许先国
- 作品数:199 被引量:580H指数:17
- 供职机构:浙江省血液中心更多>>
- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学电子电信一般工业技术更多>>
- RHD基因测序方法的建立及其在弱D表型分子鉴定中的应用被引量:10
- 2006年
- 目的建立RHD基因的测序方法并对9例弱D表型作分子鉴定。方法用间接抗人球蛋白试验(IAT)筛选弱表达的D变异体,聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法扩增RHD基因特异的外显子及其侧翼序列,PCR产物直接序列分析测定核苷酸的变异。结果用PCR-SSP方法特异扩增RHD基因,50份随机Rh阴性(ccdee)样本呈阴性结果,51例随机Rh阳性样本呈阳性结果。扩增产物测序结果表明,15份代表性Rh阳性单倍体型的RHD基因序列和标准序列一致。用所建立的方法对9份弱D表型样本进行测序分析,发现5份有845G>A突变,3份有1227G>A突变,1例有1013T>C突变。结论所建立的RHD基因测序方法可以用于弱D的分子鉴定。9份弱D表型的分子机理得到明确。
- 吴俊杰洪小珍许先国傅启华严力行
- 关键词:RH-HR血型系统RHD基因血型鉴定和交叉配血
- 参加ISBT第15届血小板免疫学研讨会质控项目结果分析
- 目的国际输血协会(ISBT)血小板免疫学研讨会通过发放血小板免疫血清学和基因分型样本,评价各国参与实验室在血小板免疫学和基因分型方面的研究检测能力。方法本届研讨会共发放4组血小板质控品:1)2份血浆,用于血小板GPⅡb/...
- 许先国刘瑛应燕玲洪小珍朱发明吕杭军严力行
- α1,3半乳糖基转移酶基因721C>T突变导致B_w亚型被引量:21
- 2005年
- 目的 研究红细胞ABO血型系统Bw亚型的分子基础。方法 通过标准血型血清学方法明确鉴定2个家庭3例Bw亚型,PCR扩增Bw 亚型ABO糖基转移酶基因的增强子、启动子和第1~7外显子及侧翼内含子序列,PCR产物经割胶纯化后直接测序。同时将第6和7外显子克隆到pc DNA3.1(- )质粒,转化DH5α后进行序列分析。采用序列特异性引物-聚合酶链反应方法证实测序所发现的突变。结果 直接测序发现3例Bw亚型的基因型为B/ O杂合,其中糖基转移酶基因的第2 6 1位G杂合缺失,第72 1位C/ T杂合。克隆证实一条染色体上为正常的O等位基因,另一条染色体上B等位基因(α1,3半乳糖基转移酶基因)存在第72 1位C>T突变,导致多肽链Arg2 4 1Trp替换。序列特异性引物-聚合酶链反应检测14 0份随机样本未发现此突变。结论 α1,3半乳糖基转移酶基因第7外显子72 1C>T突变可能是Bw亚型分子遗传基础之一。
- 朱发明许先国洪小珍严力行
- 关键词:突变序列特异性引物聚合酶链反应方法PCDNA3直接测序DH5Α
- cisAB亚型第6、7外显子及侧翼内含子序列分析被引量:27
- 2003年
- 目的 研究汉族ABO血型系统cisAB亚型的分子遗传基础。方法 在标准血清学鉴定和PCR SSP基因分型的基础上 ,对汉族cisAB亚型进行第 6、7外显子及侧翼内含子DNA扩增 ,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果 血清学鉴定表明2例标本分别为A2 B3 和A3 B ,先证者的PCR SSP基因分型肯定了其中的B和O1基因。DNA序列分析表明 ,其第 6外显子有2 6 1G缺失 /不缺失杂合 ;第 7外显子与A1基因相比 ,有T4 6 7C杂合和C80 3G杂合 ,796位为正常C ,表明其血型为罕见的cisAB亚型。结论 4 6 7T、796C和 80 3C三处核苷酸的独特性决定了cisAB亚型的分子遗传基础。
- 许先国洪小珍朱发明陈宗梵严力行
- 关键词:ABO血型系统
- α1,3半乳塘基转移酶基因721C>T突变导致Bw亚型
- 目的研究红细胞ABO血型系统Bw亚型的分子基础。方法通过标准血型血清学方法鉴定了2个家庭3例 Bw亚型,PCR扩增Bw亚型α1,3半乳糖基转移酶基因增强子、启动子和外显子1-7及侧翼内含子序列,PCR产物经割胶纯化后直接...
- 朱发明许先国洪小珍严力行
- 文献传递
- Kidd血型系统研究进展被引量:11
- 2001年
- Kidd(JK)血型是一种重要的红细胞血型系统,JK抗体结合补体产生溶血会导致严重的迟发性溶血性输血反应和新生儿溶血症,从分子水平了解Kidd血型的基因结构有助于对其正确定型和及早防治新生儿溶血症。近期的研究还表明,JK蛋白多肽链起着尿素转移因子作用,可能与肾单位尿素浓缩功能有关。本文主要对Kidd血型系统的蛋白质、基因结构以及基因分型方法等进行综述。
- 许先国
- 关键词:KIDD血型系统基因分型新生儿溶血症
- 一种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型方法及试剂
- 快速、准确的一种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型方法,包括步骤:(1)制备基因分型样本的人基因组DNA;(2)提供扩增引物,用聚合酶链反应同步扩增所述基因组DNA中5个血型系统12个抗原对应的基因序列;(3...
- 朱发明许先国应燕玲洪小珍陈舒马开荣何吉
- 文献传递
- α-1,2岩藻糖基转移酶基因35C>T和682A>G突变点体外表达的研究
- 目的在体外研究α-1,2岩藻糖基转移酶基因(FUT1)35C>T和682A>G突变点对α-1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)活性的影响。方法 PCR扩增FUT1全长编码序列DNA片段,通过TOPOTA技术连接至表达载体pc...
- 和艳敏洪小珍马开荣兰小飞许先国朱发明吕杭军严力行
- 浙江台州地区血清型RhD初筛阴性的血型基因分析被引量:2
- 2022年
- 目的了解浙江台州地区汉族人群RhD阴性的分子机制。方法血型血清学筛选和收集本地区6334例献血者及患者中RhD初筛阴性52例样本,并分别以间接抗球蛋白法、吸收放散法、试管盐水法和凝聚胺法,筛选鉴定D变异型、Del表型、RhCE表型和意外抗体。以PCR-SSP法对52例样本进行中国人常见RHD基因型分析,对1例基因型疑难样本进行RHD基因全外显子测序和盒子型分析。结果52例血清学初筛RhD阴性中,22例(42.3%)为RHD基因完全缺失型(RHD*01N.01);17例(32.7%)为RHD基因外显子齐全,其中14例携带RHD*01EL.01等位基因,2例携带RHD*15等位基因,1例携带RHD c.1022A等位基因;其余13例为RHD基因部分外显子缺失,其中12例携带RHD*01N.03等位基因,1例携带RHD*05.02等位基因。16例样本的RhD血清型与基因型预测表型不符,2例RHD*01N.01和2例RHD*01N.03检出抗D意外抗体。浙江台州地区汉族人群RhD阴性发生率为0.3%。结论台州地区汉族人群RhD阴性和D变异型个体的分子机制存在多态性,研究结果可为本地区RhD血型鉴定和临床输血提供理论基础。
- 杨光远朱健郑朝晖林云明许先国廖昭平
- 关键词:RHD血型RHD基因抗D
- 一种ABO血型基因分型的PCR-SBT方法及试剂
- 本发明提供一种用于ABO血型分型的PCR-SBT方法,它包括下述步骤:制备人基因组DNA;扩增ABO基因外显子1、外显子2-4、外显子5-7的片段;得到扩增产物进行双酶切纯化;将纯化产物进行测序PCR反应;将测序产物进行...
- 严力行朱发明许先国
- 文献传递