吴良霞
- 作品数：74 被引量：485H指数：12
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 不同病原体感染脑脊液及头颅CT改变比较被引量：7
- 2001年
- 潘家华陈兰举吴良霞
- 关键词：结核性化脓性脑脊液头颅CT
- 肺炎链球菌β-内酰胺类抗生素最小抑菌质量浓度与青霉素结合蛋白1A和2B变异的关系被引量：1
- 2008年
- 目的探讨肺炎链球菌(Sp)β-内酰胺类抗生素最小抑菌质量浓度(MIC)与青霉素结合蛋白(PBP)1A和2B变异的关系。方法对55株Sp用E-test法进行7种β-内酰胺类抗生素进行药敏试验,并提取每株Sp的DNA,分别对其青霉素结合蛋白基因(pbp)1a和pbp2b中编码青霉素结合区域(PBD)进行套式PCR扩增和直接测序,并用Clustalx软件进行序列比对,分析PBP1A和PBP2BPBD保守序列的氨基酸置换。结果青霉素敏感株4株中发现PBP2B保守序列SSN后苏氨酸(Thr)445→丙氨酸(Ala),Thr451→Ala和谷氨酸(Glu)481→甘氨酸(Gly)置换,其余6株PSSP未发现PBP1A和PBP2B保守序列氨基酸置换。4株青霉素中介株(PISP)(MIC0.19～0.38mg/L)PBP2BThr445→Ala,Thr451→Ala和Glu481→Gly置换,其中1株发现PBP2B保守序列SVVK后第431-432位点处脯氨酸(Pro)的插入,余3株存在谷氨酰胺(Gln)432→亮氨酸(Leu)置换。另16株PISP(MIC0.5～1.0mg/L)在此基础上出现PBP1ASRN后Pro432→Thr,STMK中Thr371→丝氨酸(Ser)/Ala和KTG附近的短镶嵌序列Thr574→天冬氨酸(ASn)Ser575→Thr,Gln576→Gly,苯丙氨酸(Phe)577→酪氨酸(Tyr)置换,且后二种变异存在于所有青霉素和头孢类中介和耐药株中。20/25株青霉素耐药株存在PBP2B保守序列KTG附近Ala624→Gly,包含Ala624→GlySp组青霉素、头孢呋新、阿莫西林等抗生素平均MIC值明显高于不包含这一置换的Sp组。在青霉素MIC≥0.5mg/L的菌株中均同时存在PBP1A和PBP2B的变异。结论β-内酰胺类抗生素对肺炎链球菌临床分离株MIC值与PBP1A和PBP2B编码青霉素结合活性区域的保守序列中或附近的氨基酸置换有关。
- 徐敏张建华丁云芳陶云珍吴良霞
- 关键词：肺炎链球菌青霉素结合蛋白
- 上海综合性医院儿科医师工作环境问卷调查分析与思考被引量：1
- 2017年
- 目的通过对综合性医院儿科医师问卷调查,对临床儿科医师教育与培养提出合理建议。方法针对目前儿科医师关注的工作环境问题,自行设计简单问卷,进行调查与分析。结果 123位儿科医生参与问卷调查,有效问卷109份,有效率为88.6%。对儿医疗工作社会环境、医院医疗硬件环境、医院支持儿科学科发展力度和收入状况4项满意度,以一般为主。对儿科科室环境和下级医师素质与技能状况2项满意度,以满意为主。对儿科学科发展趋势预测,以能够维持现状和萎缩为主要观点。对目前儿科工作岗位的想法,以等待机会离开为主要观点。非常关注和关注的问题主要为儿科医疗环境(77.1%)、儿科医生来源(73.4%)、医生人身安全(67.9%)和医生工作压力(68.8%)。结论儿科医师对儿科工作环境满意度令人担忧,改善综合性医院儿科不利的医疗环境因素,提供必要的倾斜政策,加强儿科学科知识的科普教育、正面宣传等有利于稳定儿科医师队伍和儿科学科发展。
- 张建华刘引吴良霞
- 关键词：儿科医师工作环境问卷调查
- 表现为节段性炎症的肺炎支原体肺炎患儿的临床特点被引量：13
- 2010年
- 目的探讨以节段性炎症改变为特点的儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的临床表现、影像学特征及肺功能改变。方法收集本院儿科病房明确诊断为MPP肺炎,且胸部CT证实为节段性炎症改变的143例患儿,对其临床特征、实验室检查、CT表现及治疗转归情况进行分析,并对其中的部分患儿进行急性期与恢复期的肺功能检测分析。结果143例MPP患儿主要表现为发热、咳嗽、肺部一过性啰音,50例有肺外表现。胸部CT主要表现为大片状模糊影和肺实变,且在此基础上可合并多种改变。病变可累及肺部各个叶段,其中右肺多于左肺,下肺多于上肺,以右下肺最多见。急性期肺功能可为正常、限制性障碍和混合性障碍,一秒钟用力呼气量、用力肺活量、最大呼气流量、25%用力呼气肺活量、50%用力呼气肺活量和75%用力呼气肺活量和最大中期呼气流速均明显降低。3周后,20例患儿复查肺功能,其中85.0%患儿已恢复正常。经大环内酯类药物治疗,61.5%患儿临床症状和肺部体征消失,其他患儿在加用头孢类抗生素或(和)激素后症状和体征得到控制。结论儿童MPP可表现为节段性炎症改变,其临床表现严重且多样化,肺功能有不同程度的损害。对大环内酯类药物治疗效果不理想的患儿,可以考虑联合使用头孢类抗生素和(或)激素治疗。
- 郝春莉张建华郭盛陈凌吴良霞
- 关键词：肺炎支原体肺功能胸部CT
- 毛细支气管炎患儿外周血T细胞亚群Th1/Th2及相关细胞因子的变化被引量：1
- 2007年
- 目的探讨毛细支气管炎患儿外周血T细胞亚群与Th1／Th2免疫变化。方法流式细胞仪检测32例毛细支气管炎患儿、16例支气管哮喘患儿及20例健康儿童外周血T细胞亚群；ELISA法检测以上儿童血清IFN-γ（ng／L）、IL-4（ng／L）。结果毛细支气管炎组CD4^＋百分率略高于对照组，CD8^＋百分率略低于对照组，但两组间均无显著差异（P〉0．05）。而CD4^＋／CD8^＋比值则明显高于对照组（P〈0．05）。哮喘组CD4^＋百分率高于对照组，CD8^＋百分率低于对照组，两组间有显著差异（P〈0．05），且CD4^＋／CD8^＋比值明显高于对照组（P〈0．05）。毛细支气管炎组、哮喘组与对照组IFN-γ、IL-4、IFN-γ／IL-4水平变化差异显著（P〈0．05）。哮喘组IL-4水平略高于毛细支气管炎组（P〉0．05）。毛细支气管炎组IFN-γ水平低于哮喘组，有显著差异（P〈0．05）。结论毛细支气管炎和哮喘患儿均存在细胞免疫失调，以Th2型细胞占优势。
- 吴良霞吴珉顾丹萍
- 关键词：毛细支气管炎T细胞亚群TH1/TH2
- 首次喘息患儿血管紧张素转换酶基因多态性与喘息再次发生的关系
- 2007年
- 目的探讨首次喘息患儿血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性表达及其与喘息再次发生的关系。方法首次发生喘息的肺炎患儿108例(喘肺组),普通支气管肺炎患儿121例(肺炎组),经聚合酶链反应(PCR)检测其ACE基因D/I多态性分布;对喘肺组患儿随访1年,记录喘息再次发生的例数和人次数。结果喘肺组、肺炎组DD、DI、II表达分别为48、26、34例;30、30、61例,二组间有显著差异(χ2=11.41P=0.0033)。喘肺组一、二级亲属有哮喘史46例,无哮喘史62例,DD、DI、II表达例数分别为22、12、12例和26、14、22例,基因多态性表达无显著性差异(χ2=1.08P=0.5822)。对喘肺组患儿随访1年,有哮喘家族史46例患儿中,发生再次喘息者31例,共41例次,DD、DI、II相应表达分别为18、6、7例和26、7、8例次;未发生再次喘息15例,DD、DI、II相应表达分别为4、6、5例。再次喘息与未喘息病例ACE基因多态性比较无显著性差异(χ2=4.18P=0.1255),而在再次喘息人次数间比较则有统计学意义(χ2=6.16P=0.0441)。无哮喘家族史62例患儿中,发生再次喘息22例,未发生再次喘息40例,DD、DI、II表达分别为10、6、6例,15、10、15例,ACE基因多态性无显著性差异(χ2=0.69P=0.7084)。结论首次喘息患儿如ACE基因多态性表达为DD者,易致喘息再次发生,结合哮喘家族史,可成为喘息患儿再次发生喘息的预测指标。
- 张建华丁云芳吴良霞徐敏吴珉王子才盛锦云
- 关键词：喘息血管紧张素转换酶基因多态性肺炎
- 综合性医院儿科临床研究生培养的困境与思考被引量：3
- 2016年
- 综合性医院儿科目前面临巨大的困难。作为培养儿科临床专业技术人才的研究生培养工作更是陷入困境,主要表现在儿科学专业考生来源不尽人意、专业稳定性不强、专业知识和相关知识拓展受限等方面。加强宣传,提升医学生对儿科专业的热爱;改善环境,提高儿科研究生专业的稳定性;加强与专科医院合作,拓展儿科研究生的专业知识面等措施,将有利于综合性医院儿科临床研究生教育与培养。
- 张建华陈凌吴良霞
- 关键词：教育
- 重组IL-17A耻垢分枝杆菌的构建及其对巨噬细胞表达炎症因子的影响被引量：2
- 2012年
- 目的构建携带小鼠IL-17a编码基因的重组耻垢分枝杆菌(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs),并研究其对巨噬细胞表达炎症因子的影响。方法双酶切质粒pET28a/mIL-17a和pMFA41,转化感受态E.coli TOP10,构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMFA41/mIL-17a,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。分别以MOI为10∶1加入rMs、rMs+anti-IL-17A、Ms感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,并设PBS对照组。荧光定量PCR法检测转染细胞中β防御素-2(Defensinβ2,Defb-2)、巨噬细胞炎症蛋白(Macrophage inflammatory protein,MIP)-1α和MIP-2β基因mRNA水平;ELISA法检测细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4及IFNγ蛋白的表达水平。结果重组表达质粒pMFA41/mIL-17a经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白mIL-17A可与大鼠抗小鼠IL-17A单克隆抗体特异性结合,在相对分子质量约20 000处可见特异性反应条带;rMs组RAW264.7细胞中Defb-2、MIP-1α、MIP-2β基因mRNA水平较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01);rMs组细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4和IFNγ的蛋白浓度较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01)。结论成功构建了表达具有生物学活性mIL-17A的重组耻垢分枝杆菌疫苗,该疫苗可有效促进体外培养的巨噬细胞表达MIP、Defb2、IFN-γ及IL-4,为新型疫苗的研发奠定基础。
- 郭盛张建华吴良霞陈凌郝春莉范小勇
- 关键词：耻垢分枝杆菌白细胞介素17巨噬细胞炎症蛋白
- 重组小鼠白细胞介素-17F/His融合蛋白的原核表达、纯化及生物活性被引量：4
- 2010年
- 目的在大肠杆菌(E.coli)中表达并纯化重组小鼠白细胞介素-17F(rmIL-17F),并鉴定其生物活性。方法经RT-PCR扩增mIL-17f基因片段,定向插入原核表达载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a/mIL-17f,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化rmIL-17F/His融合蛋白,Western blot鉴定其反应原性。以纯化复性的rmIL-17F滴鼻干预小鼠,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠肺组织IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测小鼠外周血IL-17F、IL-4和IFNγ的水平。结果扩增的mIL-17f基因DNA序列与GenBank中登录的mIL-17f基因序列一致,所构建的重组表达质粒pET28a/mIL-17f构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为19000,主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%;纯化的重组蛋白纯度约为95%,具有良好的反应原性,经黏膜给药后,可促进小鼠肺组织中IL-6 mRNA的表达,并提高小鼠血清中IL-4和IFNγ的水平。结论已成功地在大肠杆菌中高效表达并纯化了具有生物学活性的rmIL-17F,为进一步研究IL-17F的功能奠定了基础。
- 陈凌郭盛郝春莉吴良霞张建华
- 关键词：白细胞介素-17原核细胞蛋白纯化生物活性
- 呼吸道疾病外周血T细胞表面受体变化的意义被引量：2
- 2004年
- 目的探讨T细胞表面受体(TCR)在小儿呼吸道疾病中的变化及其临床意义。方法运用流式细胞仪检测16例支气管哮喘患儿和67例呼吸道感染患儿外周血TCR,并以正常值为对照进行相关分析。结果支气管哮喘组、呼吸道感染组和反复呼吸道感染组外周血TCR值明显降低,分别为(2.89±1.76)％、(4.04±2.52)%和(4.32±2.09)％,与正常值(6.5±3.5)％比较均有显著差异。结论TCR在支气管哮喘和呼吸道感染的发病过程中起重要作用,并可作为其免疫检测指标之一 实用儿科临床杂志,2004,19(12)
- 吴良霞吴珉陈莉李成海刘一雯
- 关键词：儿童呼吸道疾病
