- 胎鼠海马神经元原代培养及转染条件的优化被引量：3
- 2011年
- 目的建立一种稳定的大鼠胎鼠海马神经元培养方法并能够有效的鉴定其纯度,探讨用化学转染试剂体外转染大鼠胎鼠海马神经元的最佳转染条件。方法分离Wista大鼠E18d胚胎并取海马组织,无血清培养基培养并做MAP2荧光染色鉴定其纯度。应用lipofectamineTM2000转染试剂盒,大鼠神经元电转试剂盒,lipofectamineTM LTX转染试剂盒,三种不同方法包被质粒转染体外培养海马神经元。转染后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率。结果用无血清培养方法培养的海马神经元成活率好,MAP2荧光染色鉴定其纯度高于80%。三种转染方法的转染率lipofectamineTM 2000转染试剂为(14.05±2.32)%,大鼠神经元电转试剂为(52.39±1.68)%,lipofectamineLTX转染试剂为(22.87±5.32)%,其中电转试剂转染这种方法转染率最高。结论电转试剂能有效地转染体外培养的大鼠胎鼠海马神经元,同时保持很好的神经元存活率,是一种比较合适的神经元转染方法。
- 张勇张国宁丛敬倪月秋
- 关键词：海马神经元原代培养方法转染
