田凤艳
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划卫生部临床学科重点项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- McCune-Albright综合征1例诊治及基因突变分析被引量：5
- 2010年
- 目的分析1例McCune-Albright综合征患者的临床特点、诊治及基因突变,提高对本病的认识。方法对1例以阴道出血和双乳增大为初诊表现的女童,进行体格检查,分析及完善其各项检验结果包括促性腺激素释放激素(GnRH)刺激试验、骨龄检查、X线片及子宫卵巢B超等。提取患儿及其父母外周血白细胞基因组DNA,PCR扩增鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α亚基基因(GNAS1)8、9号外显子及侧翼序列后测序,确定是否存在突变位点。应用选择性雌激素受体调节剂他莫昔芬治疗。结果患儿外周血基因突变分析结果为阴性,但根据该病例出现的典型纤维性骨发育不良、皮肤咖啡牛奶色素斑和非促性腺激素依赖性性早熟特征确诊为McCune-Albright综合征。他莫昔芬治疗1a,不能有效抑制其生长发育和骨龄的迅速进展及雌激素水平(黄体生成素、卵泡刺激素、雌二醇),子宫卵巢稍增大,且下肢长骨病变进一步恶化。结论McCune-Albright综合征的诊断以临床特征为主要依据,外周血GNAS1基因突变分析结果为阴性不能排除其余组织突变的存在。如能获取病变部位组织如病损骨、色素沉着皮肤等DNA样本进行基因分析,可能对诊断有一定的帮助。临床中出现非促性腺激素依赖性性早熟时应想到本病的可能,否则可能误诊或漏诊。他莫昔芬治疗对该患儿无效,应考虑换用其他类型药物如芳香化酶抑制剂等。
- 易琴田凤艳魏虹梁雁罗小平
- 关键词：MCCUNE-ALBRIGHT综合征他莫昔芬
- 大鼠原代皮质神经元无血清培养的影响因素及优化培养方法被引量：6
- 2010年
- 目的探讨大鼠原代皮质神经元无血清培养的影响因素及优化培养方法。方法采用原代神经元无血清培养,按胎鼠、24 h新生鼠、5 d新生鼠及不同取材环境温度(20℃、30℃)下胰蛋白酶消化0 min、5 min、15 min进行分组。应用锥虫蓝拒染法检测接种时神经元存活率,神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织细胞化学染色法检测各组所得神经元纯度,倒置显微镜动态观察各组神经元形态变化。结果胎鼠组和24 h新生鼠组原代神经元状态良好,2组细胞纯度[(91.30±1.03)%、(89.50±1.78)%]和存活率[(98.20±0.58)%、(97.10±0.98)%]比较差异均无统计学意义;5 d新生鼠组神经元纯度为(82.00±1.25)%,存活率为(92.87±1.56)%,均低于胎鼠和24 h新生鼠组(Pa<0.05)。缩短取材操作时间,结合环境温度适当调整消化时间可提高神经元细胞纯度和细胞活性:环境温度20℃,消化15 min,30℃消化5 min,细胞存活率最高,分别为(98.20±0.58)%、(96.70±0.64)%。结论 24 h新生鼠原代神经元无血清培养操作性强、省时,优化神经元培养过程影响因素(温度、消化时间等)可提高神经元细胞的纯度和存活率。
- 田凤艳宁琴罗小平
- 关键词：原代培养皮质神经元
- 氢化可的松治疗先天性肾上腺皮质增生症用药方式探讨被引量：6
- 2010年
- 目的了解不同的用药方式对先天性肾上腺皮质增生症(CAH)患儿生长速率及骨龄进展的影响,为选择一种较好的用药方式提供依据。方法对2005—2009年在武汉同济医院儿科遗传代谢内分泌专科门诊就诊的18例CAH患儿(男9例,女9例)进行回顾性分析。根据氢化可的松用药方式不同分为A组(自2007年5月开始用药,用药方式为新方式,即每天用药3次,早8时和下午4时均服用全天总量的1/4,晚10时左右服用全天总量的1/2。)和B组(用药为2007年5月前用旧方式而2007年5月后改用新方式,旧方式即全天总量分2次或1次服用),B组又根据前后用药方式的改变分为B1组(旧方式组)和B2组(新方式组),分别比较A组和B1组、B1组和B2组年生长速率(GV)、身高年龄增长(ΔHA)、ΔHA与骨龄增长(ΔBA)间的关系(ΔHA/ΔBA)以及骨龄变化与实际年龄变化的比值(ΔBA/ΔCA)的差异。结果 A组和B1组、B2组和B1组相比,△BA/△CA的值均显著降低(P<0.05),ΔHA与ΔHA/ΔBA的值差异均无统计学意义(P>0.05)。A组和B1组的GV差异无统计学意义(P>0.05),但B2组和B1组相比,GV显著降低(P<0.05)。结论患儿以新方式用药在抑制骨龄进展和保持正常生长方面明显优于旧方式,新方式用药可增加患儿身高增长空间,提高患儿终身高。
- 易琴田凤艳余肖魏虹梁雁罗小平
- 关键词：先天性肾上腺皮质增生症骨龄
- 戊二酸致原代培养纹状体神经元神经毒性的体外研究
- 2011年
- 目的探讨戊二酸（GA）干预体外培养纹状体神经元致神经元损伤的浓度和时间及其损伤机制。方法体外培养新生大鼠纹状体神经元,于体外培养7 d行神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染色鉴定神经元纯度。纯度达90%以上,用不同浓度GA（1~50 mmo·lL-1）孵育体外培养10 d的纹状体神经元24~96 h。倒置显微镜及赫斯特荧光染料33342（-/＋）荧光活细胞染色后荧光显微镜观察神经元形态变化;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色（MTT）法检测细胞线粒体功能变化;膜联蛋白-V碘/化丙啶双染流式细胞仪检测判断GA诱导纹状体神经元凋亡率及死亡率;实时定量反转录（RT）-PCR及Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸酶（Caspase）-3、Caspase-9表达。结果 GA处理组细胞线粒体功能受损程度呈浓度及时间依赖性改变：随着GA浓度升高,干预时间延长,神经元损伤加重。与正常对照组比较,10 mmo·lL-1、25 mmo·lL-1、50 mmo·lL-1组GA干预24~72 h纹状体神经元活力均比正常对照组显著增高（P〈0.05）;1 mmo·lL-1组干预72 h、96 h与正常对照组比较均明显升高（Pa〈0.01）。50 mmo·lL-1组孵育72 h较孵育48 h细胞凋亡显著增加[（87.63±9.17）%vs（40.90±4.10）%,P〈0.01];25 mmo·lL-1组孵育72 h凋亡率为（24.73±2.95）%。10 mmo·lL-1、25 mmo·lL-1、50 mmo.lL-1GA作用神经元1 h、6 h,Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达明显增加,25 mmo·lL-1、50 mmo·lL-1GA处理24 h后神经元Caspase-9、Caspase-3蛋白活化片段增加。结论 GA致纹状体神经元损伤呈浓度-时间依赖性,通过Caspase-9/Caspase-3途径诱导纹状体神经元凋亡,该机制可能与GA血症Ⅰ型大鼠纹状体退行性变有关。
- 田凤艳宁琴罗小平
- 关键词：原代培养神经毒性
