张龙
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技部农业科技成果转化资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定
- 为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白用于单抗的制备,以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白...
- 张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明
- 关键词：重组CAP蛋白单克隆抗体
- 文献传递
- 抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定
- 为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)...
- 张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明
- 关键词：重组CAP蛋白单克隆抗体抗性鉴定
- 文献传递
- 猪细环病毒(TTSuVs)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTSuVs遗传变异分析
- 刘建波郭龙军张龙危艳武黄立平吴洪丽刘长明
- 猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白的表达及其单克隆抗体的制备
- 为了表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白用于单抗的制备,以含tTTV1全长基因组的重组质粒(pMD18-TTVl-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增了PTTV10RF1 (1501～2475)编码的Cap蛋...
- 张龙刘建波黄立平危艳武郭龙军吴洪丽刘长明
- 抗猪输血传播病毒1型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2011年
- 为制备抗猪输血传播病毒1型(TTV1)Cap蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究采用PCR法扩增TTV1ORF1(1501 nt～2475 nt)编码重组Cap蛋白的C末端截短序列,将PCR产物克隆于pGEX-6P-1载体中,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中诱导表达,获得含GST标签的重组蛋白(rCap),经SDS-PAGE和western blot鉴定表明rCap约为64.0 ku,以包涵体形式存在。用纯化的rCap免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗rCap蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚类均为IgG1/κ型;western blot鉴定表明有7株MAbs与rCap产生特异性反应,另1株MAb呈阴性。为验证8株MAbs与真核表达的Cap蛋白的免疫反应性,将全长与截短的TTV1 ORF1基因片段克隆于pcDNA3.1载体,转染293T细胞进行蛋白瞬时表达,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法检测表明,这8株MAbs均能够与瞬时表达的全长rCap产生特异性反应,其中6株与截短表达的rCap反应。本研究表达的rCap蛋白及制备的MAbs,为该病毒检测方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础。
- 张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明
- 关键词：重组CAP蛋白单克隆抗体
