量：14
- 2013年
- 应用RT-PCR方法对华南地区某大型猪场疑似猪流行性腹泻病料检测,选取阳性病料接种到Vero细胞,命名为CH/GDGZ/2012(简称GD-12)株。用病毒RNA抽提物为模板,对GD-12的S基因抗原区片段的扩增、克隆后进行核苷酸测序。序列分析表明,CH/GDGZ/2012与CV777、Chinju99、Br1/87、DR13和SM98的核苷酸序列同源性分别为96.9%、93.0%、95.7%、96.7%和96.0%,氨基酸序列的同源性分别为97.7%、91.5%、95.4%、98.0%和94.8%。进化树分析结果显示,华南地区CH/GD-01/2011、CH/GDGZ/2012、GDHSY/2011、CH/GXQZ/2011毒株与经典毒株的遗传距离较大,处于不同的亚群。研究表明,PEDV GD-12株已发生遗传变异、关键抗原表位发生较大变化,该研究可为诊断和防控该病提供参考。
- 田野苏丹萍蒋伟钟望张显浩陈瑞爱贺东生
- 关键词：猪流行性腹泻S基因
- 猪传染性胃肠炎病毒NC株的分离鉴定及生物学特性试验被引量：6
- 2012年
- 本试验成功分离了1株猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),并对其进行了鉴定及生物学特性研究。取华南地区某猪场腹泻病猪肛拭子经无菌处理后接种PK-15细胞分离病毒,首代培养即产生典型的细胞病变。该毒株对鸡红细胞的血凝价为26,病毒效价(TCID50)为108.15/mL。经标准TGE阳性血清的血凝抑制和细胞中和试验鉴定该病毒为TGEV,血凝抑制滴度为28、中和效价为1∶381。通过RT-PCR检测及序列分析,确定其为TGEV,并将该毒株命名为TGEV NC株。TGEV NC株在没有超离纯化和4℃处理下仍有较高血凝特性,为国内首次报道。
- 钟望田野牛晓芸王艳丽张显浩陈瑞爱贺东生
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒血凝特性
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗研究进展被引量：2
- 2012年
- 猪繁殖与呼吸综合征是影响养猪业生产的重大传染病,当今主要通过综合措施防控该病,疫苗免疫是其中的重要一环。本文综述了目前主要使用的灭活疫苗、弱毒疫苗、活载体疫苗和基因疫苗4类疫苗,并展望了未来PRRS疫苗的发展方向。
- 钟望贺东生
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征疫苗
