朱亚平 作品数:6 被引量:16 H指数:3 供职机构: 北京化工大学生命科学与技术学院制药工程系 更多>> 相关领域: 生物学 理学 化学工程 更多>>
重组hepcidin的分离纯化及鉴定 Hepcidin是一个主要在肝脏表达的含8个半胱氨酸残基的小分子多肽,是机体铁稳态调控途径中关键性的效应分子,其主要生物学功能在于调节小肠上皮细胞对于铁的吸收。另外,hepcidin和许多富含半胱氨酸的抗菌肽类似具有显著... 朱亚平关键词:半胱氨酸 基因工程 分离纯化 文献传递 重组hepcidin的分离纯化及鉴定 被引量:3 2006年 建立了重组hepcidin的分离纯化方法,并鉴定其抗菌活性。经金属螯合初步纯化的重组蛋白在cysteine/cystine氧化还原体系中氧化形成二硫键,用变性条件下的凝胶过滤除去多聚体,稀释复性后用于肠激酶酶切反应,得到重组hepcidin。融合蛋白His-hepcidin经氧化、复性后的总收率为50%,纯度大于95%。酶切后所得重组hepcidin经抑菌圈试验检验,对枯草芽孢杆菌具有抗菌活性。LC-ESI-MS与园二色光谱检测显示重组hepcidin与天然hepcidin相对分子质量相同、二级结构相似。 朱亚平 袁其朋 张怀关键词:二硫键 复性 纯化 重组hepcidin的分离纯化及鉴定 建立了重组hepcidin 的分离纯化方法,并鉴定其活性。由于担体序列不会参与二硫键的形成,因此采用先氧化形成二硫键,再用肠激酶酶切的方法制备重组hepcidin。融合蛋白His-hepcidin 经氧化、复性后的总收率... 朱亚平 袁其朋 张怀关键词:二硫键 复性 分离纯化 枯草芽孢杆菌 文献传递 利用膨胀法直接测定实际气体维里系数的研究-三维里方程适合烃类气体的修正 朱亚平关键词:烃类气体 维里系数 人Hepcidin融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达 被引量:10 2005年 为了在大肠杆菌中表达生产hepcidin ,根据大肠杆菌密码子偏好性 ,化学合成了人hepcidin的基因序列 ,并构建了hepcidin的融合表达载体pET -hpc。pET- hpc在大肠杆菌BL2 1 (DE3)中表达的hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在 ,其N端带有 6个组氨酸。通过优化诱导表达条件 ,该融合蛋白表达水平显著提高 ,占总蛋白的 2 5 . 2 %。表达的包涵体经 1 %TritonX 1 0 0洗涤后溶于8mol L尿素 ,在变性条件下采用金属螯合层析进行纯化 ,所得融合蛋白纯度大于 95 %。 张怀 袁其朋 朱亚平 马润宇关键词:融合表达载体 大肠杆菌 包涵体 总蛋白 密码子 重组Hepcidin融合蛋白的金属螯合亲和层析纯化 被引量:7 2005年 在大肠杆菌中表达的重组Hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在,其N端带有6个组氨酸。以Ni2+-IDA-Sepharose Fast Flow为层析介质,在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式对Hepcidin融合蛋白的纯化效果进行了比较,确定了该融合蛋白的金属螯合层析纯化条件。以60 mmol/L咪唑洗脱杂蛋白,然后将pH值降至4.0洗脱融合蛋白,纯化后的融合蛋白纯度大于95%,而且不含咪唑,有利于下一步Hepcidin的制备。金属螯合层析中融合蛋白收率不低于90%。Ni2+-IDA-Sepharose Fast Flow对该融合蛋白的吸附量为30.4 mg/mL。 张怀 袁其朋 朱亚平 马润宇关键词:HEPCIDIN 融合蛋白 包涵体 金属螯合亲和层析