傅作申
- 作品数：8 被引量：18H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用Drug-western法从cDNA表达文库中筛选青蒿素类抗疟药靶标蛋白基因
- 以总RNA中的mRNA构建的cDNA表达文库理论上含有该生物体的所有表达基因，可表达与天然蛋白相似的重组蛋白。建立cDNA表达文库在一次永久保存基因资源的同时，可以利用功能筛选、免疫学筛选、药物探针筛选、Southern...
- 傅作申
- 关键词：青蒿素抗疟药物恶性疟原虫
- 恶性疟原虫海南株(FCC1)翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因的克隆及序列测定被引量：4
- 2002年
- 为了获得翻译控制肿瘤蛋白 (TCTP)基因 ,提取恶性疟原虫海南株 (FCC1)总RNA ,直接用总RNA反转录成单链DNA ,再用长距PCR方法扩增出双链cDNA .根据小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列设计引物 ,以cDNA为模板合成了恶性疟原虫海南株TCTP基因 .以pMD18 T为载体 ,用大肠杆菌XL1 blue对基因克隆 .测序结果表明 ,此基因序列与小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列有 85 %同源性 .由此基因序列推导出的TCTP氨基酸序列 ,与小鼠约氏疟原虫TCTP氨基酸序列有 88%同源性 .进入GenBank国际基因库 (美国 )检索 ,所克隆的基因与基因库中恶性疟原虫基因同源性为 97% ;由所克隆的基因序列推导的TCTP氨基酸序列 ,与国际基因库恶性疟原虫TCTP基因推导的TCTP氨基酸序列仅有 1个氨基酸差异 .
- 傅作申程远国张玉静阮承迈单成启侯禹男陈知航陈泽建李英
- 关键词：恶性疟原虫海南株克隆
- 应用Drug-western法从cDNA表达文库中筛选青蒿素类抗疟药靶标蛋白基因
- 构建恶性疟原虫海南株红内期cDNA表达文库提取红内期恶性疟原虫海南株总RNA,直接以总RNA为模板使用cDNA文库构建试剂盒,首先反转录合成ss-DNA,再扩增合成ds-DNA(cDNA),对扩增产物用蛋白酶K消化及Sf...
- 傅作申张玉静郝军元
- 文献传递
- 恶性疟原虫海南株TCTP基因的克隆及其在M15中的表达
- ＜正＞ 根据恶性疟原虫海南株（FCC1）肿瘤控制蛋白（TCTP）基因、pMD-18-T克隆载体限制性酶切位点及pQE-30表达载体限制性酶切位点设计引物,以含有TCTP基因的阳性单克隆噬菌体λDNA为模板,克隆恶性疟原虫...
- 傅作申程远国单成启陈知航候禺男
- 文献传递
- 恶性疟原虫海南株翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因在M15中的表达
- 2007年
- 获得翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因后与表达载体pQE-30重组,然后转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导后表达TCTP融合蛋白,薄层扫描结果显示目的蛋白占菌体总蛋白的23.4%,目的蛋白中可溶性蛋白所占比例高于非溶性蛋白。Ni-NTA纯化后C端测序,结果C端13个氨基酸序列与由GenBank国际基因库中恶性疟原虫TCTP基因推导出的C端13个氨基酸序列及组成完全一致。结果表明成功地在M15中表达了恶性疟原虫海南株TCTP基因,为进一步研究提供了实验材料。
- 傅作申陈知航张娟花艳红程远国
- 关键词：恶性疟原虫克隆原核表达
- 用长距PCR法构建恶性疟原虫cDNA表达文库被引量：14
- 2002年
- 目的 构建恶性疟原虫cDNA表达文库。方法 用Trizol试剂盒提取总RNA ,以经修饰的SMART寡聚核苷酸引物 CDSⅢ引物直接用总RNA选择性地反转录成单链cDNA ,再用长距PCR(LD)方法选择性地扩增出双链cDNA ,经蛋白酶K消化和酶切后 ,用玻璃奶试剂盒回收 2 0 0bp以上DNA片断 ,经与载体λTriplEX2连接和蛋白抽提物体外包装后 ,构建成cDNA文库并对文库进行了初步的鉴定。结果 构建了高滴度 ,高重组率的恶性疟原虫cDNA表达文库。结论 所构建的疟原虫cDNA文库适合进一步筛选抗疟原虫药物结合蛋白基因。
- 傅作申程远国张玉静阮承迈单成启古稀波陈知航侯禹男陈泽建李英
- 关键词：恶性疟原虫CDNA表达文库
- 应用Drug-western法从cDNA表达文库中筛选青蒿素类抗疟药靶标蛋白基因
- 傅作申张玉静郝军元
- 恶性疟原虫海南株翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因在M15中的表达
- 获得翻译控制肿瘸蛋白(TCTP)基因后与表达载体pQE—30重组,然后转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导后表达TCTP融合蛋白,薄层扫描结果显示目的蛋白占菌体总蛋白的23.4%,目的蛋白中可溶性蛋白所占比例高于非溶性蛋白...
- 傅作申陈知航张娟花艳红程远国
- 关键词：恶性疟原虫克隆
- 文献传递
