朱发明
- 作品数：397 被引量：957H指数：16
- 供职机构：浙江省血液中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学电子电信更多>>
- TypeStream Visual软件在浙江汉族人群HLA分型结果指定的情况分析被引量：1
- 2022年
- 目的基于Ion Torrent S5平台评价TypeStream Visual(TSV)软件应用于HLA基因分型结果指定的情况。方法采用AllType NGS测序试剂盒在Ion Torrent S5平台上对364例标本检测HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1基因型。对HLA-DRB1位点纯合子标本采用PCR-SSO流式磁珠法复核HLA-DRB1基因。对外显子区域碱基存在报警的标本采用PCR-SBT法复核。使用TSV1.3.0软件指定NGS法的HLA分型结果,直接计数法统计分析每个位点的各类报警情况。结果364例标本HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1位点结果中,至少有一个等位基因报警的组合有1193对,占总数的65.55%。共计18对等位基因组合报警存在外显子区域碱基错配,经PCR-SBT方法复核仅发现2例为真实的错配,其他16例为NGS错误的判定。发现2例标本NGS法结果分别在HLA-B和HLA-DRB1位点中判定出现偏差。HLA-DRB1位点纯合子标本NGS法与PCR-SSO法检测结果一致。结论基于Ion Torrent S5平台,AllType NGS测序试剂和TSV专业软件应用于HLA基因分型结果准确,针对外显子区域碱基错配的报警宜采用PCR-SBT法进行复核。
- 董丽娜王芳王芳何吉章伟
- 关键词：人类白细胞抗原
- 杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因检测专家共识
- 2023年
- 杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因家族具有复杂的遗传多态性,既有等位基因水平的多态性,同时还存在KIR单体型组成、基因拷贝数的差异性。为了规范KIR基因检测,中国输血协会人类组织抗原专业委员会与深圳市血液中心组织专家依据国内外文献和实践经验,制定了此专家共识,对KIR基因多态性检测方法、质量控制、检测报告和应用等进行了阐述,旨在提高KIR基因检测的准确性。
- 中国输血协会人类组织抗原专业委员会深圳市血液中心邓志辉朱发明汤敏中王珏鲍晓晶
- 关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因家族多态性
- 人类血小板同种抗原相关的膜糖蛋白基因多态性研究
- 2011年
- 目的探讨人类血小板同种抗原（human platelet alloantigen，HPA）-1～17w相关的血小板膜糖蛋白基因多态性。方法以自行设计的PCR引物特异性扩增HPA-1～17w相关的血小板膜糖蛋白基因片段，PCR产物经酶切纯化后直接进行DNA序列分析，根据序列特征确定HPA基因型和相应膜糖蛋白基因多态性。结果通过对112名随机汉族个体的糖蛋白基因序列分析，发现13个新的单核苷酸多态性位点和1个微卫星重复序列。其中ITGB3基因上的2个变异位点1333G／A和1960G／A引起膜糖蛋白GPⅢa的V419M和E628K氨基酸改变。结论膜糖蛋白基因具有多态性位点，可能引起膜糖蛋白结构的改变，同时可能影响现有部分HPA基因分型方法的准确性。
- 蓝小飞应燕玲刘瑛许先国朱发明吕杭军严力行
- 关键词：遗传多态性膜糖蛋白血小板
- 汉族人群白血病患者HLA-A、-B、-DRB1等位基因多态性和单体型频率分析
- 目的分析白血病患者HLA-A、-B和-DRB1位点在高分辨基因分型水平上的单体型频率及连锁不平衡特征。方法回顾性分析1330名白血病患者HLA高分辨分型情况,HLA-A、-B和-DRB1基因座高分辨分型方法采用聚合酶链反...
- 章伟严力行王炜陈男英和艳敏陶苏丹韩浙东何俊俊朱发明吕杭军
- MICB基因的克隆表达及其在抗体测定中的初步应用
- 2015年
- 目的：构建可行的MICB （ major histocompatibility complex class Ⅰ chain-related gene B）基因原核表达系统及蛋白质纯化体系,利用表达纯化蛋白建立ELISA方法初步应用于肾移植患者中MICB抗体的检测。方法外周血RNA经RT-PCR和特异性引物扩增获得MICB基因cDNA, MICB cDNA和原核表达载体pET-28a分别双酶切后连接构建重组表达载体,转染宿主菌E. coli BL21 DE3,IPTG诱导表达。亲和层析的Ni-NTA Spin纯化蛋白质,并通过Western blot鉴定。利用纯化蛋白建立ELISA法检测肾移植患者中MICB抗体。结果构建3个MICB常见等位基因2、3外显子的pET-28a-MICB重组表达体系,经Ni-NTA Spin纯化获得重组的MICB蛋白,Western blot鉴定。利用3个不同MICB蛋白质成功构建了ELISA方法,初步检测24份肾移植患者标本MICB抗体,显示不同的重组蛋白敏感性存在差异。结论本研究建立MICB基因克隆与体外表达技术,鉴定并纯化具有生物活性的蛋白质,同时建立MICB抗体检测的ELISA方法,为进一步研究MICB与移植免疫的关系提供基础资料。
- 应燕玲和艳敏陶苏丹何吉朱发明吕杭军
- 关键词：MICB蛋白表达纯化抗体测定
- ABH变异型个体血小板表面ABO抗原强度分析
- 许先国洪小珍刘瑛陈舒马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军
- mica基因的克隆及其在原核系统中的表达被引量：1
- 2010年
- 本研究构建mica基因原核表达系统并纯化MICA蛋白。利用外周血标本提取RNA,经RT-PCR获取mica基因cDNA。将mica cDNA经TOPO克隆连接构建克隆载体,然后将克隆重组载体和原核表达载体pET-28a经双酶切后进行连接构建重组表达载体,进而转染宿主菌E.coliBL21DE3进行表达。利用亲和层析的Ni-NTASpin纯化重组的MICA蛋白。结果表明:带有重组质粒pET-28a-mica的宿主菌经IPTG诱导表达后,以可溶性形式大量表达重组的MICA蛋白,经Ni-NTA Spin纯化后得到重组的MICA蛋白。结论:本研究构建了mica基因原核表达系统并纯化了MICA蛋白,为探讨MICA与移植免疫的关系奠定了基础。
- 和艳敏陶苏丹应燕玲朱发明吕杭军严力行
- 关键词：MICA基因基因克隆原核表达
- 高分辨精确组织配型技术的研制及其临床应用
- 朱发明严力行吕杭军和艳敏章伟何俊俊王炜韩浙东陈男英许先国刘晋辉
- 项目通过自行设计引物，系统建立了HLA-A、-B、-C基因1-7外显子双向测序的高分辨组织配型技术，并成功进行专利申请。项目建立了HLA-Ⅰ类基因克隆方法，可以将个体HLA-Ⅰ类基因的两个等位基因有效分离。建立了HLA-...
- 关键词：
- 关键词：等位基因
- 浙江汉族人群HLA-A、-B、-DRB1高分辨等位基因频率和单体型分析被引量：4
- 2010年
- 研究表明HLA具有高度连锁不平衡的遗传特点,不同民族或地区人群基因或单体型频率分布存在明显的不同,可作为不同种群特征性的遗传标志,目前有关不同人群HLA-A、-B、-DRB1基因频率和单体型分布情况已有众多的报道,但大多研究采用低分辨基因分型方法[1-3].本实验采用高分辨基因分型技术检测了1100例浙江汉族人群的HLA-A、-B、-DRB1位点,分析了人群HLA高分辨等位基因分布、单体型频率及连锁不平衡特征,现将结果报告如下 ：
- 何俊俊章伟和艳敏陶苏丹韩浙东朱发明吕杭军严力行
- 关键词：等位基因频率HLA-A单体型分析汉族人群基因分型方法
- 杭州地区无偿献血者血液筛查中丙型肝炎病毒残余风险的评估被引量：4
- 2020年
- 目的评估杭州地区无偿献血者血液筛查过程中丙型肝炎病毒(Hepatitis c virus,HCV)的残余风险。方法回顾分析本中心2016年1月~2017年12月无偿捐献全血者284691例次,HCV血液筛查流程采用两次酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和一次核酸检测(Nucleic acid test,NAT)模式。利用流行率-窗口期残余风险模型对初次献血者和重复献血者进行HCV残留风险评估。结果杭州地区捐献全血的初次献血者HCV检测阳性率显著高于重复献血者(P<0.01)。初次献血者HCV流行率为每10万4.530(95%CI:2.712~5.211),ELISA检测残余风险为每百万7.446(95%CI:4.458~8.565),NAT检测残余风险每百万0.621(95%CI:0.372~0.714)。重复献血者HCV流行率为每10万1.510(95%CI:0.904~1.737),ELISA检测残余风险为每百万2.482(95%CI:1.486~2.855),NAT检测残余风险每百万0.207(95%CI:0.124~0.238)。结论开展血液核酸检测可明显降低HCV血液筛查的残余风险,杭州地区输血传播HCV的残留风险处于非常安全水平。
- 董杰祝宏祝宏励晓涛凌霞朱发明
- 关键词：丙型肝炎病毒无偿献血者血液筛查
