杨生生
- 作品数：40 被引量：124H指数：7
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 铬离子对成骨细胞的毒性及对Tnfrsf17基因的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察Cr3+对成骨细胞SaO2的细胞毒性以及在Cr3+的作用下对成骨细胞Tnfrsf17基因的表达的影响。方法体外培养SaO2成骨细胞,MTT法检测细胞活力,ALP试剂盒检测成骨细胞碱性磷酸酶的分泌情况,Von Kossa试剂盒检测细胞钙结节形成。通过Rt-PCR及Western检测Cr3+对Tnfrsf17表达的影响。结果在Cr3+的刺激作用下,与对照组相比,成骨细胞在相应时间节点细胞活性和钙结节形成明显受限,ALP的分泌呈时间与剂量依赖性的降低。在Cr3+的刺激作用下,0.1、1.3和150 mg各干预组与对照组相比,Tnfrsf17的基因表达水平及蛋白表达水平在24、48和72 h后均有所下降。结论 Cr3+对成骨细胞有细胞毒性而且可以下调Tnfrsf17基因及其蛋白产物的表达。
- 高金巍李大河杨生生缪明永徐卫东
- 关键词：成骨细胞铬离子
- 一种鸭嘴兽来源的降钙素及其应用
- 本发明具体涉及一种鸭嘴兽来源的降钙素及其应用。本发明所涉及该降钙素的氨基酸序列：Cys‑Ser‑Asn‑Leu‑Ser‑Thr‑Cys‑Val‑Leu‑Gly‑Lys‑Leu‑Ser‑Gln‑Glu‑Leu‑His‑Ly...
- 蔡在龙杨生生胡杰伟陈圆圆俞瑾李安吉
- 文献传递
- DNA甲基化/去甲基化与癌症被引量：11
- 2013年
- DNA甲基化是真核细胞基因组中常见的可遗传的表观遗传修饰,在调节细胞增殖、分化、个体发育等方面起重要作用,并且DNA甲基化水平异常与肿瘤的发生发展密切相关。DNA甲基化及被动去甲基化主要是在DNA甲基转移酶家族参与下完成的,而DNA的主动去甲基化机制尚不是很明确。在肿瘤细胞中DNA的整体甲基化水平显著降低,但抑癌基因的启动子区域却出现高甲基化。目前尽管有DNA去甲基化药物用于癌症的临床治疗,但药物特异性较差,因而研究特定基因的主动去甲基化机制有助于研发特异性高的药物用于癌症的治疗。
- 周建生杨生生缪明永焦炳华
- 关键词：DNA甲基化癌症
- GLUT4在胰岛素调控葡萄糖转运中作用被引量：16
- 2014年
- 机体的血糖平衡调节主要依赖于胰岛素,其中一个重要的机制是胰岛素通过调控GLUT4的囊泡运转来调节脂肪细胞和肌细胞对葡萄糖的摄取。由胰岛素受体介导的一系列磷酸化过程能调节一些关键的GLUT4转运相关蛋白质的活性,这些蛋白质包括小GTP酶、拴系复合体和囊泡融合体。而这些蛋白质又反过来通过内膜系统调节GLUT4储存囊泡的生成、滞留,并调控这些囊泡的靶向出胞方式。了解这些过程有助于解释2型糖尿病中胰岛素耐受的机制,并可能为糖尿病提供新的靶向治疗方法。
- 唐海双王清松焦炳华杨生生
- 关键词：胰岛素葡萄糖GLUT4
- 肿瘤抑制因子Menin的应用
- 本发明的目的在于提供一种Menin在使HEK293T细胞和肝细胞中内源性固醇调节元件结合蛋白1c表达下降的应用，其特征在于：其包括使Menin过表达的步骤。本发明的另一目的在于，提供一种Menin在抑制HEK293T细胞...
- 程鹏杨生生李刚金钢胡昊宋博
- 文献传递
- Mac-1-FP融合蛋白在CHO细胞中的可调控性表达、鉴定和FRET技术对其相互作用的检测
- 白细胞粘附分子Mac-1/(macrophage differentiation antigen associated with complement three receptor function/)为位于白细胞表面的...
- 杨生生
- 关键词：MAC-1PMA黄色荧光蛋白融合蛋白
- 文献传递
- 三维内镜超声在消化系统的临床应用进展
- 1999年
- 三维内镜超声(3D-EUS)技术在消化系统检查方面比传统的检查手段更具优越性。在超声内镜中应用三维成像技术可获得食管、胃、直肠、胆、胰等器官及其周围组织的立体声像图,从而提高了诊断能力。
- 杨生生金震东
- 葛根素对子宫内膜RL95-2细胞P450芳香化酶表达的调控作用(英文)被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨葛根素对子宫内膜RL95-2细胞P450芳香化酶(aromatase P450,P450arom)表达的影响及其对RL95-2细胞P450arom基因表达的调控作用。方法:将梯度稀释的葛根素在不同时间点加入RL95-2细胞中,分别采用实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测药物对RL95-2细胞P450arom mRNA表达水平的影响。以人类基因组DNA为模板扩增人P450arom组织特异性启动子2(PⅡ)转录起始位点上游序列。PCR产物定向克隆到报告基因载体pGL3-Basic中,构建人P450aromPⅡ系列报告基因质粒,并经限制性内切酶消化鉴定和基因测序证实。瞬时转染系列重组质粒至RL95-2细胞,加入葛根素刺激,分析相关转录因子,利用RT-PCR及Western blotting方法检测相关转录因子在葛根素作用下mRNA及蛋白表达的变化。结果:与溶剂对照组比较,低浓度葛根素会抑制P450arom mRNA表达(P<0.01),抑制作用在6、12 h较显著(P<0.01)。经酶切鉴定、基因测序、转录因子分析及启动子活性测定,成功构建了人P450aromPⅡ系列重组质粒(-1 017,-763,-543,-234^+8 bp)。瞬时转染系列质粒至细胞中,于12 h后加入葛根素(10-7mol/L)刺激,又12 h后检测荧光蛋白水平。结果表明,-763^-543 bp间的活性被抑制(P<0.05),通过转录因子分析找到了-410/-401 bp的AP-1(c-jun/c-fos)。利用RT-PCR、Western blotting及荧光素酶活性检测发现葛根素(10-7mol/L)对AP-1(c-jun/c-fos)的抑制作用平行于对P450arom的作用。结论:低浓度葛根素对子宫内膜RL95-2细胞P450芳香化酶基因表达的抑制作用很可能是受上游调控转录因子AP-1(c-jun/c-fos)的影响。
- 李燕巍蔡在龙沈慰杨生生俞超芹
- 关键词：葛根素芳香化酶P450子宫内膜异位症
- 高密度培养大肠杆菌表达重组人胰高血糖素样肽-1被引量：8
- 2002年
- 目的 :高密度发酵培养表达重组人胰高血糖素样肽 - 1( h GL P- 1)。方法 :将构建的重组质粒 p GEX- h GL P- 1转化大肠杆菌 BL 2 1( DE3 ) ,得到表达 h GL P- 1的工程菌株 E.coli BL 2 1( DE3 ) / p GEX- h GL P- 1。在 5 0 0 m l三角摇瓶中进行了诱导条件的摸索实验 ,之后用 5 L自控发酵罐对工程菌进行高密度培养 ,以获取 h GL P- 1和谷胱甘肽 S-转移酶融合蛋白 ( GST- h GL P- 1)。结果 :采用分批培养和补料分批培养相结合的技术 ,控制碳源和氮源的补加 ,控制溶解氧的量 ,可使重组工程菌发酵光密度D6 0 0 值达 5 2 ,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白量的 2 8% ,其含量达到 2 .1g/ L。用 ESI质谱鉴定 h GL P- 1相对分子质量与理论值一致。 结论 :本研究为大规模生产重组 h GL P-
- 张志珍毛积芳杨生生窦鸿
- 关键词：基因表达融合蛋白质类大肠杆菌
- 慢病毒载体介导IκB激酶-α(IKKα)基因RNA干扰转基因小鼠的制备被引量：4
- 2007年
- IκB激酶-α(IKKα)的功能与淋巴形成和乳腺发育相关,在乳腺肿瘤中观察到IKKα蛋白的过量表达.应用小鼠受精卵卵周隙注射慢病毒载体的方式,建立IKKα基因RNAi转基因小鼠模型,为在体内研究IKKα基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件.实验构建了针对IKKα基因RNAi(剔降)的慢病毒载体,并将载体导入小鼠受精卵卵周隙,获得携带该载体的转基因小鼠模型,经PCR鉴定首建鼠阳性率为15%.转基因小鼠外周血细胞IKKαmRNA表达量明显降低.初步表型观察分析,IKKα基因RNAi小鼠发育正常,进一步的分析工作正在进行中.
- 杨志峰王龙杨生生匡颖陈欢徐国江蔡在龙王铸钢毛积芳
- 关键词：慢病毒载体RNA干扰转基因小鼠
