- 重组鼠β－防御素3多肽及其制备方法与用途
- 本发明通过基因工程技术构建鼠β－防御素3基因(Mbd－3)的原核重组质粒，将原核重组质粒转入工程菌进行诱导高效表达鼠β－防御素3多肽(MBD－3)并进行表达产物的提取、纯化和凝血酶酶切释放出有活性的MBD－3成熟肽。本发...
- 李明远江滟李婉宜王月玲巩天祥王保宁杨远王欢蒋忠华
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- 重组鼠β-防御素3多肽及其制备方法与用途
- 本发明通过基因工程技术构建鼠β-防御素3基因(Mbd-3)的原核重组质粒，将原核重组质粒转入工程菌进行诱导高效表达鼠β-防御素3多肽(MBD-3)并进行表达产物的提取、纯化和凝血酶酶切释放出有活性的MBD-3成熟肽。本发...
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- 鼠β－防御素1的重组质粒、多肽及其用途与制备方法
- 本发明通过基因工程技术构建鼠β－防御素1基因(mBD－1)的原核重组质粒和真核重组质粒，将原核重组质粒转入工程菌进行诱导高效表达鼠β－防御素1多肽(mBD－1)并进行表达产物的提取、纯化和肠激酶酶切释放出成熟有活性的mB...
- 李明远王月玲李婉宜江滟巩天祥杨远王保宁李虹李燕杨伟民冯艳
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- mBD1-mBD3融合基因真核表达载体构建及体外抗流感病毒初步研究
- 2009年
- 目的构建小鼠β-防御素1和β-防御素3(mBD1,mBD3)融合基因的真核表达载体,研究mBD1-mBD3融合蛋白的抗流感病毒作用。方法通过RT-PCR和重建PCR方法构建mBD1-mBD3融合基因;经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后插入相同酶切的pcDNA3.1(+),构建成重组质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-mBD3,对重组质粒进行PCR、酶切和测序鉴定;将构建好的真核表达载体转染MDCK细胞,G418筛选稳定表达株,RT-PCR和免疫荧光染色法鉴定胞内mBD1-mBD3的表达。用流感病毒感染稳定表达细胞株,TCID50测定并分析抗流感病毒作用。结果成功克隆到mBD1-mBD3基因,并构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)/mBD1-mBD3。RT-PCR和间接免疫荧光证实重组质粒可以在细胞内表达。实验组的TCID50显著高于对照组,初步显示出mBD1-mBD3的抗流感病毒作用。结论本研究成功构建了pcDNA3.1(+)/mBD1-mBD3真核表达载体,且能在MDCK细胞中稳定表达,表达产物具有一定的抗流感病毒作用。为进一步深入研究mBD1-mBD3的生物学特性及其抗流感病毒作用机制奠定了基础。
- 冯艳王月玲李明远江滟李婉宜杨远王保宁冯伟张强蒋忠华
- 关键词：真核表达免疫荧光TCID50
- 鼠β-防御素1的重组质粒、多肽及其用途与制备方法
- 本发明通过基因工程技术构建鼠β-防御素1基因(mBD-1)的原核重组质粒和真核重组质粒，将原核重组质粒转入工程菌进行诱导高效表达鼠β-防御素1多肽(mBD-1)并进行表达产物的提取、纯化和肠激酶酶切释放出成熟有活性的mB...
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