吕学军
- 作品数：10 被引量：56H指数：4
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- Caveolin-1在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制中的作用进展被引量：4
- 2009年
- 吕学军李玉英钱桂生
- 关键词：窖蛋白急性肺损伤急性呼吸窘迫综合征
- COPD患者急性加重期呼吸道分泌性白细胞蛋白酶抑制剂含量调节机制研究进展被引量：3
- 2016年
- 慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者稳定期呼吸道内分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)含量增加,急性加重期反而下降,这种现象以蛋白酶的反向调节、TGF-β1/Smads信号通路的下调、病原体多种机制参与SLPI含量的调控等假说为主,但确切机制尚未完全阐明。
- 刘俊彦李玉英吕学军赵维钱桂生
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病中性粒细胞弹性蛋白酶转化生长因子Β
- 筛选小鼠Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库的构建被引量：1
- 2015年
- 目的利用酵母单杂交系统筛选与Cltb基因启动子结合的顺式元件,获得调控Cltb基因表达的转录因子,阐明Cltb基因的转录调控机理。方法首先,构建表达Cltb调控序列的诱饵质粒p Bait-Ab Ai,并将诱饵质粒转入Y1HGold菌株,构建可稳定表达"诱饵-报告子"的酵母菌株;然后,运用SMARTTM技术构建小鼠肺组织酵母单杂交c DNA AD融合表达文库,并进行c DNA文库的筛选。结果成功构建了筛选Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库,该文库的转化效率为:9.35×105CFU/μg。通过对文库的筛选最后获得了5个阳性克隆并测序,得到5个可编码结合蛋白的基因,分别是Srrt、hnRNPs A/B、Irf1、NKx2.5和Zfp953。结论所构建的酵母单杂交文库符合实验要求,筛选的5个转录因子为研究Cltb基因表达调控奠定了基础。
- 吕学军陆卫忠张永娟郭亮李少莹李玉英钱桂生
- 关键词：转录调控
- 酵母双杂交筛选Clathrin相互作用蛋白被引量：2
- 2014年
- 目的应用酵母双杂交技术从小鼠肺cDNA文库中筛选与Clathrin相互作用蛋白,进一步阐明Clathrin在急性肺损伤和急性呼吸窘迫症(ALI/ARDS)发生时肺泡上皮极性损伤中的具体作用机制。方法首先构建酵母双杂交pSos-Clathrin诱饵载体,酶切鉴定,然后确定Clathrin诱饵蛋白无自激活特性并检测了Clathrin诱饵蛋白的表达;最后筛选小鼠肺cDNA文库并对筛选得到的阳性克隆进行回转验证,对回转验证结果为阳性的文库克隆质粒送检测序,分析克隆序列。结果酵母双杂交筛选小鼠肺cDNA文库得到4个与Clathrin相互作用蛋白,分别是:腺苷酸环化酶关联蛋白1,细丝蛋白α,DAP凋亡诱导蛋白激酶2和G蛋白耦联受体激酶6。结论 Clathrin参与细胞极性调节、炎症损伤和细胞凋亡等过程。
- 吕学军陆卫忠张永娟郭亮李少莹李玉英钱桂生
- 关键词：急性肺损伤细胞极性酵母双杂交
- IL-8／CXCR2轴促进兔内皮祖细胞迁移、增殖及VEGF的表达被引量：4
- 2009年
- 目的观察不同浓度白介素-8(interleukin-8,IL-8)对体外培养兔外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能的影响,探讨趋化因子IL-8/CXCR2轴对EPCs血管生成功能的作用。方法密度梯度离心法获取兔外周血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs),接种至纤维连接蛋白(fibronectin,FN)包被的培养板上,培养7～10d后收集贴壁细胞鉴定EPCs,并用不同浓度IL-8的培养基继续培养24h后采用MTT比色法、改良的Boyden小室实验,观察EPCs的迁移和增殖能力;采用RT-PCR、Western blot方法检测CXCR2、VEGF mRNA及蛋白表达水平。结果IL-8显著增加兔外周血EPCs的增殖和迁移能力(P<0.05),且随着IL-8浓度升高而增强。IL-8促进CXCR2膜受体和VEGF的表达,且随着IL-8浓度增加而增加。结论IL-8/CXCR2轴能显著促进EPCs的迁移、增殖及VEGF的表达。
- 毛梅吕学军王艺徐剑铖
- 基因芯片筛选Sirt1在小鼠急性呼吸窘迫综合征炎症损伤中相互作用的基因被引量：1
- 2017年
- 目的筛选小鼠急性呼吸窘迫综合征炎症损伤中与Sirt1相互作用的基因,探讨Sirt1在急性呼吸窘迫综合征炎症反应中的作用机制。方法购买Sirt1过表达(Tg)小鼠和野生型(WT)小鼠,饲养、繁殖、鉴定新生小鼠基因型;Western Blot鉴定小鼠肺组织Sirt1表达差异;建立ARDS小鼠模型,观察ARDS小鼠肺组织HE染色病理变化,并采用ELISA检测两种ARDS小鼠肺组织IL-6表达差异;采用基因芯片筛选Sirt1在小鼠ARDS炎症损伤中相互作用的基因。结果通过聚合酶链反应鉴定出Tg和WT两种不同基因型的小鼠;免疫印迹法检测小鼠肺组织Sirt1的表达差异结果提示Tg小鼠肺组织Sirt1含量显著高于WT小鼠(P=0.001);不同浓度LPS腹腔注射12 h后小鼠肺组织HE染色病理变化提示随着LPS用量增加,两种小鼠肺组织损伤程度明显增加,且WT-ARDS小鼠的肺组织损伤程度比Tg-ARDS小鼠更为严重;当LPS用量达到20 mg/kg时两组小鼠存活率<50%;两种小鼠腹腔注射LPS(15 mg/kg)后,肺组织IL-6的表达随时间推移逐渐呈现逐渐增高的趋势,在3,6,12,24 h WT-ARDS组肺组织IL-6表达浓度显著高于Tg-ARDS组(P<0.05),尤其在12 h差异最为显著(P=0.007)。基因芯片筛选出在小鼠ARDS炎症损伤中与Sirt1相互作用的基因有Ubd,Ube2d2b,Olfm4,Il1rl1,Hivep3和Lpar1。结论 Sirt1可能通过调控Ubd,Ube2d2b,Olfm4,Il1rl1,Hivep3和Lpar1的表达减轻ARDS小鼠的炎症损伤。
- 刘俊彦吕学军赵维胡明冬李玉英王关嵩徐剑诚钱桂生
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征核转录因子ΚB
- SIGIRR胞内TIR区/GST融合蛋白表达载体的构建及重组蛋白表达
- 目的构建谷胱甘肽硫转移酶(GST)标签的人单免疫球蛋白IL-1受体相关分子(SIGIRR)胞内TIR区融合蛋白原核表达载体,并诱导、纯化、鉴定其表达。方法采用PCR技术扩增出SIGIRR胞内TIR区(480-1230bp...
- 李少莹郭亮吕学军吴学玲钱桂生
- Sirt1通过去乙酰化NF-κB/p65减轻小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞脂多糖损伤被引量：4
- 2017年
- 目的研究酵母沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin type 1,Sirt1)在肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)脂多糖(LPS)损伤中对NF-κB的作用。方法购买Sirt1过表达(Tg)小鼠和野生型(WT)小鼠,饲养、繁殖、鉴定新生小鼠基因型;通过qRT-PCR和Western blot鉴定Tg小鼠和WT小鼠肺组织Sirt1 mRNA和蛋白表达差异;两种不同Sirt1基因背景的小鼠LPS(15 mg/kg)腹腔注射12 h后,HE染色鉴定肺组织病理变化差异;分离纯化两种小鼠的AECⅡ并进行鉴定;两种不同Sirt1基因背景的AECⅡ用LPS 10μg/mL处理后,分别在0、2、4、6、8、12、24 h用ELISA检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;用LPS 10μg/mL处理两种AECⅡ,同时设置生理盐水对照组,12 h后用Western blot鉴定细胞NF-κB/p65蛋白和乙酰化NF-κB/p65蛋白的表达差异。结果新生小鼠有Tg和WT两种不同的基因型;Tg小鼠肺组织Sirt1 mRNA和蛋白的表达水平显著高于WT小鼠(P<0.05);小鼠腹腔注射LPS 15 mg/kg 12 h后肺组织病理变化显示,Tg小鼠较WT小鼠肺组织损伤程度轻;两种AECⅡ用LPS 10μg/mL处理后,细胞上清液中IL-6和TNF-α的表达水平随时间推移呈现逐渐升高的趋势,Tg组AECⅡ细胞上清液中IL-6和TNF-α的表达水平在多个时间点都显著低于WT组(P<0.05);两种AECⅡ经LPS(10μg/mL)处理后,与各自的空白对照组相比Sirt1含量下降,且WT组AECⅡ下降更明显,LPS处理后WT组AECⅡ的NF-κB/p65和乙酰化NF-κB/p65的变化倍数均高于Tg组。结论 Sirt1可能通过去乙酰化NF-κB/p65参与调控AECⅡLPS炎症损伤,抑制急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)小鼠肺部炎症反应。
- 刘俊彦吕学军赵维胡明冬李玉英王关嵩徐剑诚钱桂生
- 关键词：SIRT1急性呼吸窘迫综合征NF-ΚB
- 标准化病人选择、培训与应用探索思考被引量：30
- 2017年
- 标准化病人在国内临床教学和考试中具有广泛的应用前景,但人员的招募、培训、应用等多个环节成为制约其在国内教学普及的难点,通过分析新桥医院呼吸内科标准化病人团队的建设,总结标准化病人的选择、培训与应用经验,以期能为课堂和临床教学提供更多的参考。
- 刘俊彦吕学军赵维李玉英
- 关键词：标准化病人临床教学医学教育
- 标准化病人在呼吸科住院医生规范化培训中的应用被引量：8
- 2016年
- 目的研究标准化病人带教对呼吸科住院医生规范化培训的意义。方法将呼吸科规范化培训学员随机分为对照组和实验组,对照组采用传统方式带教,实验组除采用传统方式外,还利用标准化病人每天进行两小时问诊、查体及诊断思路的培训,为期两个月。培训结束后,对两组进行理论知识、病史采集、体格检查和病例分析测试。结果实验组学员体格检查、病史采集及病例分析成绩均明显高于对照组(P<0.05)。结论在住院医生规范化培训带教中应用标准化病人,可以显著提高学员问诊、体检和临床诊疗技能水平,值得推广应用。
- 吕学军刘俊彦赵维魏征华郭亮李玉英
- 关键词：标准化病人住院医生呼吸科
