于丹
- 作品数：15 被引量：37H指数：3
- 供职机构：黑龙江农业职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- FGF21对MSG胰岛素抵抗小鼠的非酒精性脂肪肝的治疗作用及其机制研究被引量：13
- 2013年
- 研究成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)对谷氨酸钠(MSG)肥胖小鼠非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的治疗作用及其作用机制。实验分为正常对照组、模型对照组、高剂量FGF21治疗组和低剂量FGF21治疗组。给药5周,给药期间每周监测小鼠体重,给药结束时测定血脂和血清胰岛素及转氨酶含量。Real-time PCR方法检测肝脏和脂肪组织内能量代谢调节关键基因表达。结果显示,治疗5周后,不同剂量FGF21均明显降低MSG模型体重(P<0.01),纠正其血脂紊乱(P<0.01),减轻模型小鼠的肝内脂肪变性,恢复其肝脏细胞正常形态结构,并且可显著改善MSG模型鼠胰岛素抵抗状态。因此,FGF21能显著减轻MSG肥胖小鼠体重、改善胰岛素抵抗、逆转模型小鼠的肝内脂肪变性,这一发现为临床应用FGF21治疗非酒精性脂肪肝奠定了理论基础。
- 朱升龙张振宇任桂萍叶贤龙马蕾于丹韩苗苗赵景壮张天援李德山
- 关键词：成纤维细胞生长因子21胰岛素抵抗非酒精性脂肪肝谷氨酸钠
- 天冬酰胺合成酶B体外筛选模型的构建与应用
- 天冬酰胺合成酶B（AS-B）是一个广泛存在于植物和微生物体内催化天冬酰胺合成的关键性酶，已经证实为除草剂环庚草醚的靶标酶。本研究构建了AS-B的原核表达载体，用大肠杆菌表达系统表达了AS-B，并对其进行了纯化及活性测定。...
- 于丹
- 关键词：体外筛选原核表达载体放线菌发酵产物
- 文献传递
- FGF21基因优化及其生物活性研究被引量：6
- 2012年
- 成纤维细胞生长因子21(FGF21)是FGF家族的一员,它具有独立、安全以及有效地调节生物体内血糖水平的能力。为了提高FGF21蛋白的活性,将人FGF21(hFGF21)与鼠FGF21(mFGF21)的功能区互换,构建了一种新的FGF21基因(命名为hmFGF21)。通过基因重组的方法构建SUMO-hmFGF21表达载体后,转化大肠杆菌Rosetta中诱导表达。对融合蛋白进行纯化和酶切,获得的hmFGF21突变体纯度在95%以上,并在细胞水平和动物水平上检测了突变体的生物学活性。结果表明,与野生型hFGF21相比,相同菌量hmFGF21可溶性蛋白表达量提高了约2倍。人肝细胞模型HepG2的糖吸收实验显示,hmFGF21的葡萄糖吸收显著优于野生型hFGF21。2型糖尿病动物速效降糖实验和长效降糖实验表明,hmFGF21的降糖效果显著优于野生型hFGF21。这些结果说明,野生型hFGF21经优化改造后显著提高了其生物学活性。
- 叶贤龙高华山王文飞任桂萍刘明瑶何昆张雅坤赵景壮于丹李德山
- 关键词：葡萄糖吸收2型糖尿病
- 重组新城疫病毒rNDV-IL15在黑色素瘤治疗中的效果被引量：3
- 2014年
- 为了提高重组新城疫病毒抑制肿瘤的效果,本实验拯救获得了重组新城疫病毒rNDV-IL15。构建prNDV-IL15重组质粒,转染BHK21细胞后,拯救重组病毒rNDV-IL15,并测定病毒生长曲线;rNDV-IL15以0.1 MOI感染B16F10细胞,ELISA法检测细胞上清液中IL15的表达量;MTT法比较rNDV-IL15和rNDV在体外抑制B16F10细胞的效果,并比较了两者在黑色素瘤肿瘤模型中对荷瘤小鼠的治疗效果。结果表明,rNDV-IL15构建并成功拯救;病毒生长曲线表明,插入IL15后对病毒的生长无影响;IL15在细胞上清液中有较高的表达,达到(1 044.3±27.7)ng·mL-1;rNDV-IL15和rNDV对B16F10细胞的抑制率呈时间依赖性,但两者的抑制率无显著差异;与rNDV相比,rNDV-IL15在体内能较明显地抑制肿瘤生长。结果提示,rNDV-IL15是一种更有效的抗肿瘤制剂。
- 牛泽杉白福良孙田田辉尹杰超曹宏伟于丹田贵游吴云舟李德山任桂萍
- 关键词：重组新城疫病毒黑色素瘤B16F10抗肿瘤制剂
- 玉米皮色素的稳定性研究
- 2009年
- 玉米皮色素作为一种天然食用黄色素,与同类色素相比具有较好的稳定性。李平等采用95%乙醇在常温下浸泡提取玉米皮色素的方法进行了研究,表明:玉米皮色素具有一定耐氧化性和耐还原性,强氧化剂对玉米黄色素的影响较大,分子中的氧具有氧化性,可以将色素分子结构破坏,使其颜色发生变化,故在色素的使用过程中应避免与强氧化剂接触。而还原剂亚硫酸钠对玉米黄色素又起保护作用。而金属离子Fe3+对玉米黄色素的影响最大,破坏作用最强,其次是Ca2+、Cu2+、Al3+,而Fe2+、Zn2+影响不大,Na+、K+对玉米黄色素几乎没有影响。
- 于丹
- 关键词：稳定性氧化性
- 真空冷冻干燥技术在生物制药方面的应用被引量：1
- 2017年
- 生物制药是社会生活与发展过程中较为重要的部分,对于社会生活与生产有着很大的作用。生物制药的进行引起了人们广泛的关注,也成为当前发展中的重点。随着技术的发展,真空冷冻干燥技术有了很大的提高,对于生物制药方面也有较大的影响与帮助。本文重点对真空冷冻干燥技术在生物制药方面的应用进行了分析与研究,提出了真空冷冻干燥技术的优势,并且也提出一些在发展过程中需要重点注意的问题。
- 于丹
- 关键词：真空冷冻干燥技术生物制药
- 玉米皮色素的提取及其稳定性研究
- 于丹
- 关键词：超声波稳定性
- 复方水飞蓟片的研制及质量控制
- 刘程诚于丹关力赵宇颜玉薛宇孙皎孙佳王涛
- 根据统计中国现有9000万的乙肝患者和感染者,乙肝一直以来都是课题组国家一项重大的公共卫生问题,课题组国家的乙肝患者、感染者的胡亮长期以来占到了世界总数的1/3左右.护肝是中国的当前的紧要问题,水飞蓟的护肝效应引起了世界...
- 关键词：
- 关键词：乙肝治疗
- 成纤维细胞生长因子21在大肠杆菌细胞周质中的表达
- 2016年
- 成纤维细胞生长因子21(FGF21)是近期发现的糖脂代谢调节因子,其安全、有效和不依赖胰岛素调节血糖的特点,使其有望成为治疗糖尿病的新型药物。为研究人FGF21(h-FGF21)在大肠杆菌细胞周质表达,本实验在pET27b载体PelB(pectate lyase B)信号肽下游连入h-FGF21基因,成功构建了pET27bPelB-h-FGF21重组质粒,并发现pET27bPelB-h-FGF21转化E.coliBL21(含DE3)经诱导后能够在细胞周质成功地表达h-FGF21,表明PelB信号肽在h-FGF21细胞周质表达中起到了关键作用。经周质蛋白提取和两步离子交换层析,利用灰度分析软件分析得到了纯度大于95%的h-FGF21蛋白,SDS-PAGE与Western blotting结果证明了目的蛋白大小约20 k Da;经HepG2细胞的葡萄糖吸收实验以及在II型糖尿病db/db小鼠上的短期和长期血糖变化实验结果表明,细胞周质表达的h-FGF21(ph-FGF21)与胞内表达的FGF21(ih-FGF21)的生物学活性在统计学上无显著差异。
- 厉书杰叶贤龙吴强于引航于丹任桂萍李德山
- 关键词：信号肽糖尿病
- 聚乙二醇修饰的成纤维细胞生长因子-21的降血糖作用
- 2013年
- 成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是FGF家族的一员.现有大量研究表明,FGF-21是除胰岛素以外的一种新的血糖调节因子,有望成为治疗2型糖尿病的新型药物.然而,FGF-21在动物体内稳定性较差,半衰期较短,严重影响了其在临床上的应用.为解决这些问题,本实验采用分子质量为20 ku的单甲氧基聚乙二醇-丙醛(mPEG-ALD)对鼠源FGF-21(mFGF-21)进行N端定点修饰,以改善mFGF-21的性质(如提高体内半衰期、降低免疫原性等).本文研究了反应pH、反应时间、蛋白质浓度及反应物之间的质量比对mFGF-21与聚乙二醇(PEG)合成反应的影响.采用Capto Q阴离子交换层析或Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化聚乙二醇化mFGF-21(PEG-mFGF-21),并最终确定了mFGF-21聚乙二醇修饰的反应条件和分离PEG-mFGF-21的纯化工艺.随后分别进行了PEG-mFGF-21的理化性质(大小、纯度和体外稳定性)、免疫原性、体内半衰期、体外葡萄糖吸收活性及体内降糖活性的研究.体外稳定性实验结果显示,mFGF-21经PEG修饰后温度稳定性和抗蛋白酶水解稳定性都显著提高.间接ELISA方法检测血清中mFGF-21抗体水平及目标蛋白含量的结果表明,PEG修饰mFGF-21可明显降低其免疫原性,延长体内半衰期.HepG2细胞的葡萄糖吸收实验结果发现,PEG-mFGF-21的细胞活性并没有下降,反而随着刺激细胞时间的延长,经PEG-mFGF-21刺激的细胞葡萄糖吸收显著高于mFGF-21刺激的细胞葡萄糖吸收.2型糖尿病db/db小鼠短期血糖调控实验结果表明,mFGF-21降糖速度快于PEG-mFGF-21,但其持续时间较PEG-mFGF-21短;长期血糖调控实验结果显示,PEG-mFGF-21长期降糖效果优于mFGF-21,作用持续时间长,并且PEG-mFGF-21在停药后控制血糖的能力也高于mFGF-21.综上所述可知,mFGF-21的PEG修饰在不影响其体外生物活性的前提下,能够提高mFGF-21的物理稳定性和抵抗蛋白酶水解的能力、降低免疫原性、增加体内稳定性、延长
- 叶贤龙赵景壮任桂萍于丹刘铭瑶于引航李德山
- 关键词：聚乙二醇化葡萄糖吸收
