周一江
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 人/鲑降钙素嵌合基因在大肠杆菌中的串联表达被引量：8
- 2007年
- 人工合成人/鲑降钙素嵌合基因,用同尾酶法构建多拷贝串联基因表达质粒pLEX-nCT(n=1,2,3,4,5)(单个降钙素基因之间用一段编码柔性连接肽的DNA连接),并在大肠杆菌GI724中表达。Western blotting结果显示,串联多肽具有人源降钙素的抗原性。
- 周一江张学成王玉梅臧晓南
- 关键词：嵌合基因连接肽抗原性
- 人/鲑降钙素嵌合基因在大肠杆菌中的串联表达
- 降钙素(Calcitonin，CT)是一种由32个氨基酸残基组成的多肽类激素，它广泛存在于哺乳动物的甲状腺和鱼类的后腮体中，其主要生理功能是参与体内的钙磷代谢，通过抑制破骨细胞的活性，促进钙在骨中的沉淀，从而降低血钙含量...
- 周一江
- 关键词：嵌合基因鲑鱼降钙素连接肽抗原性
- 文献传递
- 融合蛋白及其制备方法
- 本发明的融合蛋白是将藻蓝蛋白β亚基基因融合在人和鲑鱼降钙素嵌和体基因上游而构成的。该融合基因长648bp，其分子量为23KDa，该融合蛋白的氨基酸序列与SEQ NO.2所示的序列具有100％的同源性，有213个氨基酸残基...
- 张学成王玉梅周一江臧晓南
- 文献传递
- 融合蛋白及其制备方法
- 本发明的融合蛋白是将藻蓝蛋白β亚基基因融合在人和鲑鱼降钙素嵌和体基因上游而构成的。该融合基因长648bp，其分子量为23KDa，该融合蛋白的氨基酸序列与SEQ NO.2所示的序列具有100％的同源性，有213个氨基酸残基...
- 张学成王玉梅周一江臧晓南
- 文献传递
- cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：4
- 2005年
- 将人和鲑鱼嵌合型降钙素基因与藻蓝蛋白的β亚基基因相连,插入融合表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL21.融合蛋白cpcB-CT基因在IPTG诱导下获得高效表达.超声破碎后,经SDS-PAGE分析,在48kD处有新增条,灰度扫描测定,过表达蛋白量占50%～60%,85%为包涵体.包涵体经变性、复性,过Glutathion-Sepharose-4B亲和吸附柱,获含有GST的融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化和截留分离,获得纯化的融合蛋白cpcB-CT.Western blotting分析表明,产物具有与合成人降钙素相似的抗原决定簇部分;ELISA-受体法和大鼠降血钙试验表明,其具有降血钙作用.提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景.
- 王玉梅张学成周一江隋正红茅云翔
- 关键词：大肠杆菌纯化SDS-PAGE分析CT融合表达载体IPTG
- 嵌合降钙素的分子设计与生物学活性预测
- 2009年
- 目的:设计一种高活性、低副作用的降钙素类似物。方法:根据生物活性肽药物设计原理,结合前人的工作经验,提出提高降钙素分子等电点(pI)、增加N-末端疏水性和C-末端亲水性可以提高新型降钙素活性的假设。以人和鲑鱼降钙素为先导物,设计了大量的降钙素类似物,然后利用蛋白质分析计算软件,逐一分析,综合考虑到副作用与活性的矛盾,确定符合要求的新型降钙素类似物。结果:最终确定的符合要求的降钙素类似物为人和鲑鱼嵌合降钙素(hsCT)。结构预测结果显示新型降钙素类似物符合鲑鱼降钙素的空间构象,其pI值介于人源与鲑鱼源降钙素之间;N-末端疏水性比人降钙素有所增加,与鲑鱼降钙素相当;C-末端疏水情况与鲑鱼降钙素相同。C-末端亲水性与人降钙素比较有很大程度的增加。结论:新型嵌合降钙素活性高于人降钙素,而副作用较鲑鱼降钙素降低。
- 王玉梅周一江张学成
- 关键词：降钙素分子设计生物学活性
