李睿
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自噬在眼镜蛇神经毒素诱导A549细胞死亡中的作用被引量：7
- 2013年
- 背景与目的已有的研究表明眼镜蛇神经毒素具有抗肿瘤作用,而其在肺癌中的作用罕有研究。本研究观察cobrotoxin对人肺A549腺癌细胞株的抗肿瘤作用,探讨自噬和P38-MAPK通路在这过程中的作用。方法应用MTT法观察cobrotoxin对A549细胞和HFL1人肺成纤维细胞的生长抑制作用以及用3-MA抑制自噬、SB203580抑制P38-MAPK通路后cobrotoxin对A549细胞的生长抑制作用;应用细胞集落平板克隆实验检测cobrotoxin对A549细胞的集落形成的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定单独cobrotoxin作用、cobrotoxin分别联合3-MA抑制自噬和SB203580抑制P38-MAPK通路活性后A549细胞内beclin-1、LC3、P62、P38及pP38等蛋白表达水平。结果不同浓度cobrotoxin对A549细胞的生长有明显抑制作用,对HFL1人肺成纤维细胞无明显抑制作用,3-MA、SB203580作用后cobrotoxin对A549细胞的抑制作用降低;不同浓度cobrotoxin可明显抑制A549细胞的集落形成;cobrotoxin作用后beclin-1、pP38蛋白表达水平明显提高,P62表达明显降低,II型/I型LC3比值增大,并有浓度依赖性,3-MA抑制自噬后beclin-1蛋白表达水平降低,P62表达增高、II型/I型LC3比值减小,SB203580抑制P38-MAPK通路后beclin-1、pP38蛋白表达水平降低,II型/I型LC3比值减小。结论 cobrotoxin对人肺A549腺癌细胞体外生长有抑制作用,可能通过活化P38-MAPK通路激活自噬参与抗肿瘤过程。
- 申健何靖康唐兴韩蓉李睿徐澄澄吴亚娟
- 关键词：眼镜蛇神经毒素自噬P38-MAPK
- 响尾蛇神经毒素诱导人大细胞肺癌 NCI-H661细胞凋亡机制研究
- 2015年
- 目的观察南美响尾蛇神经毒素（crotoxin）诱导人大细胞肺癌 NCI-H661细胞的凋亡，并初步探讨其作用机制。方法通过四唑盐还原法（CCK-8）检测 crotoxin 对 NCI-H661细胞的生长抑制率，应用细胞集落平板克隆实验观察 crotoxin 对 NCI-H661细胞集落形成的影响。实验分4组：阴性对照组、crotoxin 组（60μg/ ml crotoxin 作用24 h）、crotoxin ＋ SB203580组（5μmol/ L SB203580预处理1 h 后，60μg/ ml crotoxin 作用24 h）、SB203580组（5μmol/ L SB203580预处理1 h 后，完全培养液培养），应用流式细胞术检测 crotoxin 对 NCI-H661细胞周期及细胞凋亡的影响，并检测以 SB203580抑制 p38MAPK 活性后细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果当 crotoxin 浓度≥30μg/ ml 时对 NCI-H661细胞生长和集落形成有抑制作用，且抑制率随着作用时间和给药浓度的增加而上升；流式细胞术检测 crotoxin 对 NCI-H661细胞周期及细胞凋亡影响结果显示 crotoxin 组、crotoxin ＋ SB203580组凋亡率分别为（16.70±1.38）％、（2.15±0.54）％，与对照组（1.47±0.29）％相比，前者差异具有统计学意义，后者差异无统计学意义（t ＝-18.763，P ＝0.000；t ＝-1.935，P ＝0.125）；crotoxin 组、crotoxin ＋ SB203580组 G1期细胞分别为（57.25±1.09）％、（48.04±1.03）％，与对照组（47.46±0.69）％相比，前者差异具有统计学意义，后者差异无统计学意义（t ＝-13.124，P ＝0.000；t ＝-0.809，P ＝0.464）。结论 crotoxin 对人大细胞肺癌NCI-H661细胞凋亡有促进作用，这一作用可能与其激发 p38MAPK信号通路活性有关。
- 李睿何靖康申健施臻李威于晓军
- 关键词：神经毒素类细胞凋亡
