高宇
- 作品数：17 被引量：32H指数：3
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 毕赤酵母工程菌株表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白发酵条件的优化被引量：2
- 2011年
- 能分泌表达重组人溶菌酶-鲎素融合蛋白的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(X33/pPICZαA-human lysozyme-TachyplesinⅠ构建的)。除了基因本身内在特性外,表达条件对外源基因的表达量也有着极显著的影响。本文在摇瓶水平上通过发酵液起始pH、甲醇诱导浓度、诱导时间这3个因素进行表达条件优化。通过生长曲线,Bradford检测以及平板扩散试验分析,获得摇瓶发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白的最佳条件为发酵液初始pH 5.0,甲醇诱导浓度为2.0%,诱导时间为72 h;Bradford检测法分析显示表达量最高,平板扩散试验显示融合蛋白对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)抑菌能力最明显,为进一步大规模发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白奠定了基础。
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- 关键词：毕赤酵母
- 人溶菌酶-抗菌肽tachyplesins融合蛋白的原核表达及其抗菌活性被引量：7
- 2010年
- 目的原核表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLYZ)和抗菌肽tachyplesins融合蛋白,并检测其抗菌活性。方法人工合成抗菌肽tachyplesins基因和linker,与pMD18-T-hLYZ上切下的hLYZ基因融合,将融合基因克隆至带有GST标签的原核表达载体pGEX-4T-1上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化。表达的融合蛋白经亲和层析纯化后,进行抗菌活性检测。结果重组表达质粒pGEX-4T-1-hLYZ-tachyplesins经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确;表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约44000处可见目的蛋白条带,诱导温度在25℃,IPTG终浓度为0.8mmol/L,诱导时间为6h,融合蛋白表达效果较好,主要以可溶性形式存在;纯化的融合蛋白纯度可达90%以上,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抑制作用。结论已成功在原核细胞中表达了人溶菌酶-抗菌肽tachyplesins融合蛋白,纯化的融合蛋白具有一定的抗菌活性。
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- 关键词：溶菌酶抗菌肽重组融合蛋白质类抗菌活性
- 奶牛乳房炎疫苗防治的研究进展
- 奶牛乳房炎是奶牛场的常发病和难以防治的疾病,危害奶牛业的发展,是造成奶牛业经济损失的主要因素.现就奶牛乳房炎的疫苗防治等进行综述,为奶牛乳房炎的防治提供一定的参考依据.
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- 关键词：乳房炎奶牛疫苗防治
- 奶牛乳房炎疫苗防治的研究进展被引量：12
- 2011年
- 奶牛乳房炎是奶牛场的常发病和难以防治的疾病,危害奶牛业的发展,是造成奶牛业经济损失的主要因素。现就奶牛乳房炎的疫苗防治等进行综述,为奶牛乳房炎的防治提供一定的参考依据。
- 高宇冯新李林溪赵红蕾刁昱文刘珊珊顾敬敏韩文瑜雷连成
- 关键词：乳房炎疫苗病原
- Th17细胞调节宿主免疫应答功能研究进展
- T细胞诱导的特异性免疫应答是机体血液淋巴细胞特异性免疫应答的重要组成部分,Th17细胞作为第3类因子可区分于体液中其他辅助T细胞.基于此,论述了Th17细胞系在对抗胞外寄生和胞内寄生细菌以及真菌感染中的作用.一系列研究表...
- 陈建东李林溪高宇雷连成
- 关键词：特异性免疫TH17细胞淋巴细胞
- 痤疮丙酸杆菌对小鼠抗胸膜肺炎放线杆菌血清7型9型的免疫保护
- 2010年
- 为明确痤疮丙酸杆菌(PA)对具有抗胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型和血清9型的异源免疫保护作用,对小鼠免疫PA分离株S14后,分别用APP血清7型(CCVC-265)和血清9型(CCVC-267)攻毒。结果表明,免疫保护率达60%和70%;而用猪抗PA血清免疫小鼠后以APP血清7型和血清9型攻毒,免疫保护率达100%。血清特异性抗体效价检测显示,PA免疫小鼠后,可诱导小鼠产生特异性的抗APP血清7型和9型的抗体,ELISA方法检测特异性抗体平均效价为1 800和2 800。PA对APP血清7型和9型的感染具有良好的保护作用。
- 李林溪雷连成高宇何伯萍韩文瑜
- 关键词：痤疮丙酸杆菌胸膜肺炎放线杆菌
- 痤疮丙酸杆菌的免疫调节作用
- 丙酸杆菌是人类皮肤和自然环境中的常见微生物。具有非特异性免疫增强作用，可提高机体的免疫水平，增强对多种病原微生物的抵抗力，有抑制肿瘤生长的作用。具有佐剂功能，常用于动物的非特异性免疫刺激剂。本文对痤疮丙酸杆菌免疫调节的机...
- 李林溪高宇何伯萍雷连成韩文瑜
- 文献传递
- 人溶菌酶基因HLYZ在毕赤酵母中的表达及生物活性研究
- 学合成的人溶菌酶基因hLYZ(407 bp)构建到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA上；载体质粒用Sac Ⅰ线性化后电击法转化毕赤酵母菌株GS115，在含Zeocin的抗性培养基筛选后PCR鉴定获得了30株重组菌株。然...
- 高宇雷连成
- 文献传递
- 抗菌肽的研究进展
- 抗菌肽是广泛存在于生物体内的一种小分子肽,具有广谱性、高效性、稳定性等特点,其本身不易产生耐药性.耐药性细菌的出现致使现有抗菌药物对细菌感染治疗的疗效低下或无效,形成的危害日益严重,抗菌肽作为最有希望代替抗生素的新药制剂...
- 刁昱文赵红蕾高宇刘珊珊冯新雷连成韩文瑜
- 关键词：抗菌肽细菌感染耐药性细菌
- 结核分枝杆菌表面蛋白CPSA和PapA2诱导T细胞免疫应答分析
- 从结核感染及结核治疗结束整个过程中的抗原特异性IFN-γ反应动态变化是近来研究的热点，亦为筛选结核疫苗候选基因提供新的研究方向。本研究前期工作中利用结核分枝杆菌(MTB)表面蛋白噬菌体展示文库进行血清学差减筛选共得到6个...
- 刘珊珊韩文瑜雷连成冯新孙长江姚翠梅高宇赵红蕾
- 关键词：结核分枝杆菌抗原特异性免疫应答血清学
