何华
- 作品数：17 被引量：87H指数：6
- 供职机构：华中农业大学更多>>
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- 一种支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗及应用
- 本发明属于动物基因工程疫苗制备技术领域。具体涉及一种支气管败血波氏杆菌aroA(5－烯醇丙酮酰莽草酸－3－磷酸合成酶)基因缺失菌株的构建，基因缺失疫苗的制备与应用。所述支气管败血波氏杆菌支气管败血波氏杆基因缺失菌株(Bo...
- 吴斌胡睿铭何华李伦勇汤细彪卢顺陈焕春金梅林何启盖
- 文献传递
- 钼肥对冬小麦生长的影响研究被引量：12
- 1996年
- 一直被认为对钼不敏感的小麦在黄棕壤上对钼比较敏感，钼肥拌种显著地促进冬小麦生长：提高麦苗株高，而且苗期株高差异一直维持到成熟期；增加分蘖苗，平均每公顷增加４５万苗以上，促进早分蘖，促进苗期生长代谢，增加干物质积累，施钼平均比对照于重增力０５０％左右，有效地促进越冬期壮苗壮蘖。
- 魏文学谭启玲许松林焦圣元杜华清何华周宏兰熊必圣王运华
- 关键词：钼肥冬小麦苗期生长
- 猪源支气管败血波氏杆菌百日咳杆菌黏附素基因的原核表达及其免疫原性与抗体检测ELISA方法研究
- 支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)可引起猪发生肺炎和萎缩性鼻炎。更重要的是,该菌的先期感染易于导致其它多种病原的继发感染,加重病情造成较严重损失。百日咳杆菌黏附素是由Bbprn...
- 赵战勤薛云吴斌汤细彪何华胡睿铭张建民陈焕春
- 关键词：支气管败血波氏杆菌免疫原性ELISA
- 文献传递
- 猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：31
- 2008年
- 【目的】探讨2003～2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 057份有肺炎或萎缩性鼻炎症状猪的肺脏等病料组织中分离出190株Bb和不同数量的其它共感染菌。经生化鉴定,药敏试验、血凝试验及动物试验等方法进行检测和分析。【结果】在中国湖北等十余省市的猪群中,不同省份Bb的总分离率介于7.3%～14.1%之间;不同年份Bb的总分离率介于7.3%～11.8%之间;2003～2006年间的Bb总分离率为9.2%;Bb的分离率与猪日龄有一定的关系。Bb最常见的共感染菌依次是链球菌(55.9%)、副猪嗜血杆菌(50.0%)、大肠杆菌(43.1%)、巴氏杆菌(25.5%)、绿脓杆菌(17.6%)和沙门氏菌(11.8%)。在43份有典型萎缩性鼻炎症状猪的病料中,分离出22株Bb、7株产毒素巴氏杆菌和6株绿脓杆菌;在分离出产毒素巴氏杆菌的7份病料中均同时分离出了Bb,而其中6份又同时分离出了绿脓杆菌。对2003年分离的31株Bb进行药敏试验、红细胞凝集试验和乳鼠皮肤坏死试验。结果表明:各菌株对15种药物的耐药谱不同,但对卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星和舒普深高度敏感;各菌株均可凝集猪和羊的红细胞且能不同程度导致乳鼠皮肤坏死。【结论】在中国湖北等十余省市的猪群中,Bb与其它病原菌的共感染情况非常严重,且在萎缩性鼻炎的病猪中检出率最高。
- 赵战勤裴洁薛云汤细彪吴斌何华周学利程相朝何启盖陈焕春
- 关键词：支气管败血波氏杆菌流行病学毒力因子
- 猪水肿毒素单抗竞争ELISA试剂盒的研制及应用被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法。以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒素抗体。经过研究确定抗原包被浓度为0.32μg.mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶2,酶标单抗工作浓度为1∶3200,血清抑制率大于40%为阳性。应用单抗竞争ELISA和细胞毒性中和试验同时对60份血清进行猪水肿毒素抗体检测,竞争ELISA的检出率为33.8%,细胞毒性中和试验检出率为30.9%,两者符合率达88.2%。试验结果表明,该ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便。本方法的建立在实验室诊断的标准化、猪水肿病疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有较高的应用价值。
- 张建民吴斌赵战勤卢顺何华向敏李利娅张福涛陈焕春
- 关键词：单克隆抗体单抗竞争ELISA抗体检测
- Asia Ⅰ口蹄疫vp2蛋白单克隆抗体的制备及单抗竞争ELISA方法的建立被引量：6
- 2008年
- 制备AsiaI口蹄疫病毒vp2单克隆抗体(mAb)并建立了单抗竞争ELISA方法。用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞。分别用ELISA、Western blotting检测mAb腹水的效价及其特异性。筛选到杂交瘤细胞2株,腹水效价均在100×29以上;以纯化后的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白作为抗原,利用AsiaI型口蹄疫病毒vp2单抗酶标物建立了竞争ELISA方法用来检测AsiaI型口蹄疫抗体。临床应用表明,该方法与UBI公司的口蹄疫全病毒抗体检测试剂盒总符合率达89.0%,和荷兰赛迪公司的口蹄疫病毒LPB-ELISA抗体检测试剂盒总符合率达86.5%。
- 向敏张克山卢顺蔡利军罗勇张建民何华王勤刚吴斌
- 关键词：口蹄疫单抗竞争ELISA单克隆抗体VP2蛋白
- 猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
- [目的]探讨2003～2006年间支气管败血波氏杆菌(Bb)在中国猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。
[方法和结果]采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定，从2057份有肺...
- 赵战勤吴斌裴洁何启盖胡睿铭汤细彪何华金梅林陈焕春
- 关键词：支气管败血波氏杆菌流行病学病原菌生物学特性
- 文献传递
- 一种表达猪源支气管败血波氏杆菌fhaB和prn基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌株、疫苗及应用
- 本发明属于动物细菌基因工程领域，涉及一种不含抗性标记的表达猪源支气管败血波氏杆菌fhaB和prn基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌株的构建、疫苗制备及应用。得到一株不含抗性标记的表达猪源支气管败血波氏杆菌fhaB和prn基因片...
- 吴斌赵战勤陈焕春郭爱珍何启盖金梅林周锐徐引弟胡睿铭汤细彪卢顺薛云何华
- 文献传递
- 重组产毒多杀性巴氏杆菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性及免疫原性被引量：8
- 2008年
- 将5个toxA基因片段N1518、C2345、N3172、N3388和C2115分别克隆到合适的原核表达载体pET-28a(b,c)系统,其中pET28a-N1518和pET28b-C2115在大肠杆菌成功表达,获得大小分别为57kDa和78kDa的融合蛋白rPMT-N和rPMT-C,Western blot检测证实两种表达产物均具有反应原性。分别以200μg rPMT-N和rPMT-C对小白鼠进行体内生物学活性试验,结果两种表达蛋白均不能致死小白鼠;体外细胞毒性试验证实896ng/mL的rPMT-N能使Vero细胞发生病变,而rPMT-C对Vero细胞无明显毒性作用。将rPMT-N和rPMT-C制成亚单位疫苗,同时设天然PMT及无菌PBS对照组,间隔2周分2次皮下免疫小白鼠。二免后2周用8.2×10~5 CFU的HN-13株T^+Pm进行腹腔攻毒,结果rPMT-N组保护率为90.0%(9/10),rPMT-C组保护率为50.0%(5/10),天然PMT组保护率为80.0%(8/10)。综上试验表明,rPMT-N具有良好的生物学活性和免疫原性,可作为PAR疫苗添加成分,显示了良好的应用前景。
- 汤细彪吴斌赵战勤邓永何华何启盖陈焕春
- 关键词：产毒多杀性巴氏杆菌PMT生物学活性免疫原性
- 一种支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗及应用
- 本发明属于动物基因工程疫苗制备技术领域。具体涉及一种支气管败血波氏杆菌aroA(5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶)基因缺失菌株的构建，基因缺失疫苗的制备与应用。所述支气管败血波氏杆菌支气管败血波氏杆基因缺失菌株(Bo...
- 吴斌胡睿铭何华李伦勇汤细彪卢顺陈焕春金梅林何启盖
- 文献传递
