都同功
- 作品数：10 被引量：83H指数：6
- 供职机构：中山医科大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 转基因显微注射的剂量控制与效果分析被引量：17
- 1998年
- 为了分析转基因显微注射的注射剂量对胚胎发育效果的影响，用尖端直径为０．５～１．０ｕｍ的显微注射针在不同气压和不同时间的条件下进行微注射测试，并对１３３枚小鼠受精卵分别注射不同剂量，观察注射后胚胎发充情况。实验采用的气压电控式显微注射器，具有注射时间短（ｍｓｅｃ），注射的可控性和可重复性好的特点，在相同条件下重复注射时，误差小于０．００４ｐｌ。结果表明，小鼠受精卵原核内注射剂量在２～４ｐｌ时，胚胎体外发育不受影响，当大于１０ｐｌ时，胚胎在注射后１ｈ内全部死亡，也证明了注射针尖端直径小于１．０ｕｍ时，导致细胞损伤和影响胚胎发育的主要因素是注射剂量的大小。因此，对于小鼠胚胎原核内注射剂量２～４ｐｌ是较为合适的“
- 李智俞生都同功黄冰陈系古
- 关键词：注射剂量原核显微注射转基因受精卵注射时间
- 全文增补中
- 绿色荧光蛋白基因gfp真核表达载体pcT K GFP的构建被引量：2
- 1999年
- 目的：构建携带绿色荧光蛋白基因（ｇｆｐ） 的真核表达载体ｐｃＴＫＧＦＰ，为利用绿色荧光蛋白标记在实验动物体内进行自杀性基因治疗的研究和转基因动物打靶载体的构建提供基因材料。方法：采用ＰＣＲ技术从商品质粒ｐＥＧＰＣ１ 中扩增出ｇｆｐ（７９９ ｂｐ），ＰＣＲ产物用ＸｂａⅠ和ＢａｍＨⅠ双酶切后定向克隆至真核表达载体ｐｃＴＫ，重组质粒ｐｃＴＫＧＦＰ用限制性内切酶和ＤＮＡ序列分析进行鉴定。结果：部分ＤＮＡ 序列分析证明ＰＣＲ产物为ｇｆｐ，成功筛选到携带ｇｆｐ 的真核表达载体ｐｃＴＫＧＦＰ。结论：ｐｃＴＫＧＦＰ真核表达载体的构建，为利用绿色荧光蛋白标记在实验动物体内进行自杀性基因治疗的研究和转基因动物打靶载体的构建奠定了基础。
- 刘彦文卢春彬林勇都同功黄冰陈系古
- 关键词：GFP基因治疗
- 小鼠胚胎干细胞的培养被引量：21
- 1999年
- ＥＳ细胞的培养应满足促进细胞增殖和抑制细胞分化而保持其高度未分化潜能。我们用胚胎成纤维细胞作为饲养层，培养基ＤＭＥＭ中加白血病抑制因子的方法来培养ＥＳ细胞。培养的ＥＳ细胞呈集落状生长，细胞排列紧密，呈未分化状态。胚胎成纤维细胞作为饲养层是分离培养ＥＳ细胞最普遍使用而且有效的方法。本文还围绕ＥＳ细胞培养中的促进增殖和抑制分化这两个方面的影响因素进行了讨论。
- 都同功陈系古刘兰英俞生钟女奇黄冰林学颜
- 关键词：ES细胞干细胞小鼠胚胎饲养层集落分化潜能DMEM
- HSV1-tk基因的部分DNA序列分析被引量：2
- 2000年
- 采用PCR技术从商品质粒pHSV10 6扩增出HSV1 tk基因 (112 8bp) ,PCR产物用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后定向克隆至真核表达载体pcDNA3,然后以重组质粒pcTK为模板 ,tk基因的 5′端引物为DNA测序引物进行部分DNA序列分析 .部分DNA序列分析证明PCR产物为HSV1 tk基因正确无误 ,成功筛选到HSV1 tk基因的真核表达载体pcTK 。
- 刘彦文钟女奇都同功黄冰陈系古
- 关键词：HSV1-TK基因治疗转基因动物克隆DNA序列分析
- 影响小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精效果的因素分析被引量：4
- 2001年
- 研究卵母细胞发育程度和不同营养因子对小鼠卵母细胞体外成熟及体外受精率的影响。小鼠卵母细胞分别在含有FSH、BSA和胰岛素的培养液中体外成熟 ,在Whitten氏液中体外受精 ,比较体外成熟率、体外受精率。卵丘卵母细胞 (COC)较裸卵 (DO)的体外成熟率、体外受精率都低。FSH和胰岛素均能提高小鼠卵母细胞的体外成熟率、体外受精率。BSA可以降低小鼠卵母细胞体外受精率。GV期卵母细胞的体外受精率显著低于体外培养的排出第一极体的卵母细胞。 (P2 -cell <0 0 5 ,P受精 <0 0 5)。
- 乌日琴邓新燕陈颖青都同功陈系古
- 关键词：体外成熟体外受精营养因子发育生物学
- 一种胚胎移植新方法的建立被引量：8
- 1999年
- 在转基因动物制作中胚胎移植是一个关键性技术。胚胎的输卵管移植相比子宫移植来说，可以避免在体外较长时间培养，但从输卵管伞部移植卵又常常不可避免地因囊膜开口而不同程度的出血，而且由于伞口部位置较隐蔽，移卵时技术难度大要求高。因此，我们尝试在囊膜外靠近壶腹部附近开口于输卵管，将卵直接移入壶腹部，卵移行至子宫发育。此技术非常简单易行，有助于提高转基因动物的制作效率。
- 都同功陈系古俞生李智黄冰林学颜
- 关键词：输卵管囊膜出血胚胎移植子宫种胚
- 小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精的效果观察被引量：8
- 1999年
- 目的 研究不同培养条件对小鼠卵母细胞体外成熟及体外受精率的影响。方法 小鼠卵母细胞分别在含有FSH、BSA和胰岛素的培养液中体外成熟,在Whitten 氏液中体外受精,比较体外成熟率、体外受精率。结果 1- 裸卵(DO) 的体外成熟率、体外受精率(81-4% ,31-0 % ) 均高于卵丘卵母细胞复合体(COC)(48-6 % ,27-1% ) 。2- 在培养液中添加FSH、胰岛素和BSA,卵母细胞的体外成熟率为77-9 % ,82-3% 、60-7% ;体外受精率为77-2 % 、72-6 % 、26-7% ;2 - 细胞率为49-2 % 、34-2 % 、10-0% 。胰岛素组的卵母细胞IVM 率最高,但IVF率、2 - 细胞率低于FSH 组。3- 添加BSA的两组的体外受精率只有26-7 % 、25-8 % ,显著低于其他组,其体外成熟率也较添加FSH 和胰岛素的组成。4- 排出第一极体(PbI) 的卵母细胞的体外受精率和2 - 细胞率(85-9 % ,22-4% ) 均高于GV期卵母细胞(71-1 % ,12-9 % ) 。结论 1- 卵丘卵母细胞(COC) 较裸卵(DO) 的体外成熟率、体外受精率都低,差异显著(P成熟< 0-01;P受精< 0-05) 。2-FSH 和胰岛素均能提高小鼠卵母细胞的体外成熟率、体外受精率。3-BSA可以降低小鼠卵母细胞体外受精率,差异极显著。4-GV 期卵母细胞的体外受精率显著低于体外培养的排出第一极体的卵母细胞(P2 - cell < 0-05,P受精<0-05)
- 乌日琴邓新燕陈颖青都同功陈系古
- 关键词：体外受精FSH体外成熟GVBSA
- 不同条件下培养小鼠胚胎干细胞被引量：16
- 2001年
- 都同功黄冰钟女奇邓新燕陈颖青陈系古
- 关键词：胚胎干细胞小鼠
- 基因打靶技术在转基因动物中的进展被引量：9
- 1997年
- 陈系古都同功
- 关键词：动物体内初发基因失活基因打靶技术基因导入
- 异种器官移植的新进展──转基因猪的出现
- 1997年
- 陈系古都同功
- 关键词：异种器官移植供体心脏移植免疫排斥转基因猪器官组织
