江正兵
- 作品数：11 被引量：19H指数：2
- 供职机构：湖北大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金武汉市科技计划项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学化学工程理学文化科学更多>>
- 一株极端嗜盐真菌的筛选及初步研究被引量：2
- 2018年
- 利用含10%Na Cl的查氏培养基从晒干海鱼上分离到一株极端嗜盐真菌.为了对真菌进行理化鉴定,对分离菌株MF1和购买的标准菌株Phialosimplex salinarum DSM 27530在不同培养基上的培养特征、显微形态特征、耐盐性和在15%Na Cl的条件下的碳源利用能力进行分析检测,发现分离菌株生长盐度范围为0%33%,最适生长盐度为15%,并能够在15%Na Cl的条件下利用淀粉、脂肪、木质素、脱脂奶粉或纤维素为唯一碳源生长,说明该菌株在该条件下产生了相应的酶系.随后,对分离菌株和标准菌株的8个位点基因序列进行克隆与测序,最后进行多基因联合系统发育分析,确定分离菌株MF1属于Phialosimplex.由于分离菌株具有极高的盐度耐受能力和在高盐环境下产生丰富酶系的特性,因此该菌株在耐盐机理和工业应用上具有潜在的研究和应用价值.
- 杜剑晖还萍李岭卓安爽晴江正兵马向东
- 关键词：系统发育
- 碳水化合物结合域对木聚糖酶酶学性质的影响被引量：1
- 2024年
- 【目的】旨在探究不同来源碳水化合物结合域(CBM)对山毛榉木聚糖的结合能力,并将具有较高结合能力的外源CBM融合到链霉菌L10904木聚糖酶(XYN)的C端和N端,以探究外源CBM对木聚糖酶酶学性质的影响。【方法】通过底物吸附方法,利用考马斯亮蓝G250法检测溶液中CBM在吸附前后的浓度,计算CBM的底物结合率,筛选到了结合木聚糖能力较好的CBM1和CBM4。为了探究对底物结合能力高的CBM融合位置对木聚糖酶酶学性质的影响,将CBM1和CBM4通过柔性连接肽分别与XYN的C端和N端融合,并在大肠杆菌中表达获得4种重组酶,分别命名为CBM1-XYN、XYN-CBM1、CBM4-XYN和XYN-CBM4。【结果】CBM1和CBM4与木聚糖结合率分别为89%和95%。在60℃,pH 7.0反应条件下,XYN、CBM1-XYN、XYN-CBM1、CBM4-XYN和XYN-CBM4的比活力分别是32 274.81、49 342.21、602.48、230.42和2 362.24 U/mg,CBM1-XYN比活力较XYN比活力提高了1.5倍。酶学性质分析表明,CBM1使XYN温度稳定性和pH稳定性得到了提高,将XYN和CBM1-XYN分别在60℃孵育1 h,CBM1-XYN残余酶活力和XYN残余酶活力分别为81%和28%;在pH 3-11范围内,CBM1-XYN在4℃孵育12 h后能够保持90%以上的酶活力。【结论】在大肠杆菌中成功异源表达了链霉菌来源的木聚糖酶,筛选到了对底物结合率高的两种CBM1和CBM4,并通过蛋白质融合技术成功将CBM融合到XYN上,获得酶学性质得到改良的CBM1-XYN,能够提高木聚糖酶的温度稳定性、pH耐受性及比酶活。
- 蒋文萍冉秋萍刘家书张慧敏张迪江正兵江正兵
- 关键词：木聚糖酶融合蛋白可溶性表达比活力温度稳定性
- 不同来源脂肪酶基因克隆、表达及其酵母表面展示的研究
- 脂肪酶(LIPASE，EC3.1.1.3)因其广泛的工业应用价值而倍受人们关注，它广泛存在于动物组织、植物种子和微生物体中。本实验室已经将脂肪酶成功应用于乳酸乙基糖苷酯(ETHYLGLUCOSIDELACTATE)、乳酸...
- 江正兵
- 关键词：脂肪酶基因克隆基因表达
- 文献传递网络资源链接
- 新型脂肪酶LipB52催化生物柴油被引量：12
- 2008年
- 一种来源于荧光假单胞菌的新型脂肪酶基因lipB52在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,并且利用Ni-NTA亲和柱对脂肪酶LipB52进行纯化。采用固定化脂肪酶LipB52催化大豆油与甲醇的转酯反应生产生物柴油。实验考察了温度、底物摩尔比、酶用量、有机溶剂、酶的种类以及油的类型对于反应的影响,结果表明:转酯反应的最佳反应条件为:m(酶)∶m(油)=20∶80,n(油)∶n(甲醇)=1∶4、正庚烷作为溶剂、反应温度为30℃,在此条件下脂肪酶LipB52表现出很高的催化活性,反应40 h后甲酯的产率高达92%。
- 王刚罗宇江正兵魏东芝马昱澍
- 关键词：生物柴油脂肪酶荧光假单胞菌转酯反应
- 酿酒酵母表面展示脂肪酶LipB52的酶学性质被引量：3
- 2007年
- 酿酒酵母表面展示脂肪酶重组菌株EBY100-pLHJ026在含半乳糖(20 g/L)的YNB-CAA培养基中进行诱导表达,脂肪酶在诱导48 h时酶活达到最高。以不同碳链长度的对硝基苯酚酯为底物对全细胞酶活进行性质检测,结果表明:对硝基苯酚癸酸酯(C10)为最适反应底物;全细胞脂肪酶在pH 8.0时的最适反应温度为37℃,在60℃保温2 h酶活保持90%,在60℃保温3 h酶活保持55%,表现出较好的热稳定性。在等体积二甲基亚砜中处理3 h后酶活保持28.4%。
- 戴斐张雍容江正兵魏东芝
- 关键词：酿酒酵母脂肪酶全细胞催化
- 褐黄孢链霉菌HBJ591纳他霉素高效发酵工艺研究
- 2012年
- 本文以褐黄孢链霉菌HBJ591为基础,研究了补糖工艺对纳他霉素发酵的影响,结合发酵培养基的优化,实现了纳他霉素的高产发酵。结果表明,维持发酵罐中还原糖浓度为2.5%,能有效延长纳他霉素的合成时间。通过响应曲面法对褐黄孢链霉菌HBJ591菌株的发酵培养基进行优化后,结合补糖工艺,在16 L发酵罐中进行补料分批发酵,纳他霉素的发酵水平达到15.7 g/L,比原始发酵工艺的效价提高4.8倍。
- 宋慧婷邓锐江正兵
- 关键词：纳他霉素响应曲面法补料发酵
- 基于定向进化提高漆酶的催化活性及其在造纸制浆中的应用被引量：1
- 2025年
- 在造纸工业中,漆酶作为一种生物催化剂,已经被广泛研究和应用。然而,天然漆酶在工业应用中存在着催化效率低、稳定性差等问题,限制了其在制浆工艺中的应用。为了进一步开发出酶活性高,耐受性强的漆酶,本研究对短小芽孢杆菌属来源漆酶进行定向进化改造,利用高通量筛选方法从随机突变体文库中筛选得到突变体F282L/F306L、Q275P,其比酶活分别为280.87 U/mg、453.94 U/mg,是野生型漆酶的1.42倍、2.30倍;突变体Q275P的温度稳定性有明显提升,其在40、50、70℃孵育4 h后的剩余酶活与野生型漆酶相比均提高了20%以上;突变体F282L/F306L和Q275P相较野生型漆酶对多种金属离子和有机溶剂的耐受性增强。野生型漆酶的Km值为374.97μmol/L,突变体F282L/F306L和Q275P的Km值分别减小至318.96μmo/L和360.71μmo/L,底物亲和性有所提高;F282L/F306L和Q275P对底物2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]的kcat值分别为574.00 s^(-1)、898.03 s^(-1),分别是野生型漆酶的1.1倍和1.7倍,催化效率较高。在处理纸浆应用中,突变体Q275P处理纸浆效果最好,相比于野生型漆酶,卡伯值降低了0.82,白度提高了2.00%ISO,抗张指数和裂断长分别提高7.8%和7.2%。本研究为漆酶更好地适应造纸工业环境奠定了基础。
- 倪红杨凡王磊李变霞李华南刘家书江正兵江正兵
- 关键词：漆酶生物漂白定向进化酶学特性纸浆
- 全细胞脂肪酶(菌)对SBR系统中微生物群落演替的影响
- 2014年
- 将具有油脂污水处理功能的全细胞脂肪酶(菌)制剂,直接加入到SBR系统的活性污泥中,应用PCR-DGGE技术的应用,研究该制剂对活性污泥中微生物群落演替的影响。16S rDNA DGGE图谱表明投加全细胞脂肪酶(菌)制剂72h后,菌群丰富度Rs为57%、与空白组的48%相比变化不明显,不同样品相似性系数Cs在48.1%~74.4%之间,表明投加全细胞脂肪酶(菌)对活性污泥中原核微生物群落的演替没有明显影响。18S rDNA DGGE图谱表明,投加全细胞脂肪酶(菌)制剂72 h后,菌群丰富度Rs为72%、与空白组的22%相比存在显著性的差异,不同样品相似性系数Cs在14.5%~73.7%之间,而且优势菌体也发生动态变化,表明投加全细胞脂肪酶(菌)后,对活性污泥中的真核微生物群落演替影响明显。
- 冷欢周莉刘家书李谞赵勇江正兵宋慧婷
- 关键词：活性污泥演替DGGE
- 生物酶理性改造与高效发酵关键技术及应用
- 江正兵宋慧婷张鲁嘉高蓓马向东王大春张菁顾爱玲陶纯长
- 技术领域：针对高热稳定、高活性饲料酶的改造技术开展研究，属于现代农业领域。 主要内容、特点：在省科技厅、科技部项目支持下，研发高效发酵工艺、酶分子理性设计及规模化改造技术，突破了酶制剂在饲料行业中低成本应用的瓶颈。 1、...
- 关键词：
- 关键词：生物酶发酵工艺饲料酶
- 脂肪酶的开发与应用
- @@脂肪酶以其来源广泛、催化功能多的优势已成为工业生物催化领域中应用最广的一类酶。近年来，随着工业生物技术的飞速发展，脂肪酶的需求量越来越大，可是我国的脂肪酶市场主要由国外的诺维信、杰能科等公司垄断，缺乏具有自主知识产权...
- 苏二正江正兵高蓓魏东芝
- 关键词：脂肪酶工业生物技术生物催化
- 文献传递
