付秋霞
- 作品数：26 被引量：26H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向HCV IRES和NS3蛋白抑制剂筛选及评价小鼠模型的建立
- 丙型病毒性肝炎是一种严重危害人类健康的常见病和多发病。全球大约有1.7亿的人口感染丙型肝炎病毒/(Hepatitis C Virus，HCV/)。我国HCV感染者已达6000万。HCV急性感染后50-80％转变为慢性感染...
- 付秋霞
- 关键词：丙型病毒性肝炎NS3
- 文献传递
- 小动物分子影像技术在小鼠输注储存红细胞促进细菌感染监测中的应用被引量：1
- 2019年
- 目的:研究小动物分子影像技术在储存红细胞输注、促进细菌感染监测中的作用。方法:通过对小鼠尾静脉注射细菌200μl,感染每只实验小鼠,制备悬浮红细胞(RBCs),将400μlRBCs悬浮液通过异氟烷麻醉小鼠的眼后静脉丛输注。在细菌感染小鼠模型中采用小动物分子影像技术观察新鲜红细胞和储存红细胞输注后的促进细菌感染效应。结果:输注储存红细胞促进细菌在小鼠体内增殖,与输注新鲜红细胞相比,细菌荧光素酶活性增加50%,并降低小鼠的存活率,输注新鲜红细胞组24 h内小鼠死亡20%,输注储存红细胞组24 h内小鼠全部死亡。铁(Fe)促进大肠杆菌和铜绿假单胞菌的增殖。结论:小动物分子影像技术可用于可视化监测小鼠输注储存红细胞促进细菌感染的作用过程。
- 吴涛周俊陈震张秋丽晋晶付秋霞詹林盛
- 关键词：细菌感染分子成像
- 双荧光素酶标记丙型肝炎病毒亚基因组复制子细胞模型的建立被引量：2
- 2013年
- 目的构建双荧光素酶标记丙型肝炎病毒(HCV)亚基因组复制子细胞模型,为HCV研究提供有效工具。方法通过单克隆筛选及慢病毒感染构建双荧光素酶标记的HCV亚基因组复制子细胞模型(HCV Fluc-UbiGluc)。利用荧光素酶检测、Western印迹检测鉴定细胞模型,利用IFN-α对HCV抗病毒效果评价验证细胞模型的有效性。结果筛选所得HCV亚基因组细胞克隆检测到荧光素酶活性,Western印迹检测到HCV NS5A蛋白表达。NS3/4A对黄色荧光蛋白(YFP)标记的MAVS(YFP-MAVS)切割作用使亚细胞定位发生转移。IFN-α处理后荧光素酶活性、HCV蛋白表达水平明显降低。结论该模型采用萤火虫荧光素酶报告基因指示HCV亚基因组在细胞内的复制水平,Gaussia荧光素酶指示细胞的生长数量,能准确反映候选药物对HCV复制水平的影响,并有效排除药物的细胞毒性干扰,具有操作简单、快速等优点,在抗病毒药物高通量筛选、HCV致病机制等研究方面具有一定的价值。
- 彭剑淳高博王怡付秋霞樊炜周欠欠贾帅争詹林盛
- 关键词：丙型肝炎病毒细胞模型复制子
- 丙型肝炎病毒NS3/4A丝氨酸蛋白酶瞬时表达小鼠模型的建立被引量：2
- 2011年
- 目的:建立丙型肝炎病毒NS3/4A丝氨酸蛋白酶体内活性评价模型。方法:利用NS4A/B是NS3/4A丝氨酸蛋白酶作用底物的特性,构建融合基因NS3/NS4A/B-SEAP,底物片段NS4A/B插在NS3/4A和人分泌性碱性磷酸酶(SEAP)之间,融合基因表达后SEAP的分泌依赖于有活性的NS3/4A在NS4A/B位点的切割。将含融合基因的质粒NS3/4A(△4AB)SEAP通过水动力转染技术转染到小鼠体内,检测小鼠血清中SEAP的活性,高活性的SEAP是该评价体系成立的证据。结果与结论:在瞬时表达NS3/4A的小鼠血清中检测到了高活性的SEAP,建立了可用于评价抗NS3/4A的小鼠体内瞬时模型。
- 闫虎路遥杜娟贾帅争付秋霞彭剑淳周勇詹林盛
- 关键词：丙型肝炎病毒
- 杀伤细胞受体KIR3DS1胞外区的表达及纯化
- 2010年
- 目的表达并纯化杀伤细胞受体KIR3DSl胞外区。方法采用定向克隆的方法将KIR3DS1胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建pET28a-DsbA/KIR3DS1重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DS1融合蛋白表达,溶解于8M尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Su-perdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白的表达及纯化。结果表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度>95%的DsbA-KIR3DS1融合蛋白。结论 KIR3DS1胞外区的成功表达及纯化,为进一步研究KIR3DS1与相应配体之间相互作用奠定了基础。
- 李晖付秋霞周勇詹林盛王全立钟森
- 关键词：杀伤细胞受体原核表达蛋白纯化
- 活体荧光成像监测caspase-3蛋白酶的活性
- 2013年
- 目的利用生物发光技术,在细胞体系中实时监测caspase-3蛋白酶的活性,为细胞凋亡研究以及进行抗凋亡药物的筛查、评价提供技术支持。方法利用萤火虫荧光素酶作为细胞内凋亡发生的报告基因,构建载体,转染细胞,药物诱导细胞凋亡,利用活体荧光成像和Western印迹检测caspase-3蛋白酶的活性。结果成功建立了一种实时、动态、方便简单的检测caspase-3蛋白酶活性的细胞模型。结论该细胞模型为细胞水平上进行细胞凋亡的研究以及抗凋亡药物的筛查提供了技术平台。
- 段相国付秋霞阎少多王礼翠张玉华周勇詹林盛丁剑冰
- 关键词：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3细胞凋亡
- 活体荧光成像仪用于小鼠细菌感染的监测被引量：2
- 2017年
- 目的:建立一种脓毒血症小鼠模型,对细菌感染情况进行非损伤性成像。方法:采用活体荧光成像仪对发光细菌进行体外成像,通过小鼠尾静脉注射铜绿假单胞菌(典型的革兰氏阴性细菌)诱导脓毒血症建立小鼠模型,利用活体成像分析小鼠体内的细菌感染情况。结果:反映细菌荧光素酶活性的细菌生物发光读数与通过常规计数确定的细菌菌落形成单位(CFU)数呈正相关。细菌感染小鼠的存活率对不同浓度水平的细菌感染有剂量和时间依赖性。结论:活体荧光成像仪可检测细菌生物发光读数,可以应用于监测小鼠感染细菌增殖的变化。
- 吴涛周俊陈震张秋丽晋晶张艳春史荣辉付秋霞詹林盛
- 关键词：成像细菌感染脓毒血症存活率
- 一种肝脏高效表达调控序列及其应用
- 本发明公开了一种肝脏高效表达调控序列及其应用，其目的是提供一种肝脏高效表达调控序列及其在肝脏中表达外源基因中的应用。该序列为序列表中SEQ ID №：1或SEQ ID №：2所示核苷酸序列，其中，含有肝脏特异性启动子AA...
- 付秋霞贾帅争王全立
- 文献传递
- 血清或血浆样品稀释液及其应用
- 本发明公开一种血清或血浆样品稀释液，用在夹心ELISA检测人脂肪细胞补体相关蛋白(Acrp30)中稀释血清(血浆)样品，它包括一种还原剂及缓冲组分，具体可以由25mM DTT、100mM pH8.0的Tris缓冲液、2m...
- 陈竞新王全立詹林盛王会中付秋霞
- 文献传递
- 基于NS3/4A切割MAVS的特性建立HCV丝氨酸蛋白酶活性监测细胞模型
- HCV作为一种RNA病毒,能够有效激活宿主固有免疫系统中IFN诱导信号通路,但同时HCV又通过拮抗天然免疫系统识别,干扰IFN信号通路以及抑制IFN刺激基因活化等多水平逃逸机制来逃避宿主的抗病毒活性.MAVS为IFN信号...
- 付秋霞王礼翠贾帅争王小慧王颖丽詹林盛
