公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

重组鼠疫汉坦钩端多抗原位点同源合成基因的表达及活性鉴定被引量：5: 2011年; 将人工合成的含鼠疫耶尔森氏菌的2个抗原位点、汉坦病毒的5个抗原位点和钩端螺旋体的5个抗原位点的串联基因片段克隆到原核表达载体pET-20b中,构建重组表达质粒pET-rYHL.转化E.coliBL21(DE3)后获得表达菌株.表达菌株经IPTG诱导后,可高效表达带组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白.包涵体蛋白经尿素变性溶解、His Trap HP Kit柱纯化、SDS-PAGE及Western Blot分析研究,结果表明,在分子量40000处有一特异性蛋白条带,获得纯度达98%以上的蛋白.进一步ELISA试验表明,该蛋白与鼠疫、流行性出血热及钩端螺旋体病阳性血清均能较好地结合,而与其它鼠传疾病血清无交叉反应.; 浦昀齐燕飞徐国良徐卉张士尧孟日增宋秀玲杨怀宁李娟; 关键词：鼠疫汉坦病毒钩端螺旋体合成基因活性鉴定

三种生物恐怖因子重组优势抗原表位融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定: 目的：生物恐怖活动由于对人群的普遍易感性、不可预见性以及强大的杀伤力，已日益引起世界各国的广泛关注。目前，全世界至少有15个国家和地区可能有生物战计划，主要集中在我国周边地区。因此，研制针对生物恐怖战剂的快速、灵敏、准确...; 张士尧; 关键词：布氏杆菌炭疽杆菌肉毒毒素原核表达活性鉴定; 文献传递

一种通过多聚核苷酸激酶构建长片段目的基因的方法及其应用: 本发明属于分子生物学技术领域，特别涉及一种通过多聚核苷酸激酶构建长片段目的基因的方法及其应用。本发明提供的构建长片段目的基因的方法能够有效降低目的基因构建时的经济成本，同时，降低碱基突变的概率。其技术要点包括：将目的基因...; 姚凯覃欢张士尧冯源张文良姚浩哲肖鹦王佳汝吴嘉轩; 文献传递

一种化学与生物联合催化合成磷酸吡哆醛的方法: 本发明提供一种化学与生物联合催化合成磷酸吡哆醛的方法。其步骤包括：（1）以盐酸吡哆醇为初始原料，以盐酸为反应溶剂，氧化物催化剂进行催化，所述的吡哆醇在盐酸体系中催化氧化体系的作用下选择性氧化制得盐酸吡哆醛。（2）所获得的...; 曹一丁杨忠华阮涛杨睿张士尧马龙展宝睿; 文献传递

重组钩端螺旋体多抗原位点同源合成基因的表达及其抗原性鉴定: 2012年; 目的:构建重组钩端螺旋体(钩体)优势抗原表位原核表达系统,以期获得高纯度的钩体优势抗原表位重组融合蛋白,为进一步研究钩体快速检测方法奠定基础。方法:利用基因重组的方法构建表达质粒pET-rLP。经IPTG诱导后,获得高效表达带组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白,包涵体蛋白经尿素变性溶解,采用镍离子亲和纯化,利用SDS-PAGE、Western blotting和间接ELISA法鉴定。结果:在相对分子质量为20 000处有1条特异性蛋白条带,为重组钩体优势抗原表位融合蛋白;ELISA结果显示其可与钩体阳性血清特异性结合,而与其他血清无交叉反应。结论:成功构建重组钩体优势抗原表位原核表达系统,并获得高纯度的重组钩体优势抗原表位融合蛋白。; 张士尧浦昀徐坤李金华原野鞠文李娟; 关键词：钩端螺旋体原核表达融合蛋白活性鉴定

金刚烷胺修饰物抗禽流感病毒的作用机制被引量：1: 2009年; 目的:初步探讨金刚烷胺修饰物(NAM)抗禽流感病毒的作用机制,为抗禽流感病毒新药NAM的开发提供实验依据。方法:对狗肾细胞(MDCK)进行体外培养,分为正常对照组,病毒对照组和受试物组。①采用细胞病变法结合MTT法检测NAM对禽流感病毒(H5N1)的抑制作用,受试物组分为先加入NAM后感染病毒、先感染病毒后加入NAM和感染病毒的同时加入NAM,观察3种方式NAM对禽流感病毒的半数抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI);②采用神经氨酸酶抑制实验检测NAM对神经氨酸酶的活性影响。结果:①3种不同的实验方式NAM剂量对数与细胞保护率均呈正相关关系(r分别为0.95、0.95和0.99,P均<0.05),且NAM与保护率存在量效依赖关系。先加入NAM后感染病毒,NAM的IC50为15.32 mg.L-1,TI为103.31;先感染病毒后加入NAM,NAM的IC50为30.78 mg.L-1,TI为28.10;感染病毒的同时加入NAM,NAM的IC50为203.92 mg.L-1,TI为4.24。②NAM具有一定的流感病毒神经氨酸酶抑制活性,其IC50为87.36 mg.L-1。结论:NAM对穿入细胞后的禽流感病毒有较好的抑制作用,同时干扰病毒吸附和侵入细胞的脱壳过程也有一定的作用,能够在一定程度上抑制病毒的神经氨酸酶活性。; 徐坤杨松涛张士尧侯雷王宏芳浦昀李金华夏咸柱李娟李静; 关键词：禽流感金刚烷胺流感病毒A型 H5N1亚型

单增李斯特菌多克隆抗体制备及其在乳胶凝集试验中的应用被引量：2: 2012年; 目的:制备高效价高纯度兔抗单增李斯特菌(LM)多克隆抗体,并初步探讨其在乳胶凝集试验(LAT)中的应用。方法:复苏并扩大培养LM标准菌株,制备灭活疫苗免疫家兔,采用ELISA法测定耳缘静脉血抗体效价。4次免疫后,颈动脉采血分离血清,采用辛酸-饱和硫酸铵法粗分离,经蛋白亲和层析柱HiTrap Protein GHP进行IgG纯化,采用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度法、间接ELISA法分别测定蛋白纯度、蛋白含量及抗体效价。得到的高效价提纯IgG与乳胶微球进行共价偶联,并选择偶联乳胶的IgG含量及偶联时间等条件,建立快速检测模拟样品中LM的方法。结果:制备并纯化的兔抗LM IgG蛋白浓度为23.364g.L-1,效价为1∶12 800～1∶25 600,与霍乱弧菌、沙门氏菌、志贺菌等多种菌均无交叉反应,与斯氏李斯特菌有弱交叉反应;致敏时IgG与乳胶微球偶联比率为1∶40;利用LAT方法检测246份样品,阳性检出率为87.5%,最低检出抗原含量为0.039 8g.L-1。结论:制备了高效价、高纯度的兔抗LM多克隆抗体;建立的LAT方法特异性强,敏感性较高,重复性好,便于基层推广使用,为LM的现场检测提供了一种新手段。; 鞠文宋秀玲原野张士尧方珍徐坤李娟孟日增; 关键词：单增李斯特菌多克隆抗体乳胶凝集试验

绿木霉ZY-01的外切葡聚糖酶CBHⅠ基因的克隆及在E.coli中的表达被引量：3: 2017年; 以前期分离筛选得到的高产纤维素酶菌株TrichodermavirensZY-01的总RNA为模板合成cDNA,经PCR克隆得到外切葡聚糖酶(cellobiohydrolase,CBH)Ⅰ基因;并构建了pET-32a-cbh1表达载体,通过转化至E.coli BL21(DE3)中,获得CBHⅠ重组表达系统,成功表达出可溶性CBHⅠ蛋白。结果表明,Trichoderma virens ZY-01CBHⅠ碱基序列与Trichoderma viride AS 3.3711CBHⅠ基因(GenBank:AY368686.1)序列相似度高达91.95%,氨基酸同源性高达99.22%;通过SDS-PAGE检测,表明该基因在E.coli中得到可溶性表达,分子量约为53kDa,与基因翻译出的氨基酸序列相一致。该研究为CBHⅠ基因的工程化及应用提供了基础。; 阮涛曹一丁刘贝贝杨睿展宝睿张士尧马龙翟蓉杨忠华; 关键词：绿木霉纤维素酶基因重组原核表达

新型多酸化合物NCW-6的毒理学安全性评价被引量：1: 2012年; 目的:评价具有抗病毒活性的多酸化合物NCW-6的安全性,阐明NCW-6的毒性及潜在的危险。方法:依据新药临床前毒理学评价方法进行NCW-6经口急性毒性实验和致畸敏感期实验。急性毒性实验中,将健康的昆明小鼠随机分为7组,每组10只,雌雄各半;给药剂量最低为4 000.00 mg.kg-1、最高为6 000.00mg.kg-1,组距为400.00mg.kg-1;经口灌胃1次给药,观察给药后14d小鼠的中毒表现,记录死亡数,用Bliss法计算半数致死剂量(LD50);致畸敏感期实验中,孕鼠随机分为5组,每组至少20只;给药组剂量分别为91.7、366.8和1 467.5mg.kg-1;阴性对照组给予5mL.kg-1蒸馏水,于受孕后第6～15天连续给药,每天灌胃1次;阳性对照组于妊娠第10天一次灌胃给予130mg.kg-1的维甲酸;各组孕鼠于孕期第20天颈椎脱臼处死,检查受孕情况,记录黄体数、活胎数、死胎数和吸收胎数等,做胎鼠一般外观检查(体质量、身长、尾长和外观有无异常),取胎鼠雌雄各半行内脏形态检查和骨骼形态检查。结果:急性毒性实验,NCW-6的LD50为5 869.9mg.kg-1,属于无毒化合物。致畸敏感期实验,3个给药组孕鼠的体质量和增重与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),各给药组胎鼠的平均体质量、身长、尾长以及平均胎质量、窝质量与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),各给药组胎鼠外观、内脏畸形率、骨骼畸形率与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NCW-6属于无毒化合物,且对大鼠无致畸作用,具有深入研究开发的价值。; 原野李金华王娟张士尧鞠文齐燕飞李娟徐坤; 关键词：急性毒性毒理学

全选清除导出

共1页<1>

张士尧

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张士尧

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈