赵松波
- 作品数:10 被引量:14H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 产单核细胞李氏杆菌溶血素基因的克隆与表达
- 李氏杆菌病是由单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes,LMO)引起的一种人畜共患的急性、致死率较高的传染病,李氏杆菌溶血素(ListeriolysinO,LLO)是重要的毒力因子。本文用PCR...
- 赵松波
- 关键词:单核细胞增多性ELISA法基因克隆
- 文献传递
- 重组毕赤酵母的高密度发酵工艺
- 本发明公开一种重组毕赤酵母高密度发酵工艺,特别是采用全自动控制发酵罐进行发酵的工艺。本发明的工艺方法是将工作种子接种于BSM培养基中,培养温度为28℃,并进行搅拌,加氨水或磷酸控制发酵体系的pH值为4.8,罐压为0.8个...
- 才学鹏侯俊玲王颖骆学农景志忠丁军涛张少华郑亚东赵松波巩伟
- 文献传递
- 李氏杆菌病疫苗及制备方法
- 本发明涉及一种疫苗及这种疫苗的制备方法,确切讲是李氏杆菌疫苗及制备方法。本发明涉及的疫苗由P60蛋白100μg,10<Sup>9</Sup>个李氏杆菌灭活菌及与抗原等体积的佐剂构成。本发明所用的P60为重组蛋白。
- 骆学农才学鹏周邦信张少华赵松波巩伟
- 猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组蛋白快速诊断试纸条研制被引量:9
- 2009年
- 目的以猪带绦虫六钩蚴重组蛋白(TSOL18)为抗原,建立一种简便快速的猪囊虫抗体检测方法,评价其血清学诊断的价值。方法用胶体金颗粒标记纯化的TSOL18重组蛋白,将兔抗TSOL18-GST-IgG和TSOL18重组抗原分别喷涂于硝酸纤维素膜的质控线和检测线上,与PVC垫板等部件按顺序装配成猪囊虫抗体快速检测试纸条;用该试纸条检测猪血清样品测定敏感性和特异性。结果该试纸条与全囊虫抗原ELISA的相对敏感性和特异性分别为75.0%(12/16)和95.2%(40/42),与剖检计数法的相对敏感性达80.0%(12/15)。试纸条在4℃存放12个月,检测结果稳定,重复性好。结论基于TSOL18建立的胶体金免疫层析试纸条操作简单、快速敏感、稳定性好,可用于猪囊虫病感染的诊断和筛查。
- 张少华骆学农郑亚东李克生景志忠蒋韬赵松波才学鹏
- 关键词:猪囊虫病胶体金试纸条
- 重组毕赤酵母的高密度发酵工艺
- 本发明公开一种重组毕赤酵母高密度发酵工艺,特别是采用全自动控制发酵罐进行发酵的工艺。本发明的工艺方法是将工作种子接种于BSM培养基中,培养温度为28℃,并进行搅拌,加氨水或磷酸控制发酵体系的pH值为4.8,罐压为0.8个...
- 才学鹏侯俊玲王颖骆学农丁军涛张少华郑亚东赵松波
- 文献传递
- 猪囊尾蚴rTS-CC18蛋白的原核表达、纯化及其抗原性分析被引量:1
- 2009年
- 目的制备猪带绦虫囊尾蚴rTS-CC18抗原并对其抗原性进行鉴定,为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。方法用PCR方法从重组质粒pGEM-TS-CC18中扩增TS-CC18编码基因,构建pET30a-TS-CC18重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高表达量菌株。采用Ni-FF亲和层析方法提纯表达蛋白。Western blotting及间接ELISA检测重组蛋白的反应活性。结果Tricine-SDS-PAGE表明,重组菌经0.5 mmol/LIPTG诱导6 h,可稳定表达可溶性rTS-CC18蛋白,其相对分子质量约16×103。Western blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应;间接ELISA检测血清抗体结果表明:纯化的rTS-CC18蛋白与全囊虫抗原的相对特异性达100.0%,相对敏感性达84.0%,总符合率为94.3%。结论成功制备了猪囊尾蚴rTS-CC18抗原,其特异性、敏感性及稳定性良好,对诊断猪囊尾蚴病及开发诊断制剂具有潜在应用价值。
- 张少华才学鹏贾万忠骆学农刘红霞赵松波景志忠
- 关键词:猪囊尾蚴原核表达纯化抗原性
- 猪囊尾蚴TS-CC18蛋白的原核表达及其血清学检测效果评价
- 目的制备猪带绦虫囊尾蚴TS-CC18重组抗原并对其生物学活性进行鉴定,为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。方法PCR扩增获得TS-CC18编码基因,构建pET30a-TS-CC18重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE...
- 张少华才学鹏贾万忠骆学农郑亚东景志忠刘红霞赵松波
- 关键词:猪囊尾蚴ELISA检测
- 文献传递
- 重组产单核细胞李斯特菌溶血素的应用研究
- 2010年
- 李氏杆菌溶血素(Listeriolysin,LLO)是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,为探索LLO的免疫保护性和作为诊断抗原的可行性,本研究用重组LLO抗原和单核细胞增多性李氏杆菌(Listeria monocytogenes,LM)全菌分别免疫BALB/c小鼠和家兔,定期采血,ELISA检测抗LLO的抗体水平,并分别对免疫和对照动物攻毒致死剂量的LM,分析重组LLO抗原的免疫保护性。结果表明,小鼠和家兔在二免后10-20 d内LLO的抗体即可达到峰值,而且免疫动物能有效抵抗LM的感染。因此,重组LLO不仅可以用作动物LM的诊断抗原,而且具有作为基因工程疫苗的潜力。
- 赵松波张少华周邦信窦永喜孙晓林骆学农
- 关键词:ELISA免疫
- 李氏杆菌病疫苗及制备方法
- 本发明涉及一种疫苗及这种疫苗的制备方法,确切讲是李氏杆菌疫苗及制备方法。本发明涉及的疫苗由P60蛋白100μg,10<Sup>9</Sup>个李氏杆菌灭活菌及与抗原等体积的佐剂构成。本发明所用的P60为重组蛋白。
- 骆学农才学鹏周邦信张少华赵松波巩伟
- 文献传递
- 产单核细胞李斯特菌溶血素O基因在大肠杆菌中的优化表达及ELISA检测方法的建立被引量:3
- 2009年
- 在克隆产单核细胞李斯特菌(LMO)hlyA基因并构建其原核表达载体的基础上,进一步对IPTG浓度、诱导时间、诱导温度等影响目的蛋白表达的重要条件进行了优化。根据确定的最佳诱导条件,使目的蛋白获得了高效表达。对表达的李斯特菌溶血素O(LLO)进行了纯化,以其作为靶抗原,采用间接ELISA方法检测了动物血清中的特异性LLO抗体。结果表明,用表达产物作为靶抗原可对LMO感染动物进行初步诊断,为建立基于LLO的动物李斯特菌病血清学诊断技术奠定了基础。
- 赵松波孙晓林张少华周邦信窦永喜骆学农
- 关键词:产单核细胞李斯特菌纯化酶联免疫吸附试验