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siRNA对PCV1 Rep基因表达的抑制: 以PCV1的Rep基因的mRNA为靶序列,设计合成了3个siRNA,并构建了各自的表达质粒;构建了Rep基因与EGFP融合的真核表达质粒(pCDPCV1ORF1-EGFP),并实现了二者在PK-15细胞中的融合表达;将s...; 曹胜波刘学芹孙敏轩周锐肖少波陈焕春; 关键词：SIRNA PCV1 REP; 文献传递

siRNAs抑制猪圆环病毒复制的研究: 本研究以圆环病毒1型(PCV1)和圆环病毒2型(PCV2)的复制蛋白Rep为靶基因，构建了3个针对圆环病毒1型(PCV1)和圆环病毒2型(PCV2)共同靶序列三个的siRNAs表达质粒(pS-RepA，pS-RepB，p...; 孙敏轩; 关键词：猪圆环病毒 SIRNA介导病毒抑制; 文献传递

猪1型圆环病毒全基因组克隆及其感染性初步鉴定被引量：3: 2006年; PCV1 was isolated from IBRS-2 cells line,and its complete genomic sequence was cloned by PCR.Sequence analysis indicated that this PCV1 strain shares >98% nucleotide identity with the other PCV1 strains in GenBank.Then double copy molecule clone(pSK2PCV1) was constructed and used to transfect PK-15 cell line.The results of indirect immunofluorescence(IIF) and RT-PCR suggested that pSK2PCV1 could form infectious virus after being transfected into PK-15 cells.; 曹胜波刘学芹刘朝孙敏轩陈焕春; 关键词：全基因组感染性

乙型脑炎病毒E基因自杀性DNA疫苗的构建及其免疫应答被引量：3: 2009年; 为探讨自杀性DNA疫苗在乙型脑炎疫苗开发中的可能性,将乙型脑炎病毒(JEV)E基因片段插入到自杀性DNA疫苗载体pSCA1(pS)中,构建了表达E基因的自杀性DNA疫苗质粒pSE。间接免疫荧光试验结果证实,该质粒转染BHK-21细胞后实现了E基因在细胞中的表达。将该疫苗和常规DNA疫苗(pCDE)分别免疫试验小鼠,进行体液免疫和细胞免疫检测。结果表明,在诱导体液免疫方面,pCDE要优于pSE,但pSE却可以诱导更强的细胞免疫反应,这为进一步评价该疫苗的免疫保护效果奠定了基础。; 刘学芹李么明曹胜波叶静孙敏轩肖少波陈焕春; 关键词：乙型脑炎病毒自杀性DNA疫苗免疫

猪乙型脑炎病毒胶体金检测方法的建立: 乙型脑炎（JE）是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的一种重要人畜共患传染病。建立快速、准确的抗原检测方法对于该病的快速诊断具有重要意义。本研究在大肠杆菌中表达了JEVE蛋白，并利用纯化的蛋白免疫BalB/c小鼠后筛选获得了两...; 李么明曹胜波金梅林刘学芹叶静孙敏轩陈焕春; 关键词：病毒检测; 文献传递

siRNA对乙型脑炎病毒复制的抑制效果被引量：1: 2009年; 以JEV的NS1基因mRNA为靶序列,设计合成了4个siRNA序列,构建了各自的表达质粒pS-NS1A、pS-NS1B、pS-NS1C和pS-NS1D。通过间接免疫荧光、Western blot检测、RT-PCR和病毒空斑检测等方法对这些siRNAs抑制JEV复制的效果进行了评价。结果表明4个siRNA表达质粒均对JEV在细胞中的复制具有不同程度的抑制作用,其中pS-NS1C、pS-NS1D有显著的抑制作用。说明针对NS1基因的siRNAs可以有效抑制JEV的复制,并有望成为应对JEV感染的治疗方法。; 刘学芹曹胜波李么明孙敏轩叶静周锐杨影徐高原陈焕春; 关键词：乙型脑炎病毒 NS1

siRNA对PCV1 Rep基因表达的抑制: 以PCV1的Rep基因的mRNA为靶序列,设计合成了3个siRNA,并构建了各自的表达质粒;构建了Rep基因与EGFP融合的真核表达质粒(pCDPCV1ORF1-EGFP),并实现了二者在PK-15细胞中的融合表达;将s...; 曹胜波刘学芹孙敏轩周锐肖少波陈焕春; 关键词：SIRNA PCV1 REP

嵌合猪圆环病毒PCV1-2的构建及其感染性初步鉴定被引量：6: 2006年; 猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)是当前严重危害养猪业的重要病原之一。目前,世界上还没有有效疫苗用于该病毒的免疫预防。该研究利用PCR方法,将PCV2的ORF2基因替换猪Ⅰ型圆环病毒(PCV1)的ORF2基因,构建了以PCV1基因组为骨架的嵌合病毒(PCV1-2)分子克隆(pSK2PCV1-2)。将该分子克隆转染PK-15细胞并连续盲传5代,用RT-PCR方法可以在转染后盲传的细胞中检测到PCV1的ORF1 mRNA和PCV2的ORF2 mRNA,但检测不到PCV1的ORF2 mRNA和PCV2的ORF1 mRNA。间接免疫荧光检测显示在盲传第5代的细胞中有PCV2 ORF2蛋白的表达,表达蛋白主要分布于细胞核。该研究初步证实构建的PCV1-2分子克隆转染细胞后可以形成具有感染性的嵌合病毒,从而为更深入研究嵌合病毒生物学特性奠定了基础。; 曹胜波孙敏轩刘学芹刘新文陈焕春; 关键词：感染性

siRNA对PCV1 Rep基因表达的抑制: 以PCV1的Rep基因的mRNA为靶序列,设计合成了3个siRNA,并构建了各自的表达质粒;构建了Rep基因与EGFP融合的真核表达质粒(pCDPCV1ORF1-EGFP),并实现了二者在PK-15细胞中的融合表达;将s...; 曹胜波刘学芹孙敏轩周锐肖少波陈焕春; 关键词：SIRNA PCV1 REP 基因表达

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孙敏轩