李冠青
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：安徽高校省级自然科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 安徽部分湖泊养殖鱼类暴发性出血病的病原分离与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的确定引起安徽省部分湖泊养殖鱼类暴发性出血病的病原,为防治该病提供理论依据。方法随机取濒死期鲫鱼和白鲢的肌肉组织分别进行细菌和病毒分离培养,联合采用细菌表型鉴定法和16S rRNA基因序列分析法鉴定分离菌株,并使用分离菌株进行人工感染实验。结果从5尾患病鱼的肌肉组织中分离获得5株细菌,综合分离菌株的形态特征、理化特性和16S rRNA基因序列与系统发育学分析的结果,确定L1菌株为温和气单胞菌、L2菌株为维氏气单胞菌、J1、J2和L3菌株为嗜水气单胞菌。人工感染实验表明这5个气单胞菌分离株均具有较强的致病性。结论气单胞菌是该次鱼类暴发性出血病的病原,水温剧变、水质恶化和缺氧是疾病暴发的诱因,应采取改善环境、加强饲养管理、提高鱼体抵抗病力和及时杀灭病原体的综合措施防控该病。
- 李冠青王艺李槿年邵士惠祖国掌
- 关键词：鱼类暴发性出血病病原分离表型鉴定
- 霍乱弧菌TcpA蛋白的表达及其免疫活性分析
- 2011年
- 采用PCR方法从鱼源霍乱弧菌Y1株(Vibrio cholerae Y1)扩增毒素共调菌毛蛋白A(toxin-coregulated pilin A,TcpA)基因并克隆至pMD18-T载体。序列分析显示tcpA基因ORF长675 bp,编码224个氨基酸(GenBank登录号EU649677)。同源性比对发现,该基因与GenBank中登录的7个霍乱弧菌参考株相应基因序列的核苷酸同源性和氨基酸同源性均很高,分别为99.6%～99.7%和98.7%～99.1%,表明TcpA蛋白相当保守。将tcpA基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,并进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现分子量约为47.0 kD的重组TcpA融合蛋白主要以包涵体形式表达。Western blot检测结果显示,重组TcpA融合蛋白可与鼠抗Vc Y1菌株菌毛蛋白抗血清发生特异性结合反应。用纯化的重组TcpA融合蛋白免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)制备抗血清,双相免疫扩散试验检测抗体效价达1∶16,且该抗血清能够明显抑制Vc Y1菌株对HEp-2细胞的黏附。草鱼免疫后第25天用Vc Y1菌株攻毒,结果相对免疫保护率达到73.33%。研究结果表明,重组TcpA蛋白仍保留着天然菌毛蛋白的免疫原性、免疫反应性和免疫保护性,重组TcpA蛋白可作为霍乱弧菌的候选诊断抗原和疫苗抗原。
- 陆吉虎李槿年岑俊宇李世东李冠青
- 关键词：霍乱弧菌基因表达免疫活性
- 金黄色葡萄球菌肠毒素A蛋白的B细胞表位的预测
- 2012年
- 目的预测金黄色葡萄球菌肠毒素A蛋白(SEA)的B细胞表位。方法以金黄色葡萄球菌合肥乳源分离株M3基因组DNA为模板,PCR扩增SEA基因并进行序列测定与分析。应用DNAstar protean软件对SEA蛋白的二级结构、柔性、亲水性、表面可能性和抗原指数等多参数进行综合分析,预测其B细胞表位。结果 M3分离株的SEA基因全长774 bp,编码由257个氨基酸组成的相对分子量为29.67 kDa的SEA蛋白,M3分离株SEA基因与标准株的核苷酸序列与氨基酸序列同源性分别为98.7%和98.4%。SEA蛋白的优势B细胞表位位于肽链的第64～68、100～107、138～141、156～160、166～173、213～217和237～244区段。结论预测出SEA蛋白的7个优势B细胞表位,为进而克隆表达表位蛋白,制备针对SEA表位的单克隆抗体奠定了基础。
- 张玉晴梁明燕李槿年李冠青王莉
- 关键词：金黄色葡萄球菌B细胞表位
- 同步检测金葡菌A型和G型肠毒素的基于多表位串联肽的间接竞争ELISA方法
- 本发明属于免疫分析技术领域，具体涉及一种同步检测金葡菌A型和G型肠毒素的基于多表位串联肽的间接竞争ELISA方法。本发明的方法主要包括A型和G型肠毒素多表位串联肽SE A/G（包被抗原）的制备、兔抗SE A/G抗体的制备...
- 李槿年梁明燕刘雪兰张婷婷李冠青
- 文献传递
- 乳源金葡菌主要肠毒素基因的检测、表达及其抗体制备
- 金葡菌肠毒素(Staphylococcal Enterotoxin，SE)是引起人类食物中毒和葡萄球菌胃肠炎的主要原因。SE共有18个基因类型，不同SE基因的检出率与菌株分离地域和宿主来源有关。针对合肥地区乳源金葡菌肠毒...
- 李冠青
- 关键词：基因型分布原核表达抗体制备
- 同步检测金葡菌A型和G型肠毒素的基于多表位串联肽的间接竞争ELISA方法
- 本发明属于免疫分析技术领域，具体涉及一种同步检测金葡菌A型和G型肠毒素的基于多表位串联肽的间接竞争ELISA方法。本发明的方法主要包括A型和G型肠毒素多表位串联肽SE A/G（包被抗原）的制备、兔抗SE A/G抗体的制备...
- 李槿年梁明燕刘雪兰张婷婷李冠青
- 文献传递
