吴标
- 作品数：5 被引量：99H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 竹节花黄斑驳病毒启动子的缺失分析及功能被引量：10
- 1999年
- 竹节花黄斑驳病毒（ＣｏＹＭＶ）是侵染单子叶植物竹节花的一种双链环状ＤＮＡ病毒，它的启动子可介导外源基因在烟草韧皮部特异表达。为了研究其组织特异性表达的最佳启动子区域，对ＣｏＹＭＶ启动子进行了５′端五种不同长度的缺失分析，用不同长度的启动子片段与ＧＵＳ基因及ＮＯＳ３′端转录中止序列构建了全长启动子及５个缺失启动子序列的六个嵌合ＧＵＳ基因植物表达载体。利用农杆菌将上述嵌合基因转化烟草外植体后，每种表达载体都获得了一批转基因烟草植株。转化再生烟草植株的ＰＣＲ分析、ＧＵＳ酶活测定及ＧＵＳ组织染色的结果表明六种类型的嵌合基因已整合到烟草染色体中，并有五种表达出ＧＵＳ活性。缺失到８７０ｂｐ的启动子比全长启动子（１０４０ｂｐ）的活性约高７８％，８７０ｂｐ比５８５ｂｐ启动子介导的ＧＵＳ活性略高但差别不明显，缺失到４４７和２３２时ＧＵＳ活性有明显下降，但仍具有韧皮部特异表达的特性。当缺失到ＴＡＴＡｂｏｘ附近的４４ｂｐ时启动子丧失组织特异性，ＧＵＳ活性也降低到测不出来的水平。以上结果表明ＣｏＹＭＶ启动子从转录起始位点上游８７０ｂｐ～２３０ｂｐ及２３２ｂｐ下游区分别与启动子的活性和韧皮部组织特异性密切相关，８７?
- 吴标潘瑞琴芦睿田颖川
- 关键词：启动子转基因烟草植株
- 转雪花莲外源凝集素基因烟草对桃蚜的抑制作用被引量：68
- 1998年
- 将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的ｃＤＮＡＧＮＡ１２和其前体蛋白ｃＤＮＡＧＮＡ３４插入到二元载体ｐＢｉｎ４３８的双倍增强子ＣａＭＶ３５Ｓ启动子或二元载体ｐＢｃｏｐ１的ＣｏＹＭＶ启动子下游，分别构建成植物表达载体ｐＢＧｎａ１２、ｐＢＧｎａ３４、ｐＢＣＧｎａ１２和ｐＢＣＧｎａ３４。土壤农杆菌介导的转化再生植株的ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，ＧＮＡ基因已整合到烟草ＤＮＡ中。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现ｐＢＧｎａ３４和ｐＢＣＧｎａ３４的转基因植株能有效地表达外源ＧＮＡ，表达量约占可溶性总蛋白的００８％～０１５％，并且前体蛋白基因编码的蛋白在植物体内进行了正确的加工；而ｐＢＧｎａ１２和ｐＢＣＧｎａ１２的植株几乎检测不到外源ＧＮＡ的表达。有效表达外源ＧＮＡ的ｐＢＧｎａ３４和ｐＢＣＧｎａ３４的转基因植株具有较强的抗蚜活性，平均能够抑制桃蚜（Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ）４５％～６０％蚜口密度，有的高达９０％以上。在转基因烟草中含双倍增强子的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子与韧皮部特异表达的ＣｏＹＭＶ启动子介导ＧＮＡ基因表达具有相似的强度，但它们的抗蚜活性存在差异。
- 周岩田颖川吴标莽克强
- 关键词：凝集素转基因烟草蚜虫烟草抗虫性
- 竹节花黄斑驳病毒启动子在棉花维管组织中是一个强启动子被引量：8
- 2000年
- 用竹节花黄斑驳病毒 (CommelinaYellowMottleVirus,CoYMV)启动子_gus嵌合基因和CaMV 35S_gus嵌合基因通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)LBA44 0 4介导分别转入棉花 (Gossypiumhir sutumL .cv .Jingmian 7,J7G) ,诱导再生了棉花转基因植株。GUS活性的组织化学定位检测表明 ,在 5 97bpCoYMV启动子的驱动下 ,gus基因在棉花植株的叶、叶柄、苞叶、茎、根、下胚轴的维管组织及花的大部分组织的维管束中高表达。在含有较多维管组织细胞的叶脉和根中 ,CoYMV启动子_gus的表达活性与CaMV 35S_gus相当或更高 ,但在维管组织细胞含量相对较少的叶片、子叶和下胚轴中 ,CoYMV启动子_gus的表达活性仅为CaMV 35S_gus的 1/3～ 1/5。转CaMV 35S_gus基因棉花植株的叶脉与叶片GUS活性比例为 0 .5 ,而转CoYMV启动子_gus基因棉花约为 2 .0。随着转基因棉花的生长发育 ,gus基因在叶维管束中的表达活性有增强的趋势。以上结果表明CoYMV启动子在转基因棉花中具有维管束特异性。
- 袁正强吴家和吴标李燕娥陈志贤李淑君田颖川
- 关键词：维管组织GUS
- CoYMV启动子的缺失分析及其介导Gus基因在韧皮部特异表达的研究
- 吴标
- 关键词：GUS基因转基因植物
- 苹果叶片再生的改进及抗虫基因植株的获得被引量：19
- 1996年
- 用分别含有全部改造和部分改造的Ｂｔ基因植物表达载体ｐＢ４８．７和ｐＢ４８．６的土壤农杆菌转化苹果优良品种（红富士、早生富士、辽伏）的叶片外植体，经过对ＭＳ培养基成分调整，在Ｎｔ保持不变的条件下以（ＮＨ４）：ＳＯ４取代ＮＨ４ＮＯ３，使得转化后再生频率大增，现已获得２３２株转化再生植株，这些植株可以在合５０ｍｇ·Ｌ－１的卡那霉素培养基上生长，选出部分植株作ＰＣＲ检测，表明Ｂｔ基因已被导入这些苹果品种中。
- 裴东田颖川刘群禄吴标奚声珂莽克强
- 关键词：BT基因苹果树叶片
