张静萍
- 作品数：16 被引量：74H指数：6
- 供职机构：新疆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区高校科研计划教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 3种截短的泡球蚴Em18基因原核表达质粒的构建、表达及鉴定被引量：6
- 2006年
- 目的构建3种截短的泡球蚴18(Em18)基因的原核表达质粒,获得高效表达、有生物活性的3种重组蛋白,并对其进行初步鉴定。方法DNAman软件设计引物,PCR法扩增并构建3种截短的pET41a-Em18.1、Em18.2和Em18.3原核表达质粒,测序鉴定插入序列正确性;IPTG诱导、表达和纯化rEm18.1-GST、rEm18.2-GST和rEm18.3-GST重组蛋白,SDS-PAGE电泳及Western blot进行初步鉴定。结果成功构建了3种截短的pET41a-Em18.1、Em18.2和Em18.3重组表达质粒;SDS-PAGE检测表明rEm18.1-GST、rEm18.2-GST、rEm18.3-GST重组蛋白得到成功表达,在分子质量单位为41、45.5和45.5ku处有表达条带;Western blot显示3种重组蛋白均能被AE病人血清识别。结论成功构建了截短的pET41a-Em18.1、pET41a-Em18.2和pET41a-Em18.3原核表达质粒,表达的3种重组蛋白均具有良好的抗原性,为Em18抗原表位分析奠定了基础。
- 张春桃林仁勇王俊芳王星王俨卢晓梅张静萍张琰张彤温浩
- 关键词：泡球蚴免疫检测
- 淋巴细胞HLA-B27抗原的表达及意义被引量：4
- 2005年
- 目的:评价检测淋巴细胞检测淋巴细胞HLA-B27抗原在强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis,AS)患者、腰痛患者及健康人中的表达及临床意义。方珐:取肘静脉血Iml(EDTANa2抗凝),采用荧光抗体HLA-B27-FITC/HLAB7-PE直接标记法,流式细胞仪检测淋巴细胞中HLA-B27的比例。结果:24例AS患者、35例腰痛患者和55例健康者中HLA-B27阳性率分别为91.67%、5.71%、5.45%。结论:HLA-B27与强直性脊柱炎高度相关,其检测是AS诊断与鉴别诊断的重要标志。但检测阳性并不能作为AS的确诊和筛选指标;流式细胞仪检测HLA-B27简便省时,稳定性和重复性好,适用于临床检验。
- 张琰温浩张朝霞林仁勇卢晓梅冯晓辉张静萍王善珍胡安华
- 关键词：强直性脊柱炎流式细胞仪淋巴细胞淋巴细胞
- Em18.3重组蛋白的表达及其免疫诊断特性的研究被引量：7
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌中表达和纯化截短的泡球蚴rEm18.3抗原重组蛋白,对其免疫诊断特性进行鉴定。方法:IPTG诱导pET41a-Em18.3原核表达质粒,表达和纯化rEm18.3-GST重组蛋白,SDS-PAGE电泳及West-ern blot法对其进行初步鉴定,ELISA法确定其免疫诊断特性。结果:rEm18.3-GST重组蛋白得到成功表达,SDS-PAGE电泳显示相对分子量为45kDa。Western blot结果表明,rEm18.3-GST重组蛋白能被AE病人阳性血清识别。对56例多房棘球蚴病(AE)、88例细粒棘球蚴病(CE)、24例其他寄生虫病、24例其他疾病和24例健康者共236份血清进行ELISA检测结果显示,对AE血清诊断的敏感性为10.7%,特异性为99.4%,阳性预测值85.7%,阴性预测值78.1%。结论:rEm18.3-GST免疫诊断价值较低,Em18抗原重要的表位可能位于1-40位氨基酸。
- 林仁勇张春桃温浩王俊芳王星王俨卢晓梅张静萍张琰无
- 关键词：泡球蚴免疫检测
- 抗泡球蚴重组Em18抗原多克隆抗体的纯化与鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的:制备抗泡球蚴18(Em18)抗原多克隆抗体,纯化并鉴定。方法:表达并纯化rEm18-GST蛋白。用纯化后的蛋白作为免疫原,免疫新西兰白兔获得抗rEm18-GST的多克隆抗体IgG,采用ELISA法检测抗体效价,进一步纯化抗体,获得抗Em18特异性多克隆抗体IgG,用Western blot及ELISA法检测并进行初步鉴定。结果:免疫制备获得兔抗rEm18-GST抗体,随着免疫次数的增加,抗体滴度不断升高,于第10周达到最高。ELISA检测抗体效价为1∶51200。Western blot及ELISA法鉴定表明Em18-GST抗体去除了与GST的交叉反应。结论:获得了去除与GST交叉反应的抗Em18多克隆抗体,为进行噬菌体肽库筛选奠定基础。
- 杨晨晨张蓓王俊芳张春桃王俨许晏王星张静萍张琰温浩林仁勇
- 关键词：泡球蚴多克隆抗体纯化
- 应用噬菌体7肽库筛选泡球蚴Em18抗原模拟表位的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的:从噬菌体7肽库中筛选泡球蚴Em18抗原模拟表位,为研究和开发新的包虫病诊断抗原提供实验依据。方法:用纯化后的rEm18-GST免疫新西兰白兔,获得抗rEm18-GST的多克隆抗体,进一步纯化,获得抗Em18多克隆抗体IgG,以之作为靶分子,免疫筛选噬菌体随机7肽库。经过5轮的淘筛过程,随机挑取9个蓝色噬菌斑扩增,核苷酸序列测定分析并与Em18进行同源性比较。结果:经5轮筛选后,阳性克隆得到富集,9个噬菌体克隆的氨基酸序列与Em18无同源性。结论:所得肽段可能是Em18抗原模拟表位。
- 张蓓杨晨晨林仁勇王俊芳张春桃王俨卢晓梅张静萍张琰许晏温浩
- 关键词：噬菌体肽库模拟表位
- 泡球蚴18基因的克隆、原核表达质粒的构建及其初步表达的研究被引量：11
- 2005年
- 目的: 克隆、分析泡球蚴 18 (Em18)抗原基因,构建 pET41a Em18 原核表达质粒,并初步诱导表达Em18重组蛋白。方法: DNAman软件设计引物,RT PCR法克隆 Em18 cDNA并构建 pMD18 T/Em18 质粒,测序确定序列,利用DNAman和BLAST软件,对其进行基因序列分析。构建 pET41a Em18 原核表达质粒,测序鉴定插入序列正确性。IPTG初步诱导和表达 rEm18 GST重组蛋白,SDS PAGE电泳检测。结果: 测序结果显示Em18抗原基因长度为 486 bp,编码 161 个氨基酸。BLAST 比对分析表明为一新序列并被 GenBank 收录(AY513691)。构建的 pET41a Em18原核表达质粒,经 IPTG诱导后,SDS PAGE检测表明 rEm18 GST重组蛋白得到成功表达,在相对分子量为50 KDa处有表达条带。结论: 成功克隆并构建了 pET41a Em18 原核表达质粒,初步诱导表达出 rEm18 GST重组蛋白,为新一代包虫病诊断试剂盒的研制奠定基础。
- 王俨林仁勇丁剑冰卢晓梅张静萍王星梁晓慧张亚楼张琰温浩
- 关键词：泡球蚴重组蛋白
- 泡球蚴Em18重组蛋白的表达及其抗原性检测的研究被引量：17
- 2005年
- 目的 构建泡球蚴18(Em18)基因的原核表达质粒,获得高效表达、有生物活性的Em18重组蛋白,为包虫病诊断试剂的研制奠定基础。 方法 用DNAman软件设计引物,分别在引物5′端和3′端添加EcoRⅠ和 XhoⅠ酶切位点,以pMD18 T/Em18原核表达质粒为模板,PCR扩增Em18基因片断,经酶切,克隆入原核表达载体 pET 41a(+),构建原核表达质粒 pET41a Em18;转化大肠埃希菌BL21(DE3),酶切、PCR及测序鉴定其插入序列的正确性。经 IPTG诱导表达 rEm18 GST重组蛋白和GST重组蛋白,用谷光甘肽 Sepharose 4B亲合层析柱分别进行纯化,通过 SDS PAGE和Western blot试验分析鉴定。 结果 测序表明构建的 pET41a Em18 原核表达质粒均为正确连接,插入 Em18 基因片断为486 bp。SDS PAGE检测表明Em18基因以 rEm18 GST重组蛋白的方式得到成功表达,在相对分子质量单位 50ku处有表达条带;Western blot分析显示,rEm18 GST重组蛋白能被泡型棘球蚴病人阳性血清识别,具有良好的抗原性。 结论 成功构建了 pET41a Em18原核表达质粒,获得的 rEm18 GST重组蛋白具有生物活性和抗原性,有望应用于泡型包虫病诊断试剂的研制。
- 王俨林仁勇丁剑冰卢晓梅张静萍王星梁晓慧张亚楼张琰温浩
- 关键词：泡球蚴原核表达
- 异常胆液质证大鼠尿液代谢组分的变化及其意义
- 2017年
- 目的:基于代谢组学方法研究异常胆液质证大鼠尿液中的差异性代谢组分,并通过差异性代谢组分结果探讨异常胆液质证的分子基础。方法:选用Wistar大鼠,通过干热环境、干热性饲料、慢性电刺激等多复合因素建立维吾尔医学异常胆液质载体动物模型,通过代谢组学方法检测尿液中的差异性代谢物。结果:异常胆液质证大鼠尿液具有显著性高峰度代谢物为异亮氨酸、亮氨酸、糖蛋白,具有显著性低峰度代谢物为谷氨酰胺、肌酸、柠檬酸、苯丙氨酸。结论:多因素复合刺激可促进异常胆液质的产生,异常胆液质证大鼠存在三大营养物质及能量代谢障碍,可能是异常胆液质证的分子基础。
- 哈力旦.阿布都卡思木江.阿西木江阿不来提.阿合买提吴桂霞张静萍库热西.玉努斯
- 关键词：代谢组学维吾尔医学
- 雌酮人工抗原的制备与鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的制备雌酮人工抗原。方法采用碳化二亚胺法将雌酮半抗原与载体蛋白牛血清清蛋白连接制备免疫耦联物,用紫外分光光度法测定耦联率,并测定兔抗体血清效价。结果测得耦联率比为12:1,血清抗体效价为6.4×103。结论该方法简便、结果准确可靠,可应用于雌酮免疫原合成。
- 巩月红冯晓辉高晓黎齐新伟张静萍温浩
- 关键词：半抗原人工抗原
- 包虫病患者血清中sICAM-1水平的检测被引量：1
- 2007年
- 目的通过检测包虫病患者血清sICAM-1水平,为探讨包虫免疫逃避机理提供资料。方法以ELISA双抗体夹心法检测40名包虫病患者和16名健康体检者血清中sICAM-1水平。结果包虫病患者和健康体检者血清中sICAM-1的水平分别为(106.76±15.68)pmol/L和(43.42±31.41)pmol/L,两者间差异有显著性(P<0.05)。结论人体感染包虫后,sICAM-1的合成增加。
- 张亚楼马旭东张静萍王刚刘辉张雪林仁勇温浩
- 关键词：包虫病酶联免疫吸附试验可溶性细胞间粘附分子
