杨建国
- 作品数：11 被引量：37H指数：4
- 供职机构：北京市营养源研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 木聚糖酶B基因克隆和在大肠杆菌中表达的研究
- ＜正＞用基因工程技术克隆及大肠杆菌中表达木聚糖酶B基因,并检测表达产物的酶活性。木聚糖酶B的基因来源于黑曲霉kawachi,用PCR方法获得该基因片断,然后用分子拼接方法获得全基因,经DNA序列分析证实基因正确。将该基因...
- 杨建国张明程毕胜利
- 文献传递
- 人Sep15的基因克隆和功能的初步研究被引量：4
- 2003年
- 背景与目的:Sep15是1998年发现的一种新的硒蛋白。文献报道Sep15可能与肿瘤的发生有关,并参与二硫键的还原。但迄今为止,Sep15的确切功能还不清楚。本实验拟对Sep15与肿瘤的关系及其抗氧化功能进行初步研究。方法:应用RT-PCR方法获得人Sep15的全长cDNA基因,并重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,将重组质粒pcDNA3.1-Sep15转染到人肝癌细胞株BEL-7402,得到Sep15高表达的细胞株BEL-7402-Sep15,然后通过一系列体内和体外实验研究Sep15与肝癌细胞的关系及其抗氧化作用。结果:转染Sep15基因不影响肝癌细胞株BEL-7402的细胞形态、生长速率、克隆形成能力和裸鼠体内肿瘤生长速率;检测不同浓度外源性H2O2氧应激处理后3种细胞BEL-7402-Sep15、BEL-7402-pcDNA3.1和BEL-7402的细胞存活率,结果显示BEL-7402-Sep15的细胞存活率明显高于BEL-7402-pcDNA3.1和BEL-7402(P<0.05)。结论:转染Sep15基因的肝癌细胞株BEL-7402具有抗氧化的生物学活性。
- 吴红杰林晨查园园杨建国张明诚张雪艳梁肖付明吴旻
- 关键词：硒蛋白抗氧化肿瘤克隆
- 小同功型人硒蛋白P的诱导凋亡活性被引量：3
- 2004年
- 目的 研究小同功型人硒蛋白P(HSelP)的作用。方法 克隆HSelP小同功型基因 ,将位于N端 4 0位的硒半胱氨酸 (SeCys)突变为半胱氨酸 ,测序确定后 ,在感受态大肠杆菌BL2 1中大量表达 ,表达产物HSelP2 80m用阴离子交换层析纯化 ,Westernblot方法鉴定。提取小鼠肝细胞线粒体 ,通过荧光光谱仪检测线粒体悬液 90°光散射强度和罗丹明 12 3荧光光度变化 ,确定不同浓度HSelP2 80m引起的线粒体膜透过性转运孔 (PTP)开放程度和线粒体跨膜电位的变化。结果 成功地将HSelP小同功型中SeCys点突变为半胱氨酸 ,在原核表达系统中获得大量表达。表达产物纯化后纯度达 90 %以上。HSelP2 80m可促进线粒体PTP开放 ,跨膜电位下降 ,且有剂量依赖关系 ,可被PTP的特异抑制剂所抑制。此作用在去除N端 4 0个氨基酸后丧失。结论 HSelP2 80m有促进线粒体PTP开放的作用 ,为进一步研究HSelP的结构和功能提供了线索。
- 房青伊瑶郑艳华陈佺宁力查园园毕胜利杨建国林晨
- 关键词：凋亡活性氨基酸
- 硒蛋白P的研究进展被引量：13
- 2003年
- 硒蛋白 P最初在血浆中发现 ,占血浆总硒的 6 0 %。在其多肽链中有 10个硒半胱氨酸 ,由 10个读码框内的 U GA编码 ,而 UGA一般是作为终止密码子起作用。故硒蛋白 P的生物合成需要多个特异的因子 ,如特异的 t R-NA、延伸因子和 m RNA上的特异的二级结构等。硒蛋白 P的功能尚不清 ,初步的研究结果提示可有转运硒、抗氧化。
- 房青林晨杨建国
- 关键词：硒蛋白P
- 应用组织芯片技术研究硒蛋白P在肝细胞癌中的表达及意义被引量：4
- 2004年
- 目的 :探讨硒蛋白P(selenoprotein P ,Se P)在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达及其临床病理意义 .方法 :分别选取HCC组织标本 84例、正常肝组织标本 6 0例制备组织芯片 .应用免疫组织化学ABC法 ,用Se P兔抗人多克隆抗体检测 84例HCC组织和 6 0例正常肝组织中Se P的表达 ,同时结合临床病理进行分析 .结果 :Se P在HCC组织和正常肝组织中阳性表达率分别为 77.4 % (6 5 / 84 )和 95 .0 %(5 7/ 6 0 ) ,二者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) .HCC中Se P阳性率与患者肝功能Child分级有关 ,与肿瘤TNM分期、Edmondson病理分级无关 .结论 :Se P可能与HCC的发生有关 .HCC组织中Se
- 宁力马庆久朗兵晏伟鲁建国赖大年杨建国林晨
- 关键词：硒蛋白P肝肿瘤组织芯片免疫组织化学
- 重组人硒蛋白P基因表达纯化方法及专用引物与培养基
- 本发明涉及一种重组人硒蛋白P基因的表达纯化方法与专用引物及专用培养基,该方法将人肝细胞cDNA,用PCR方法(引物1为5′GTGGTTGTGACAACCCCAGC3引物2为5′AATGGAAAGCATGTCTTTGT)获...
- 杨建国
- 文献传递
- 兔抗人硒蛋白P抗体的制备与鉴定被引量：10
- 2004年
- 目的 :以原核表达的人硒蛋白P片段 (HSelP)制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法 :在E .coli中诱导表达HSelP片段 ,经DEAEfastflow和Ni NTA Agarose柱层析纯化后 ,以其为免疫原制备兔抗HSelP抗体 ,并以Westernblot鉴定抗体的特异性。结果 :成功地表达并纯化了HSelP ,制备的兔抗HSelP抗体可有效地检测天然的SelP。结论 :以原核表达并纯化的HSelP为免疫原 ,成功地制备了兔抗该蛋白的抗体 ,Westernblot鉴定特异性良好。为进一步研究硒蛋白P的功能。
- 房青张明程查园园毕胜利李志伟杨建国小祝修林晨
- 关键词：多克隆抗体
- 硒蛋白与人体健康
- 文章主要介绍了人体中硒蛋白的种类，硒蛋白与人体健康的关系，并指出了解人体硒蛋白的水平的方法，做到科学补硒。
- 杨建国
- 关键词：营养学硒蛋白微量元素
- 文献传递
- 硒蛋白P的研究进展被引量：7
- 2002年
- 硒蛋白P(SeP)是从大鼠和人血浆中分离、纯化得到的一种糖蛋白 ,每个硒蛋白P多肽含有10个硒代半胱氨酸。硒蛋白P中的硒含量占大鼠和人血浆中硒含量的 5 0 %以上。在其mRNA开放阅读框架中克隆的cDNA的序列含有 10个UGA密码子。硒代半胱氨酸在一个UGA密码子处嵌入蛋白的一级结构 ,尽管对硒蛋白P功能还没有彻底了解 ,它的一种非常可能的作用是作为一种胞外抗氧化剂。大鼠血浆中的硒蛋白P在体内实验中对Diquat诱导的脂质过氧化和肝损坏具有保护作用 ,人血浆中的硒蛋白P在体外实验中显示减少内毒素过氧化硝酸盐和磷脂氢过氧化物的活性。
- 顾鹏李志伟杨建国聂实践李东
- 关键词：硒蛋白硒蛋白P硒硒代半胱氨酸
- 重组腺相关病毒介导人内皮抑素抑瘤作用的实验研究被引量：3
- 2002年
- 背景与目的:研究表明,内皮抑素能抑制肿瘤血管的生成,进而抑制肿瘤的生长和转移,然而有关内皮抑素治疗的研究报道却很少。本研究初步探讨了重组腺相关病毒介导内皮抑素对肿瘤生长和转移的作用。方法:用RT-PCR方法获得人内皮抑素基因,构建内皮抑素可分泌表达的通用型重组腺相关病毒(rAAV)载体,包装获得重组腺相关病毒rAAV-SS-Endostatin。以动物实验分析其抗肿瘤作用。结果:C57BL/6小鼠肌肉注射1011TUrAAC-SS-Endostatin一次,该重组病毒对小鼠黑色素瘤B16F10移植瘤生长的抑制率为57.1%,在实验肺转移模型中,对转移灶的抑制率为70.7%。结论:重组腺相关病毒介导的内皮抑素能有效抑制肿瘤的生长和转移。
- 路国秋查园园吴小兵杨建国张雪艳付明梁肖吴旻林晨
- 关键词：重组腺相关病毒内皮抑素基因治疗
