王灿
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 大鼠1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白的原核表达及纯化
- 2011年
- 目的原核表达并纯化大鼠1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合(1,25D3-Membrane associated rapid re-sponse steroid binding,1,25D3-MARRS)蛋白。方法经RT-PCR扩增大鼠1,25D3-MARRS基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白,并进行Western blot鉴定。结果重组原核表达质粒pET-32a-1,25D3-MARRS经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为77 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%;纯化的重组蛋白纯度达90%以上,且具有良好的反应原性。结论已成功表达并纯化了重组1,25D3-MARRS蛋白,为进一步研究其性质、功能及分布特点奠定了基础。
- 徐静张振书王灿刘富强白岚
- 关键词：原核细胞
