卢红艳
- 作品数：30 被引量：91H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项“十五”国家科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高氧对早产大鼠肺表面活性蛋白C表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨高氧对早产大鼠肺表面活性蛋白C(SP-C)表达的影响。方法孕21dSD早产大鼠,生后12～24h内随机分为空气组、高氧组。于空气或高氧暴露后1、4、7、10和14d提取肺组织,采用RT-PCR测定SP-C mRNA表达,免疫组化和Western-blot检测SP"C蛋白表达。结果早产大鼠生后肺组织SP-C表达1d时最高,4d后表达渐减弱,其阳性染色信号主要定位于Ⅱ型肺泡上皮细胞。高氧暴露1d,肺组织SP-C mRNA及蛋白表达显著低于空气组,以后增加,高氧7d增加最明显,高氧14d时SP-C表达较空气组又减弱。结论SP-C参与了早产大鼠肺发育及高氧肺损伤的生理与病理过程,高氧暴露导致SP-C表达下调或功能障碍是促使高氧肺损伤发生发展的重要因素。
- 卢红艳常立文李文斌姜娜彭琼玲蔡成
- 关键词：早产肺发育高氧肺损伤
- 高氧对早产大鼠肺组织细胞色素氧化酶亚基Ⅰ表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的探讨85%高体积浓度氧暴露对早产新生大鼠肺组织中线粒体DNA编码细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COXⅠ)动态表达的影响。方法早产SD大鼠生后d2随机分为空气组、高氧组。高氧组持续暴露于85%氧气中,空气组置于同一室内常压空气中。两组分别于暴露满1、4、7、10和14 d时,提取肺组织RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定COXⅠmRNA表达;采用免疫组织化学、免疫印迹(Western-blot)法检测COXⅠ蛋白表达。结果1.与空气组相比,高氧d1和d4 COXⅠmRNA的表达显著增强(P<0.05,0.01),其后开始下降,d7时两者无显著性差异(P>0.05),d10时较空气组显著降低(P<0.01),d14时又增高(P<0.01)。2.COXⅠ蛋白水平表达,与空气组相比,高氧d1和d4时,COXⅠ表达显著增强(P<0.01,0.05),d7时两者无显著性差异(P>0.05),其后开始下降,d10和d14时较空气组显著降低(P<0.01,0.05)。结论85%高体积浓度氧暴露诱导早产新生大鼠线粒体DNA编码COXⅠ异常表达,这种变化可能参与高氧肺损伤的发生。
- 姜娜常立文卢红艳李文斌彭琼玲蔡成
- 关键词：高氧早产
- 高氧对早产大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞转分化的影响被引量：9
- 2006年
- 目的:探讨高氧对早产鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeIIalveolarepithelialcells,AECⅡ)转分化的影响。方法:原代培养早产大鼠的AECⅡ,建立高氧细胞损伤模型。利用倒置相差显微镜和透射电镜观察细胞的形态变化。用免疫细胞化学染色法检测AECⅡ特异性肺泡表面活性蛋白-C(surfactantproteinC,SP-C)及Ⅰ型肺泡上皮细胞(typeⅠalveolarepitheli-alcells,AECⅠ)特异性水通道蛋白5(aquaporin5,AQP5)的表达。用RT-PCR和流式细胞术分别检测SP-C、AQP5mRNA及蛋白的表达。结果:随着给氧时间的延长,原代培养的AECⅡ伸展变平,失去其板层体及微绒毛,丧失AECⅡ的特性,获得AECⅠ样外观。伴随其形态学改变,AECⅡ逐渐停止表达其特异性蛋白SP-C,开始表达AECⅠ特异性蛋白AQP5。高氧组给O2后24、48及72h,SP-CmRNA、SP-C+细胞的表达率及荧光指数(fluorescenceindex,FI)较同时间点的空气组明显降低,AQP5的上述指标在24h和48h则较空气组明显增加。高氧组给O2后72h,AQP5的表达开始减弱,与同时间点的空气组相比较无明显差异。结论:高氧诱导的早产大鼠AECⅡ转分化在肺泡上皮细胞损伤的修复中起重要作用。
- 卢红艳常立文汪鸿李文斌王华
- 关键词：转分化高氧肺损伤早产大鼠
- 高氧下调早产大鼠肺组织AQP5的表达被引量：4
- 2007年
- 目的探讨水通道蛋白5(AQP5)在早产大鼠及吸高氧过程中的肺动态表达。方法剖宫术取出孕21d SD早产鼠,于12～24h内随机分为对照组和高氧组。分别在1、4、7、10和14d时提取肺组织,RT-PCR测定AQP5 mRNA表达,免疫组化和Western blot检测AQP5蛋白的表达。结果早产大鼠生后肺组织AQP5表达不断增强,其阳性染色主要定位于Ⅰ型肺泡上皮细胞。高氧暴露1d时,仅肺组织AQP5 mRNA表达显著高于对照组(P<0·05),而高氧暴露4、7、10及14d时,其mRNA及蛋白表达均明显减少(P<0·05或P<0·01)。结论AQP5通过调节肺水平衡,在早产大鼠肺泡化形成的关键时期发挥重要作用;高氧暴露导致AQP5表达下调是促使肺损伤发生、发展的重要因素。
- 卢红艳常立文李文斌姜娜彭琼玲蔡成刘敬
- 关键词：水通道蛋白5早产肺发育高氧水平衡
- 高氧、维甲酸对早产鼠肺组织基质金属蛋白酶-2、-9及特异性组织抑制物-1、-2表达的影响被引量：5
- 2007年
- 目的探讨基质金属原蛋白-2(MMP-2)、MMP-9、基质金属蛋白酶特异性组织抑制物-1(TIMP-1)和TIMP-2在高氧肺损伤中的作用及维甲酸(RA)的保护作用机制。方法建立高氧(FiO285%)暴露早产SD大鼠肺损伤模型,应用RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA表达,采用明胶酶谱检测MMP-2和MMP-9酶原及活酶表达,采用Western blot技术检测TIMP-1和TIMP-2蛋白表达。结果与空气组比较,高氧暴露4、7、14d,MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达均显著升高(P均<0.01),MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶和TIMP-1蛋白的表达明显上调(P<0.05);RA对空气暴露下它们的表达均无明显影响(P均>0.05),但不同程度下调高氧暴露后MMP-2、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达和MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶的表达,进一步提高TIMP-1蛋白表达;高氧、RA对TIMP-2 mRNA和蛋白的表达均无明显影响(P均>0.05)。结论高氧暴露明显改变MMPs/TIMPs的表达,在肺泡形成关键时期,MMPs/TIMPs之间平衡关系的破坏是造成肺发育受阻和纤维化的重要因素;通过协调MMPs/TIMPs之间的表达,改善肺泡结构,降低肺纤维化程度,从而逆转高氧所致肺损伤,是RA发挥保护作用的重要机制之一。
- 李文斌常立文容志惠刘汉楚张谦慎陈红兵祝华平卢红艳王华
- 关键词：高氧肺损伤维甲酸
- 与成纤维细胞共培养的肺泡II型上皮细胞的生物学特性被引量：5
- 2007年
- 建立胎鼠肺泡II型上皮细胞(AECII)与肺成纤维细胞(LF)共培养模型,观察与LF共培养下AECII的生物学特性。倒置相差显微镜观察AECII形态和基本生长情况;RT-PCR和流式细胞术分别检测肺泡表面活性蛋白-C(SP-C)、水通道蛋白5(AQP5)mRNA及蛋白质表达;流式细胞术检测细胞周期及Ki67表达。结果显示,与LF共培养时,AECII能较好地保留其细胞形态,SP-CmRNA及其蛋白质表达明显增加,而AQP5mRNA及其蛋白质表达则明显减少;LF促进AECII增殖,使G2/M、S期细胞及表达Ki67+细胞的比率明显增多。结果提示,AECII与LF共培养时,能更好地保留其细胞形态、分化及增殖特性。
- 卢红艳常立文汪鸿李文斌
- 关键词：肺成纤维细胞共培养生物学特性
- 早产大鼠高氧肺损伤组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶的动态表达及其意义被引量：3
- 2007年
- 目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1、2、5在早产大鼠高氧肺损伤组织中的动态表达及其意义。方法早产新生大鼠生后1d随机分为高氧和空气组,高氧组持续暴露于850mL/L氧气中,空气组置同一室内常压空气中。分别取二组大鼠高氧或空气暴露后1、4、7、10和14d肺组织标本,采用HE染色观察肺组织形态学改变,采用RT-PCR法在mRNA水平检测NADH脱氢酶亚单位1、2、5的表达。结果1.高氧暴露1、4d,早产大鼠肺组织形态较空气组无明显改变;高氧暴露7、10d,肺组织渐出现小血管充血扩张,肺泡腔内炎性细胞浸润,肺泡间隔增厚,肺泡数目减少、结构简单化和囊泡化等改变。2.空气组NADH脱氢酶亚单位1(ND1)和亚单位2(ND2)mRNA的表达随日龄增长渐降低,至7d时最低,随后其表达逐渐增高;空气组NADH脱氢酶亚单位5(ND5)mRNA的表达随日龄增长渐降低,至4d时最低,随后其表达逐渐增高。3.与同时间点空气组相比,高氧暴露后1、4和7dND1和ND5mRNA表达显著增强(Pa<0.05),随后其表达渐下降,10、14d时低于空气组,但二者相比差异无显著性意义(Pa>0.05);与同时间点空气组相比,高氧暴露后1、4d ND2 mRNA表达二组间差异无显著性意义(Pa>0.05),7d时较空气组极显著增强(P<0.01),10、14d时较空气组显著降低(Pa<0.05)。结论高氧可导致早产大鼠肺组织NADH脱氢酶表达改变,提示其可能参与高氧肺损伤的病理生理过程。
- 彭琼玲常立文卢红艳蔡成姜娜李文斌
- 关键词：早产高氧肺损伤脱氧核糖核酸线粒体
- 细胞色素b在早产新生大鼠高氧肺损伤肺组织中的表达和意义
- 2007年
- 目的探讨细胞色素b(cytochrome b,Cytb)与高氧肺损伤发生、发展的关系。方法早产新生SD(Sprague-Dawley)大鼠生后1d随机分为空气组、高氧组,高氧组持续暴露于常压氧舱中,氧浓度>85%;空气组置于同一室常压空气中。两组分别于高氧或空气暴露后1、4、7、10和14d时提取肺组织RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Cytb mRNA表达;同时应用免疫组化方法检测肺组织切片中Cytb蛋白表达;应用Western-blot检测高氧肺损伤肺组织中Cytb蛋白水平的表达变化。结果与空气组相比,高氧暴露1d、4dCytb mRNA含量及其表达显著增强(P<0.05);7d后Cytb呈下降趋势,其表达较空气组减弱,但两者相比差异无统计学意义(P>0.05)。高氧暴露后,随日龄变化肺组织Cytb免化结果与Cytb mRNA表达相似;与空气组相比,高氧暴露1d、4d肺组织Cytb表达显著增强(P<0.05);7d后Cytb呈逐渐下降趋势,其表达较空气组减弱,但7、10d两组相比差异无统计学意义,14d极显著减弱(P<0.01)。Western-blot实验结果:与空气组相比,高氧暴露1d、4dCytb蛋白水平表达增强但两组相比差异无统计学意义(P>0.05);7d后Cytb呈下降趋势,其表达较空气组减弱,但7、10d两组相比差异无统计学意义(P>0.05),而14d显著减弱(P<0.05)。结论85%高浓度氧暴露诱导早产新生大鼠线粒体编码的Cytb异常表达,这种变化可能参与高氧肺损伤的发生。
- 蔡成常立文刘敬姜娜彭琼玲卢红艳
- 关键词：高氧早产大鼠细胞色素B肺损伤WESTERN-BLOT
- Notch信号在胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞与成纤维细胞共培养体系中的表达
- 2007年
- 目的建立肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)与肺成纤维细胞(LF)共培养模型,检测胎鼠AECⅡ共培养和单独培养时Notch1、3受体表达的变化。方法应用Millipore插入式培养皿和Costar六孔板构建AECⅡ/LF共培养模型,将未接种LF的Millicell2PCF插入式细胞培养皿置于接种有AECⅡ的培养板为AECⅡ单独培养组。光镜、透射电镜观察共培养与单独培养条件下AECⅡ大体形态、超微结构;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其AECⅡ增殖活力;反转录PCR法检测其AECⅡ分泌表面活性蛋白C(SP-C)功能,并用荧光定量PCR法检测其AECⅡNotch1、3mRNA的表达。结果AECⅡ/LF共培养组较AECⅡ单独培养组稳定保持了其立方形结构和细胞表型并克隆样生长,增殖活力强。电镜下可见单独培养48hAECⅡ呈现AECⅠ样改变,而共培养AECⅡ维持其正常生理形态。与单独培养组比较,共培养组AECⅡ分泌SP-C明显增多(P<0.05),Notch1 mRNA表达显著升高(P<0.05),而Notch3 mRNA显著降低(P<0.05)。结论AECⅡ同型细胞培养时转分化为AECⅠ,不同型细胞(AECⅡ/LF)共培养抑制其转分化,此转分化过程受Notch信号分子调控。
- 汪鸿常立文卢红艳李文斌蔡成黄光焰陈燕
- 关键词：肺成纤维细胞共培养NOTCH转分化
- 细胞色素氧化酶mRNA在高氧暴露早产大鼠肺组织中的表达变化被引量：1
- 2007年
- 目的观察85%高浓度氧(高氧)暴露下早产新生大鼠肺组织的病理改变及线粒体DNA编码细胞色素氧化酶亚基(COXI、COXII、COXIII)mRNA表达的动态变化,探讨其在早产大鼠高氧肺损伤发生、发展中的可能作用。方法早产SD大鼠生后1d随机分为空气组、高氧组。高氧组持续暴露于85%氧气中,空气组置于同一室内常压空气中。两组分别于暴露满1、4、7、10和14d时,每组取动物8只,行肺组织病理学检查,半定量逆转录聚合酶链反应测定COXI、COXII和COXIII mRNA的表达。结果(1)高氧暴露4d即可见肺泡炎和肺发育滞后的改变。(2)与同时间点空气组相比,高氧暴露1d和4d时,COXI mRNA的表达显著增强(P<0.05和P<0.01),其后开始下降,7d时两组差异无显著性(P>0.05),10d时较空气组显著降低(P<0.01),14d时复又增高,且明显高于空气组,差异有非常显著性(P<0.01)。COXII和COXIII mRNA在各时间点的表达差异无显著性。结论85%高氧暴露诱导早产新生大鼠肺组织线粒体DNA编码COX亚基异常表达,这种变化可能参与了高氧肺损伤的发生。
- 姜娜常立文卢红艳李文斌蔡成彭琼玲
- 关键词：高氧肺损伤细胞色素氧化酶
