房青
- 作品数:6 被引量:31H指数:4
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 硒蛋白P同功型突变体短肽hSelP82m分析
- 2005年
- 目的: 切割硒蛋白P同功型突变体活性肽hSelP137m,以得到可能具备相同生物学活性而氨基酸数目更少的短肽.方法: 利用生物信息学技术分析hSelP280m,hSelP137m的活性功能域,用羟胺切割hSelP137m,并用SDSPAGE及蛋白质印迹加以分析验证.结果: 切割hSelP137m后得到了82(28aa- 109aa)个氨基酸的多肽,在特定的位置出现了预期的目的蛋白条带.利用生物信息学技术加以分析,认为hSelP82m基本具备hSelP137m的生物学活性.结论: 经切割硒蛋白P同功型突变体活性肽hSelP137m,成功得到82个氨基酸的短肽hSelP82m,并且认为其基本具备hSelP137m的生物学活性.
- 王青窦科峰钱海利马庆久鲁建国宁力房青林晨
- 关键词:蛋白质类肽类计算生物学印迹法蛋白质
- 小同功型人硒蛋白P的诱导凋亡活性被引量:3
- 2004年
- 目的 研究小同功型人硒蛋白P(HSelP)的作用。方法 克隆HSelP小同功型基因 ,将位于N端 4 0位的硒半胱氨酸 (SeCys)突变为半胱氨酸 ,测序确定后 ,在感受态大肠杆菌BL2 1中大量表达 ,表达产物HSelP2 80m用阴离子交换层析纯化 ,Westernblot方法鉴定。提取小鼠肝细胞线粒体 ,通过荧光光谱仪检测线粒体悬液 90°光散射强度和罗丹明 12 3荧光光度变化 ,确定不同浓度HSelP2 80m引起的线粒体膜透过性转运孔 (PTP)开放程度和线粒体跨膜电位的变化。结果 成功地将HSelP小同功型中SeCys点突变为半胱氨酸 ,在原核表达系统中获得大量表达。表达产物纯化后纯度达 90 %以上。HSelP2 80m可促进线粒体PTP开放 ,跨膜电位下降 ,且有剂量依赖关系 ,可被PTP的特异抑制剂所抑制。此作用在去除N端 4 0个氨基酸后丧失。结论 HSelP2 80m有促进线粒体PTP开放的作用 ,为进一步研究HSelP的结构和功能提供了线索。
- 房青伊瑶郑艳华陈佺宁力查园园毕胜利杨建国林晨
- 关键词:凋亡活性氨基酸
- 硒蛋白P的研究进展被引量:13
- 2003年
- 硒蛋白 P最初在血浆中发现 ,占血浆总硒的 6 0 %。在其多肽链中有 10个硒半胱氨酸 ,由 10个读码框内的 U GA编码 ,而 UGA一般是作为终止密码子起作用。故硒蛋白 P的生物合成需要多个特异的因子 ,如特异的 t R-NA、延伸因子和 m RNA上的特异的二级结构等。硒蛋白 P的功能尚不清 ,初步的研究结果提示可有转运硒、抗氧化。
- 房青林晨杨建国
- 关键词:硒蛋白P
- 兔抗人硒蛋白P抗体的制备与鉴定被引量:10
- 2004年
- 目的 :以原核表达的人硒蛋白P片段 (HSelP)制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法 :在E .coli中诱导表达HSelP片段 ,经DEAEfastflow和Ni NTA Agarose柱层析纯化后 ,以其为免疫原制备兔抗HSelP抗体 ,并以Westernblot鉴定抗体的特异性。结果 :成功地表达并纯化了HSelP ,制备的兔抗HSelP抗体可有效地检测天然的SelP。结论 :以原核表达并纯化的HSelP为免疫原 ,成功地制备了兔抗该蛋白的抗体 ,Westernblot鉴定特异性良好。为进一步研究硒蛋白P的功能。
- 房青张明程查园园毕胜利李志伟杨建国小祝修林晨
- 关键词:多克隆抗体
- 硒蛋白P在结肠癌组织中的表达及其意义被引量:4
- 2006年
- 目的:研究结肠癌组织中硒蛋白P的表达及其意义.方法:选用手术切除结肠癌组织30例,同时另取30例正常结肠组织作为对照,用免疫组化的方法观察硒蛋白P在结肠癌组织中的表达.结果:硒蛋白P在结肠癌组织中的阳性表达率(60.0%)低于其在正常结肠组织中的表达率(80.0%),二者相差有统计学意义(P<0.05);硒蛋白P在高、中分化病例中表达率(86.7%)高于低分化例病例中表达率(33.3%),二者相差有统计学意义(P<0.05);硒蛋白P在Ⅰ~Ⅱ期病例中表达率为58.8%,Ⅲ期病例中表达率为61.5%,二者相差无统计学意义(P>0.05).结论:硒蛋白P在结肠癌组织中为低表达,与肿瘤的分化程度有关,与肿瘤的TNM分期无关.
- 鲁建国王青马庆久宁力房青褚延魁杜锡林杨媛林晨
- 关键词:硒免疫组织化学
- 利用组织芯片技术检测硒蛋白P在胃癌组织中的表达被引量:6
- 2005年
- 目的:研究胃腺癌组织芯片中硒蛋白P的表达.方法:选用胃腺癌组织30例制备组织芯片,30例正常胃组织作为对照,用免疫组化的方法观察硒蛋白P在胃腺癌组织中的表达.结果:硒蛋白P在胃腺癌组织中的表达(17/30,56.7%)低于在正常胃组织中的表达(25/30,83.3%),二者差异有统计学意义,P=0.030;硒蛋白P在高、中分化病例中的阳性表达率为76.5%(13/17),高于低分化病例中表达率30.8%(4/13),二者差异有统计学意义,P=0.004;硒蛋白P在Ⅰ~Ⅱ期病例中表达为57.9%(11/19),Ⅲ期病例中表达为54.5%(6/11),二者差异无统计学意义,P=0.672.结论:硒蛋白P在胃腺癌组织中为低表达,与肿瘤的分化程度呈负相关,与肿瘤的TNM分期无关.
- 王青吕宁窦科峰薛丽艳钱海利房青谢永强刘秀云杨建国马庆久鲁建国詹启敏林晨
- 关键词:病理学硒免疫组织化学