目的制备具有不同官能团(-CH3、-COOH、-OH、两性基团)的聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)平板膜,并了解其对血浆蛋白吸附情况与对白细胞、血小板的黏附效果。方法利用紫外改性的方法,将不同单体接枝到PBT表面,得到PBT-AA(-COOH)、PBT-HEMA(-OH)、PBT-SMDB(两性基团)并进行表征。采用ELISA测定吸附的人血清白蛋白(HSA)、纤维蛋白原(Fgn)含量,扫描电镜(SEM)观察黏附白细胞、血小板数量。结果 HSA吸附量(μg/cm2),PBT、PBT-AA分别为:15.05±4.51vs 35.61±6.91(P<0.01);Fgn吸附量(μg/cm2),PBT、PBT-HEMA、PBT-SMDB分别为:19.85±1.93 vs 14.93±4.05 vs 17.04±2.10(P<0.05)。4种材料在吸附HSA、Fgn前后,黏附的WBC、Plt均发生明显变化(P<0.01)。结论 Fgn对2种血小板和白细胞的黏附均有促进作用,而HSA对白细胞的黏附有一定抑制性。通过四种材料的比较发现,PBT-AA滤除白细胞及保留血小板的效果更好。
目的分析人血小板及其洗涤后获得的各组分补体灭活前后对小鼠成纤维细胞(L929)和人成纤维细胞(HDP)的增殖作用。方法将所制备的新鲜人富血小板血浆(PRP)3份及血小板浓缩液(PC)5份(50 mL/份),分别用20 mL 0.9%生理盐水洗涤2次,重悬以获得贫血小板血浆(PPP)、生理盐水上清、洗涤血小板(WP)3个组分,同未经处理的PRP及PC一道,分别冻融留取对照样品后作补体灭活处理,ELASA方法测试补体灭活前后血小板源性生长因子(PDGF-AB)、转化生长因子(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)含量,CCK-8试剂盒测定补体灭活前后对L929/HDP细胞的增殖作用。结果 PRP及洗涤各组分补体灭活前后PDGF-AB、VEGF及EGF含量比较,P>0.05,PC及各组分补体灭活前后PDGF-AB、VEGF、EG及TGF-β1含量比较均无明显差异(P>0.05)。PRP及WP促L929细胞增殖比较:PRP为0.68±0.12 vs 2.13±0.18(P<0.05),WP为0.69±0.12 vs 0.66±0.13(P>0.05);PC及WP促L929细胞增殖比较:PC为0.42±0.05 vs 1.94±0.19(P<0.05),WP为1.69±0.13 vs 1.93±0.19(P>0.05)。补体灭活前后,PRP及WP促HDP细胞增殖:PRP为1.36±0.09 vs1.30±0.11(P>0.05),WP为1.26±0.04 vs 1.33±0.10(P>0.05);PC洗涤组分促细胞增殖:PC为1.32±0.07 vs1.28±0.09(P>0.05),WP为1.39±0.13 vs 1.44±0.13(P>0.05)。结论补体灭活对PRP与PC及洗涤获得的各组分PGFs含量影响较小,PGFs含量与促L929/HDP细胞的增殖作用存在非线性正相关关系,PGFs促细胞增殖可能存在种间差异。
目的考察滤除白细胞对全血保存质量和功能的影响。方法 1袋(2 U=400 mL)新鲜全血均分为滤除白细胞全血(简称滤白)组:按照去白滤器的使用说明书操作,在采血<6 h过滤制备去白细胞全血;对照组:不滤除白细胞。过滤及未过滤的全血均采用无菌方式分别分为6小袋[(30～40)mL/袋],(4±2)℃常规保存,分别于保存1、7、14、21、28、35 d各取1小袋,检测血常规、pH、游离血红蛋白(FHb)、氧亲和力(P50)、ATP、2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)、电解质、红细胞膜表面PS、CD47表达、葡萄糖、乳酸等指标,比较过滤与未过滤全血质量的差异。结果实验组1 U全血过滤后剩余白细胞数为(0.32±0.05)×106个;滤白组和对照组比较,保存35 d时血红蛋白(Hb)(g/L)为149.00±11.53 vs 137.20±3.96、MCV(fL)为98.90±3.23 vs 98.96±2.10、pH为6.78±0.02 vs6.75±0.02、P50(mmHg)为15.36±0.63 vs 15.18±0.22、ATP(μmol/gHb)为3.57±0.15 vs 3.61±1.02、2,3-DPG(mmol/L)为0.13±0.09 vs 0.22±0.2、PS阳性率(%)为0.96±0.08 vs 1.19±0.03、CD47阳性率(%)为47.65±3.92 vs 48.37±4.35(P>0.05),溶血率(%)为0.08±0.02 vs 0.12±0.03(P<0.05);保存28 d时乳酸(mmol/L)为15.76±0.19 vs 18.73±0.97、葡萄糖(mmol/L)为20.21±0.55 vs 18.57±0.46(P<0.05)。结论全血离体保存期间会发生一系列质量和功能的变化,滤除白细胞全血的溶血率、乳酸、葡萄糖等指标略优于未过滤的全血,二者的携释氧功能及其他生理生化指标均无明显差异,说明滤除白细胞未对全血保存期间的质量产生不良影响,并可能有利于血液保存。
