王浩毅
- 作品数：10 被引量：169H指数：5
- 供职机构：郑州大学基础医学院病理生理学系更多>>
- 发文基金：四川省自然科学基金美国中华医学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 缺氧诱导因子-1与心肌对缺氧的适应被引量：1
- 2004年
- 缺氧诱导因子 1是在体内广泛存在的核内转录因子 ,有两个亚基。HIF 1是细胞在缺氧条件下产生的核蛋白 ,它与靶基因结合后可调节多种基因如内皮素、血管内皮生长因子、诱导型一氧化氮合酶等的表达 ,促进机体对缺氧产生一系列的适应反应。其活性的维持对心脏的发育以及对心肌在缺血缺氧性疾病中的代偿起着重要作用。对HIF
- 王浩毅郭志英王树人
- 关键词：缺氧诱导因子-1心肌缺氧心肌细胞靶基因基因调控
- 氧化应激状态的评价被引量：103
- 2005年
- 机体代谢过程中活性氧不断地通过非酶促反应和酶促反应产生,每日约有1%-3%的摄入氧转变为超氧阴离子(superoxide anion,O2)及其活性衍生物,但在抗氧化酶以及外源性和内源性抗氧化剂的协同作用下被不断清除,在生理情况下, ROS的生成与清除处于动态平衡, 活性氧可维持于有利无害的极低水平.由于内源性和(或)外源性刺激使机体代谢异常而骤然产生大量活性氧自由基,或机体抗氧化物质不足,使促氧化剂/抗氧化剂间平衡失常,则使机体处于氧化应激状态,可氧化损伤生物分子,并进一步引起细胞死亡和组织损伤,与很多病理过程相关.
- 王秋林王浩毅王树人
- 关键词：应激
- 婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC自杀基因系统对黑色素瘤的抑瘤实验被引量：13
- 2005年
- 目的 观察婴儿双歧杆菌介导的胞嘧啶脱氨酶 / 5 -氟胞嘧啶 (CD/ 5 - FC)自杀基因系统对黑色素瘤的体内、外抑瘤效果。方法 含重组 CD基因的婴儿双歧杆菌中加入 5 - FC,厌氧条件下培养 2 4 h后取其上清液 ,加到黑色素瘤 B16 - F10细胞上 ,观察其对细胞形态及细胞生长抑制率的影响 ;建立小鼠黑色素瘤动物模型 ,尾静脉注入含重组 CD基因的婴儿双歧杆菌 ,腹腔注入 5 - FC,观察携带重组 CD基因的婴儿双歧杆菌联合 5 - FC对黑色素瘤肿瘤体积及肿瘤体积倍增时间的影响。结果 1体外实验 :实验组肿瘤细胞形态显示出显著的损伤性改变 ,细胞生长受到明显抑制 ,而对照组肿瘤细胞影响不大。 2小鼠黑色素瘤动物模型实验结果显示 ,经重组婴儿双歧杆菌联合 5 -FC治疗 2 1d,实验组肿瘤倍增时间明显长于对照组 ,其肿瘤体积明显小于对照组 ,且随着观察时间的延长 ,这种差异越显著。结论 婴儿双歧杆菌介导的 CD/ 5 - FC自杀基因系统对黑色素瘤具有明显的抑瘤效果。
- 易成郭志英黄英王浩毅王树人
- 关键词：婴儿双歧杆菌胞嘧啶脱氨酶5-氟胞嘧啶
- 成都地区青年人群中血浆和红细胞还原/氧化型谷胱甘肽的含量及其氧化-还原电位的分布被引量：1
- 2004年
- 目的 :测量谷胱甘肽还原型和氧化型在血浆内和红细胞内的含量 ,探讨GSH/GSSG及其氧化还原电位在健康人群的分布情况。方法 :在组织内谷胱甘肽荧光测量法的基础上 ,加以改进 ,对血浆和红细胞内的GSH/GSSG进行测定 ,并计算出GSH/GSSH的氧化还原电位。同时 ,探讨了冷冻保存和去蛋白处理对血浆和红细胞内GSH和GSSG的影响。结果 :改进后的方法具重复性好 ;准确性高 ,回收率在 98.7%和 97.5 % ;标准曲线呈明显线性等良好的测定效率。用本法对 42名年青年健康志愿者的新鲜血浆和红细胞液的谷胱甘肽进行测定 ,结果为 :血浆内GSH的范围为 8.64± 1 .40 μmol/L ,GSSG的范围为 1 .0 8± 0 .2 4μmol/L ,GSH/GSSG的比值为1 0 .2 7± 1 .5 4;红细胞内GSH的范围为 6.81± 1 .3 8μmol/LRBC ,红细胞内GSSG的范围为 0 .77± 0 .3 9μmol/LR BC ,GSH/GSSG的比值为 9.0 2± 3 .61。血浆GSH/GSSG的氧化还原电位为Eh =-2 1 3 .9mV± 4.94mV ;RBC液的Eh =-2 2 1 .4mV± 3 .1 6mV ,血浆内和红细胞内的GSH/GSSG比值以及电位值都呈正态分布。血浆和红细胞在 -80℃条件下保存后对GSH和GSSG的测定有一定影响 (p <0 .0 5 )。结论 :本文建立的GSH/GSSG测定方法具有良好的重复性、准确性 ;
- 王浩毅王秋林乔小蓉郭志英王树人
- 关键词：青年人群红细胞内健康志愿者RBC新鲜血浆
- 血浆中游离还原型及氧化型谷胱甘肽的荧光测定法被引量：14
- 2005年
- 文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧光分光光度仪测定其荧光值,从而对GSH和GSSG进行定量分析。并运用此方法测量青年健康志愿者静脉血中的游离GSH和GSSG。该法最低可检测出测定管中11.4 pmol.L-1GSH以及5.7 pmol.L-1GSSG。测量GSH批内和批间变异系数分别4.6%和3.9%,GSSG批内和批间变异系数分别为3.5%和4.1%,GSH,GSSG加标准品后的回收率分别为(99.77±5.70)%和(99.28±4.73)%。测定健康青年志愿者血浆中游离GSH,GSSG的含量分别为(16.5±2.4)nmol.mL-1和(1.7±0.35)nmol.mL-1。
- 王秋林王浩毅丁怡乔小蓉彭克军林霞王树人
- 关键词：血浆GSHGSSG荧光测定法
- 血清氧化-还原态的监测及其与细胞损伤的关系被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨如何评价体内的氧化还原状态及细胞的氧化还原态改变对细胞增殖、凋亡、损伤等的影响。方法 :测定正常人血清的NADPH/NADP+ 和GSH/GSSG比值 ,以了解该两项指标对机体氧化还原态的监测能力。并在培养的内皮细胞中加入各种浓度的氧化剂过氧化氢 (H2 O2 )和 /或还原剂N 乙酰 L 半胱氨酸(NAC) ,观察NADPH/NADP+ 和GSH/GSSG比值的变化与细胞活力及损伤之间的关系。以LDH释放率 ,细胞培养液中脂质过氧化物 (LPO)的浓度 ,细胞增殖活性、细胞凋亡率 ,观察细胞的增殖、损伤及其与氧化 还原态变化的关系。结果 :①在培养的内皮细胞中加入H2 O2 后 ,GSH/GSSG和NADPH/NADP+ 比值明显降低 ,细胞氧化还原状态偏向氧化应激方向 ,细胞出现氧化应激损伤 ;脂质过氧化物 (LPO)生成增多 ;LDH释放率增加 ;细胞增殖活力下降 ;凋亡率增高。氧化应激性损伤程度与GSH/GSSG和NADPH/NADP+ 比值呈负相关 ( p <0 .0 5 )。②在各浓度H2 O2 组中加入 0 .5mmol·L 1NAC ,GSH/GSSG和NADPH/NADP+ 比值恢复至接近对照组 ,上述氧化应激性损害也受到了不同程度的抑制 ,并在一定范围内呈量效关系。③单独加入NAC ,在高浓度NAC1mmol·L 1M和 2mmol·L 1时 ,GSH/GSSG和NADPH/NADP+ 比值明显升高 (VSControl,p <0 .0 1 ) 。
- 乔小蓉张静郑海霞王浩毅王树人
- 关键词：细胞损伤N-乙酰-L-半胱氨酸氧化还原状态细胞增殖活性细胞增殖活力细胞凋亡率
- 婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建被引量：26
- 2004年
- 目的 构建婴儿双歧杆菌 /胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统。方法 PCR扩增胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因 ,TSS法在大肠杆菌JM 10 9中扩增 pGEX 1LambdaT质粒 ,EcoRⅠ和BamHⅠ对CD基因和pGEX 1LambdaT质粒分别进行双酶酶切。琼脂糖电泳凝胶分离并切取其中 4.9kb和 1.3kb两个片段长度的凝胶。凝胶DNA提取试剂盒提取其中所含的DNA片段 ,T4DNA连接酶连接这两个片段 ,最后用电穿孔法将重组片段转染婴儿双歧杆菌 ,并挑选阳性菌落 ,提取质粒双酶切后进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果 应用电穿孔法转染婴儿双歧杆菌 ,获得含 6.2kbp重组质粒的阳性转染婴儿双歧杆菌。 结论 成功构建婴儿双歧杆菌 /胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统。
- 郭志英易成王树人王浩毅
- 关键词：婴儿双歧杆菌胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统抗癌药5-氟胞嘧啶
- 氧化抗氧化失衡与动脉粥样硬化被引量：7
- 2007年
- 目的探讨氧化抗氧化失衡与动脉粥样硬化的关系。方法对采用高分辨超声检测技术筛选出的79例颈总动脉斑块形成患者(A组)、52例内膜中层增厚患者(B组)和36例内膜中层厚度正常患者(C组)进行静脉血浆还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)与氧化型辅酶Ⅱ(NADP+)、氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)和丙二醛(MDA)检测。结果A组与B组相比,B组与C组相比,GSH、GSH/GSSG减低(P<0.05),GSSG、GSH/GSSG氧化还原电位升高(P<0.05);A组与C组相比,NADPH、NADH/NADP+减低(P<0.05),NADPH/NADP+氧化还原电位升高(P<0.05);A组与B组相比,B组与C组相比,oxLDL、MDA增加(P<0.05);GSH/GSSG氧化还原电位与oxLDL呈正相关(r=0.817,P<0.001),随着动脉内膜增厚斑块形成,氧化还原电位逐渐升高,向氧化方向偏移。结论动脉粥样硬化与氧化还原态失衡向氧化方向偏移相关。
- 黄彦生王树人智艳芳王浩毅许波实
- 关键词：动脉粥样硬化
- 基因导向性酶前体药物疗法在肿瘤治疗中的研究进展被引量：4
- 2003年
- 基因导向性酶前体药物疗法 (GDEPT)为肿瘤生物治疗最引人注目的研究领域 ,是继手术、放疗和化疗等传统疗法之后 ,一种具有良好应用前景的肿瘤治疗新措施 ,主要包括HSV tk GCV系统疗法和CD 5 FC系统疗法。为克服传统GDEPT疗法的不足 ,目前多主张联合基因治疗肿瘤 ,有人还提出一种全新的GDEPT疗法。现综述近几年来GDEPT在肿瘤基因治疗中的研究进展。
- 郭志英王浩毅王树人
- 关键词：肿瘤旁观者效应
- 体液氧化-还原态检测指标的确立及健康人群氧化-还原态正常值范围初探
- 机体需要一个相对恒定的氧化-还原态(Redox Status),如同机体需要一个相对恒定的pH值一样,偏离该平衡态将会对机体造成损伤.但以何种指标来监测体液的氧化-还原态?健康人群是否有一相对恒定的氧化-还原态的范围(即...
- 王浩毅
- 关键词：正常值范围
- 文献传递
