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龚振兴: 作品数：22 被引量：46H指数：5; 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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一种无外源菌DNA污染的球虫卵囊的制备方法: 本发明公开了一种无外源菌DNA污染的球虫卵囊的制备方法，属于生物技术领域。本发明通过使用无微生物DNA污染的二次蒸馏水并配制所需试剂，采用1.2M蔗糖漂浮沉淀法对卵囊进行纯化，纯化后的卵囊经15％次氯酸钠溶液和细胞裂解液...; 龚振兴蔡建平刘保红殷昊李法财马雪婷; 文献传递

一种无外源菌DNA污染的鸡球虫卵囊的制备方法: 2020年; 为了获得无鸡肠道和粪便细菌DNA污染的鸡球虫卵囊,试验采用实验室制备的无微生物污染的水配制相关试剂,对柔嫩艾美耳球虫卵囊采用漂浮纯化、灭菌处理和外源菌DNA去除等方法,获得高纯度的柔嫩艾美耳球虫卵囊;提取卵囊的基因组DNA,用细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增并进行序列分析,以鉴定该卵囊是否被外源菌DNA污染。结果表明:提取的柔嫩艾美耳球虫卵囊基因组DNA经PCR方法检测外源DNA呈阴性。说明用此方法制备的柔嫩艾美耳球虫卵囊无外源菌DNA污染,可用于制备高纯度的无外源菌DNA污染的鸡球虫卵囊。; 龚振兴刘保红刘保红殷昊马雪婷蔡建平; 关键词：鸡球虫卵囊基因组DNA

不同地区鸡源产气荚膜梭菌的毒素型鉴定和药敏试验被引量：8: 2015年; 为探明我国鸡群中产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)不同毒素型分布特征及携带主要致病毒素基因和对饲用抗菌素的抗药谱,于2013年7月至2014年5月间从四川等7省17个肉鸡生产较为集中的地区采样692份,分离鉴定获得Cp菌株214株,分离率31%。经多重PCR方法鉴定,其中有206株为A型Cp,8株为C型。利用特异性单一PCR方法检测发现:有87株Cp携带β2毒素基因,阳性率为41%;5株携带Net B毒素基因,阳性率为2.3%。以最小抑菌浓度法(MIC)检测的常见饲用抗菌素敏感性结果显示:那西肽、弗吉尼亚霉素和效霉素有广泛的抑菌作用,四川德阳(2013)、四川眉山(2013)和广东鹤山(2013)的分离菌株对所测试的11种药物均表现敏感,而广西桂林(2014)的菌株仅对那西肽敏感。结果表明我国鸡源Cp具有明显的毒素型、主要致病毒素基因携带状况和抗药谱的地区差异。; 胡贺覃宗华王艳华龚振兴刘保红殷昊彭险峰马雪婷李祥瑞蔡建平; 关键词：坏死性肠炎产气荚膜梭菌毒素基因药敏试验

一种敲除柔嫩艾美耳球虫N-肉豆蔻酰基转移酶基因的方法: 本发明提供了一种敲除柔嫩艾美耳球虫N‑肉豆蔻酰基转移酶基因的方法，属于微生物技术领域，包括：将柔嫩艾美耳球虫的子孢子与pCRISPR::EtNMT质粒、pEtNMT::DHFR质粒混合后进行电转化，得到敲除N‑肉豆蔻酰基...; 蔡建平曲自刚许笑汪靖龚振兴王恒何雪阳王文青; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫组蛋白去乙酰化酶2A基因的克隆表达及转录动态分析被引量：1: 2016年; 为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)组蛋白去乙酰化酶2A(Et Sir2A)的生化功能及其对生活史发育的潜在调节作用,以柔嫩艾美耳球虫甘肃株为例,检测其在不同发育阶段表达量的差异。以基因组数据预测的编码序列为模板设计引物,采用RT-PCR的方法扩增得到Et Sir2A的全长ORF,构建p MAL-C2X-Et Sir2A重组表达质粒并进行原核表达;提取未孢子化卵囊、孢子化7h卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子5个发育阶段/时期的总RNA,采用qRT-PCR方法检测Et Sir2A的转录动态变化。测序结果显示,克隆的Et Sir2A ORF序列全长909 bp,编码302个氨基酸,并能在大肠杆菌原核系统中成功表达;qRT-PCR结果显示,Et Sir2A在不同发育阶段mRNA转录水平差异显著,在未孢子化卵囊阶段最高,第二代裂殖子阶段最低。结果为进一步研究Et Sir2A功能和开发新型抗球虫药物提供了数据基础。; 左云云马雪婷龚振兴殷昊刘保红韩政岚蔡建平; 关键词：柔嫩艾美耳球虫 QRT-PCR

常山口服液抗鸡柔嫩艾美耳球虫广东分离株的疗效研究被引量：9: 2018年; 研究旨在明确常山口服液治疗鸡球虫病的疗效和最佳给药剂量。试验选取90只14日龄健康雏鸡,随机分为9组,每组10只,即常山口服液组(分别为2.5、5.0、15.0、25.0、35.0、50.0 m L/L水剂量)、妥曲珠利组(1 m L/L水)、感染对照组和健康对照组。除健康对照组外,每只鸡接种7×104个柔嫩艾美耳球虫广东分离株的孢子化卵囊,饮水给药7 d,观察其疗效。结果显示,常山口服液各剂量组其盲肠和十二指肠的肿胀现象较感染对照组明显减轻,血液性内容物明显减少,抗球虫指数(ACI)分别为87.7、136.2、141.8、136.2、109.7和108.0,均高于感染对照组;常山口服液按5.0、15.0及25.0 m L/L水剂量给药,抗球虫指数均高于对照药物妥曲珠利组(ACI=124.8)。结果表明,人工感染条件下,常山口服液较化学药物妥曲珠利具有更好的抗球虫疗效,且作为中药提取物,疗效对比试验效果较为理想。; 王玲郭志廷龚振兴蔡建平杨峰; 关键词：鸡球虫病柔嫩艾美耳球虫抗球虫药

常山散对人工感染的鸡球虫病疗效研究被引量：8: 2017年; 为了明确常山散治疗鸡球虫病的疗效和最佳给药剂量,通过人工感染鸡柔嫩艾美耳球虫后在饲料中添加一定比例的药物,试验设常山散组(分别为0.05、0.1、0.3、0.5、0.7、1 g/kg饲料)、妥曲珠利对照组(1.0 m L/L饮水)、感染对照组和健康对照组。结果表明:与感染对照组比较,常山散各剂量组鸡盲肠和十二指肠肿胀明显减轻,血液性内容物明显减少,抗球虫指数分别为85.5、132.7、141.1、128.8、104.2和102.8,均高于感染对照组;常山散按0.1、0.3和0.5 g/kg饲料给药抗球虫指数均高于妥曲珠利对照组(124.8)。结果提示:常山散抗球虫疗效好,且作为中药提取物,绿色环保、低毒、低残留,有望成为新型抗球虫药物。; 郭志廷王玲龚振兴蔡建平梁剑平; 关键词：鸡球虫病妥曲珠利

鼠隐藏管状线虫烯醇化酶基因的克隆与序列分析被引量：3: 2017年; 为获得鼠隐藏管状线虫(Syphacia obvelata)烯醇化酶结构及其功能,采用同源克隆方法结合RACE技术克隆获得了烯醇化酶基因c DNA序列,并对其进行了序列分析。测序结果显示,扩增获得的鼠隐藏管状线虫烯醇化酶基因大小序列为1603 bp,包含全长为1311 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,共编码436个氨基酸,推导分子量为47.428 k Da。序列分析结果显示,鼠隐藏管状线虫烯醇化酶含有10个丝氨酸激酶磷酸化位点、3个苏氨酸激酶磷酸化位点和4个酪氨酸激酶磷酸化位点,1个潜在的跨膜螺旋结构,无信号肽剪切位点;在亚细胞水平,预测其主要定位于胞浆;二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,其中α-螺旋占34.86%,无规则卷曲占30.50%,延伸链占24.08%,β-转角占10.55%。Swiss-Model模建的3D结构显示,鼠隐藏管状线虫烯醇化酶为一"哑铃"样结构,包含氨基端和羧基端两个结构域,结构域之间为Linker区。每个结构域由多个α-螺旋、β-折叠和卷曲所构成桶形结构,催化中心和Mg^(2+)结合位点位于桶形结构的中心。本研究结果为鼠隐藏管状线虫烯醇化酶基因的功能研究奠定基础。; 陈宁王平程田龚振兴谢天柱李俊鹏张延忠王晓炜鲁艺; 关键词：烯醇化酶克隆生物信息学分析

湖南省肉牛寄生虫病感染情况调查被引量：7: 2006年; 刘伟戴荣四谭美英龚振兴刘毅; 关键词：肉牛场寄生虫病样品采集奶牛

鸡颗粒溶素的原核表达及生物活性分析: 2018年; 为了克隆表达纯化鸡颗粒溶素（chicken granulysin,ChGNLY）并进行活力鉴定。本试验以基因组数据库预测的ChGNLY基因为模板设计引物,对提取的鸡脾脏总RNA进行RT-PCR,扩增得到的ChGNLY基因插入pMD-19T载体中并测序。将测序正确的GNLY基因克隆至pGEX-6p-1,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GNLY,并将其转化至感受态BL21,IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE、Western-blotting和蛋白质谱鉴定融合蛋白的正确性。CellTiter-Glo2.0Assay检测融合蛋白的生物学活性。另外,对GNLY的分子特性进行了生物信息分析。结果显示,测序结果显示克隆的ChGNLY片段长237bp,编码79个氨基酸,所表达的融合蛋白相对分子质量约为36 000。重组ChGNLY融合蛋白能特异性与人颗粒溶素抗体发生反应。纯化后的GNLY融合蛋白经CellTiter-Glo2.0Assay检测,发现其具有剂量依赖性的细胞毒活性。系统发生分析显示GNLY可明显分为4个群。结构分析发现,ChGNLY活性区域表面带有大量正电荷,且位点保守。结果表明,本试验利用原核表达系统成功表达了具有生物学活性的ChGNLY,为ChGNLY后续功能的研究奠定理论基础。; 袁如意马雪婷殷昊殷昊杨顺利龚振兴韩政岚杨顺利刘晓丽曲自刚; 关键词：颗粒溶素原核表达生物信息分析生物学活性

龚振兴

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