孙耘玉
- 作品数：151 被引量：376H指数：10
- 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 低频低强度超声波对人外周血造血干细胞作用的研究
- 目的:观察不同剂量的低频低强度超声波对人外周血造血干细胞的作用,为超声治疗的临床应用提供实验数据。方法:正常人经外周血动员后BaxterCS-3000血细胞分离机采取外周血造血干细胞。经Ficoll(淋巴细胞分层液)分离...
- 陈宝安马燕孟庆齐丁家华高冲孙耘玉程坚王骏赵刚
- 文献传递
- 非清髓性骨髓移植诱导异基因小鼠免疫耐受的实验研究
- 目的:通过非清髓性预处理方案联合髓腔内骨髓移植(IBM-BMT)建立异基因小鼠免疫耐受模型,并初步探讨该方法诱导免疫耐受的机理。方法:选择雌性C57BL/6(H-2b,B6)小鼠为受鼠,雄性BALB/C(H-2d)小鼠为...
- 陈宝安毕延智张琰丁家华高冲孙耘玉程坚王骏赵刚
- 树突细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对耐药K562细胞的体外杀伤作用被引量：15
- 2005年
- 目的研究细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞与同源树突细胞(DC)共培养后CIK细胞的增殖活性及表型的变化,并观察其对K562、K562/ADM细胞毒作用的影响。方法采集健康供者外周血单个核细胞(MNC)用于诱导培养CIK细胞及成熟DC,将成熟DC和CIK细胞混合培养,用MTT法检测DCCIK共培养细胞杀伤K562细胞及其耐药株的活性。结果在2.5～20.0效靶比范围内,CIK细胞对K562和K562/ADM细胞的杀伤率分别为(20.0±1.2)%～(61.1±2.2)%和(17.5±2.1)%～(45.2±3.3)%;DCCIK共培养细胞对K562和K562/ADM细胞的杀伤率分别为(25.2±2.3)%～(70.9±4.1)%和(22.4±2.7)%～(62.3±5.0)%。CIK细胞对K562敏感株和耐药株杀伤率的差异无统计学意义,DCCIK细胞对敏感株和耐药株的杀伤作用差异亦无统计学意义;DCCIK细胞对K562和K562/ADM细胞的杀伤活性均高于单纯CIK细胞组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DC与CIK共培养细胞的增殖活性和细胞毒活性高于CIK细胞。
- 陈宝安李曼孙载阳李翠萍高冲孙耘玉王骏傅强陈津
- 关键词：树突细胞细胞因子杀伤细胞体外杀伤作用细胞免疫治疗肿瘤
- 低氧诱导因子-1α抑制剂逆转K562/A02细胞多药耐药机制研究被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨低氧诱导因子抑制剂3-（5＇-Hydroxymethyl-2＇-furyl）-1-benzylindazoh（YC-1）对人白血病耐阿霉素细胞K562/A02的耐药逆转作用,并探讨逆转机制.方法 采用MTT法检测不同浓度YC-1和阿霉素（ADM）单独或联合使用48 h对K562/A02细胞和K562细胞增值抑制效应及耐药逆转效应;用流式细胞术检测0、5、10和20 μmol/L YC-1单独或联合1 mg/L阿霉素作用K562/A02细胞48 h后细胞凋亡率及联合应用后细胞内阿霉素浓度;半定量RT-PCR检测各组细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、mdr1基因mRNA表达变化;Western blot方法检测各组细胞HIF-1α、P-糖蛋白（P-gp）表达变化.结果 K562与K562/A02细胞对阿霉素的IC50值分别为（1.56±0.07）mg/L和（42.98±3.15）mg/L,耐药倍数为27.55倍.予5、10和20μmol/L YC-1作用后,K562/A02细胞对阿霉素的耐药倍数分别为24.63、16.38和10.71倍;0、5、10和20μmol/L YC-1单独或联合1 mg/L阿霉素处理K562/A02细胞48 h后,凋亡率分别为（1.9±0.9）%、（4.9±0.9）%、（5.8±1.1）%和（9.3±1.4）%与（2.3±0.7）%、（8.2±1.2）%、（19.0±1.7）%和（34.5 ±2.4）%.0、5、10和20 μmol/L YC1联合1 mg/L阿霉素处理K562/A02细胞48 h后细胞内阿霉素荧光强度分别为232±33、1300±219、1961±240和3342±269;随着YC-1浓度增加,HIF-1α mRNA表达没有明显差异,mdr1 mRNA逐渐下调,HIF-1±和P-gp表达均下调.结论 YC-1可以通过抑制HIF-1α蛋白表达,下调mdr1 mRNA水平和P-gp水平,增加细胞内阿霉素药物浓度,部分逆转K562/A02细胞耐药.
- 陈宝安王飞程坚丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚鲍文宋慧慧高峰夏国华单学赟
- 关键词：多药耐药YC-1
- Sorein表达的变化在汉防己甲素逆转K562/A02细胞株中的研究
- ＜正＞目的：探讨汉防己甲素在逆转 K562/A02细胞耐药中与 sorcin 之间的关系方法：通过 MTT 法筛选出所需浓度 TET,与 K562/A02细胞或 K562细胞株孵育培养48/72小时后,通过 RT-PCR...
- 李静陈宝安高峰丁家华高冲孙耘玉程坚赵刚王骏
- 文献传递
- 超声空化逆转K562/A02细胞对阿霉素的耐药性研究被引量：4
- 2008年
- 本研究观察低频低功率超声联合阿霉素(adriamycin,A02)对白血病耐药细胞株K562/A02的影响,寻找合适的干预参数,探讨耐药细胞耐药逆转的可能机制。取对数生长期的白血病K562/A02细胞株,将研究对象分为空白组、单纯阿霉素组(A02)、单纯超声组(US)、阿霉素加超声组(A02+US)共4组。细胞在24孔培养板上受低频低功率超声作用,用台盼蓝拒染法、MTT法检测细胞活性,应用瑞氏染色法和流式细胞术分别检测细胞凋亡和药物浓度,扫描电子显微镜观察细胞表面变化。结果显示,频率20 kHz、声强0.25 W/cm2、作用时间60秒的超声,可显著降低阿霉素的LC50;当声强0.50 W/cm2、作用时间大于30秒的超声,对细胞有急性杀伤作用。细胞经低频超声作用后细胞膜表面出现直径大约1-2μm的小孔,细胞内阿霉素的药物浓度增加,细胞凋亡增强。结论:适当参数的超声辐射通过超声空化导致肿瘤细胞产生声孔效应,使阿霉素对耐药细胞株的抑制作用增强,从而逆转耐药细胞株的耐药性。
- 陈宝安孟庆齐吴巍高峰邵泽叶丁家华高冲孙新臣成红艳孙耘玉王骏程坚赵刚宋慧慧鲍文马燕王雪梅
- 关键词：超声空化阿霉素耐药逆转K562/A02细胞株
- 丙戊酸钠诱导骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1凋亡的实验研究被引量：3
- 2007年
- 为了探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1的生长抑制及诱导凋亡作用,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测VPA对细胞生长的抑制作用;采用光学显微镜和电子显微镜观察VPA作用后细胞形态的变化;应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度VPA作用后细胞凋亡的比例和细胞周期分布的变化。结果显示:VPA对MUTZ-1细胞的生长抑制作用呈现时间和剂量依赖性;经4mmol/LVPA处理MUTZ-1细胞72小时后,细胞呈现典型的凋亡形态特征,光学显微镜下可见凋亡细胞胞体固缩、核固缩、核碎裂及凋亡小体;透射电子显微镜下可见凋亡细胞核染色质边集、胞浆浓缩、密度增加,胞浆内大小不规则的染色质团块;流式细胞术结果表明,细胞凋亡率随着VPA浓度的增加而逐步增高,G0/G1期细胞比例随着VPA浓度的增加而逐渐增多,S期细胞比例逐渐减低,细胞被阻滞在G0/G1期。结论:VPA通过G0/G1期阻滞诱导MUTZ-1细胞凋亡,从而抑制MUTZ-1细胞增殖。
- 赵慧慧陈宝安高冲邵泽叶夏国华丁家华孙耘玉王骏程坚赵刚Dohner KDonher H
- 关键词：丙戊酸钠骨髓增生异常综合征细胞凋亡
- 非清髓移植后致敏供者淋巴细胞输注的实验研究
- 目的:本课题旨在研究非清髓外周造血干细胞移植(PBSCT)混合嵌合体模型的建立,并在其基础上输注致敏后的供鼠淋巴细胞,观察对于受鼠嵌合状态、移植物抗宿主病(GVHD)及免疫重建等方面的影响,并探讨其可能的机制。方法:受鼠...
- 陈宝安张琰丁家华高冲孙耘玉程坚王骏赵刚
- 文献传递
- 异硫氰酸苯己酯降低U266细胞株p16基因甲基化的研究被引量：1
- 2008年
- 本研究探讨异硫氰酸苯己酯对p16基因高甲基化的多发性骨髓瘤U266细胞株是否有去甲基化的作用。用异硫氰酸苯己酯0、5、10μmol/L孵育U266细胞株,提取DNA备用。用亚硫酸氢盐处理正常人基因组DNA,并以此为模板进行PCR扩增。设计1组特殊荧光标记探针以构建1种检测p16基因启动子区3个CpG位点甲基化改变的芯片,特殊荧光标记探针包括1对非甲基化探针和甲基化探针,检测相邻的3个CpG位点甲基化的程度。采用基因芯片的方法,将完全未甲基化的DNA和完全甲基化的DNA混合后制成标准曲线,将U266细胞株样本处理后点在芯片上与标准曲线进行比较后得出定量检测的结果。结果表明:芯片上探针的可重复性和精确性很好,0、5、10μmol/L异硫氰酸苯己酯处理后的U266细胞株p16基因的甲基化程度分别为78.2%、61.7%、54.8%。结论:异硫氰酸苯己酯可以降低U266细胞株p16基因甲基化的程度。
- 陈宝安寿倍明周冬蕊丁家华高冲孙耘玉王骏程坚赵刚宋慧慧鲍文刘德龙马旭东陆祖宏
- 关键词：异硫氰酸苯己酯P16基因甲基化基因芯片
- 非清髓性外周血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病被引量：2
- 2004年
- 目的：观察非清髓造血干细胞移植对慢粒慢性期(CML-CP)、慢粒加速期(CML-AP)的疗效。方法：用福达华(F)30mg／m^2×6d，白消安(B)4mg·kg^-1·d^-1×2d，环磷酰胺(CTX)600mg／d×2d，±Ara-C对7例HLA全相合者进行预处理，并对其造血恢复等指标动态观察。结果：7例患者造血顺利恢复．ANC>0．5×10VL平均为13d，BPC>20×10^9／L平均为11d。+30天时经短串重复系列(STR-PCR)检测，7例植活患者中4例为完全嵌舍状态(CDC)，3例为混合嵌合体。+90天时又有1例患者转为CDC。中位随访6(1-13)个月，7例患者均无病生存。结论：非清髓性造血干细胞移植是慢粒慢性期、加速期的有效治疗手段，对于年龄较大患者亦有良好耐受性。
- 丁家华陈宝安董伟民王骏赵刚高冲孙耘玉金宝翠程坚
- 关键词：异基因非清髓白血病慢粒
