关宁
- 作品数：59 被引量：215H指数：8
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胆固醇酯水解酶基因慢病毒载体构建及鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的构建含有人胆固醇酯水解酶(hCEH)基因的慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP,为hCEH基因治疗缺血性脑卒奠定基础。方法应用聚合酶链反应方法扩增目的片段,在目的基因进行上、下游分别加上Pac I和Asc I两个酶切位点,经双酶切后,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选获得重组质粒。将目的基因片段和pLenti6.3-IRES-EGFP载体连接,获得慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP,并进行测序。抽提慢病毒载体,转染293T细胞,包装病毒,测定病毒滴度。结果目的基因与慢病毒表达载体pLenti6.3-IRES-EGFP连接,慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP构建与预期相匹配,包装细胞293T呈绿色荧光。结论成功构建了携带hCEH基因的慢病毒载体。
- 关宁罗俊生霍晓川顾立学王瑞张兴海冯旭
- 关键词：慢病毒表达载体
- 辅助性T17细胞在牙周炎小鼠中的免疫状态研究被引量：13
- 2015年
- 目的研究辅助性T(Th)17细胞在牙周炎小鼠中的免疫状态。方法将7周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为牙周炎组和对照组,每组4只。牙周炎组采用口腔涂抹牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的方法建立牙周炎动物模型。对照组涂抹PBS液。在涂抹结束后的第4周取材,流式细胞仪检测CD4+维甲酸相关核孤儿受体(ROR)γτ+(Th17)细胞;酶联免疫吸附(ELISA)检测Th17细胞相关的细胞因子白细胞介素(IL)-17A的蛋白表达。结果牙周炎小鼠牙龈组织、颈部淋巴结和外周血中CD4+RORγτ+(Th17)细胞在总CD4+T细胞中的比例和细胞数量显著高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,牙周炎组IL-17A的表达增加(P<0.05)。结论在牙周炎的发生发展中,Th17细胞介导的细胞免疫应答增强,牙龈组织、颈部淋巴结和外周血可能是Th17细胞介导免疫应答的主要场所。
- 王琳源关宁林晓萍
- 关键词：牙龈卟啉单胞菌牙周炎骨吸收
- Dyna—CT在经皮微球囊压迫治疗三叉神经痛中的应用被引量：7
- 2013年
- 目的总结Dyna—CT在穿刺卵圆孔，确定球囊位置及形态，进而辅助经皮微球囊压迫治疗三又神经痛的经验。方法回顾分析经皮微球囊压迫术中使用Dyna—CT进行三维重建治疗20例三叉神经痛的病例资料，在穿刺时确定穿刺针与卵圆孔的关系及角度，在压迫时确定球囊的位置、形态，测定体积，并进行随访。结果穿刺针在正位与中线成角15．17°-35．48°，平均25．28°，侧位与Reid基线成角37．46°-53．18°，平均46．09°。球囊的体积为568．2—891．4mm3，平均766．1mm3。20例术后症状均完全缓解，4例出现咬肌无力合并面部轻度痛觉减退。随访时间6～22个月，平均13．3个月，所有病例无复发，术后并发症消失。结论Dyna—CT辅助经皮微球囊压迫术能够不依赖患者体位，方便地观察卵圆孔，确定穿刺方向，准确地对穿刺针方向及深度进行调整，立体全面地观察及测定穿刺针的角度、球囊的位置、形态和容量，从而降低手术并发症，改善患者预后。
- 霍晓川张振兴罗俊生郭闻师关宁马骥王秋华赵琳琳
- 关键词：三叉神经痛微球囊压迫
- 结缔组织生长因子siRNA对大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察结缔组织生长因子(CTGF)siRNA对CTGF表达及对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法培养大鼠血管平滑肌细胞,用脂质体法将抗CTGF483siRNA进行转染,Western blot法检测转染效果,MTT法及划痕实验测定对VSMC增殖和迁移的影响。结果转染CTGF483siRNA组的CTGF表达明显低于未转染组,MTT法显示转染CTGF483siRNA后VSMCs增殖减慢,划痕试验证实转染CTGF483siRNA后VSMCs迁移受到抑制。结论CTGFsiRNA可以抑制VSMC增殖和迁移,有望为颈动脉粥样硬化性缺血性脑血管病的预防和治疗新靶点。
- 顾立学罗俊生关宁霍晓川孙霄云
- 关键词：血管平滑肌细胞结缔组织生长因子细胞增殖细胞迁移
- 小骨窗开颅手术治疗基底节脑出血47例临床分析
- 2009年
- 目的探讨小骨窗开颅术在基底节脑出血治疗中的效果及临床意义。方法对47例高血压脑出血患者行小骨窗开颅,血肿清除术。结果术后存活42例,占89.4%;死亡5例,占10.6%。结论小骨窗开颅术创伤较小,手术时间短,止血彻底,临床疗效较佳。
- 张春关宁张振兴
- 关键词：小骨窗开颅术基底节脑出血
- 羧酸酯酶1对大鼠颈动脉损伤后血管狭窄及炎性反应的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CES1)对大鼠颈动脉内膜损伤后血管狭窄及炎症反应的影响。方法随机将大鼠分为3组,CES1组使用球囊导管制备颈总动脉损伤模型,在术后0 d、1 d、2 d尾经脉注射载有CES1的慢病毒载体促进CES1高表达;空载病毒组颈动脉损伤后注射空载病毒;空白对照组给予假手术处理。于术后第14天取材,HE染色后计算内膜增生情况,免疫组化和Western Blot检测TLR-4蛋白表达,实时荧光定量PCR测定TRL-4基因表达。结果HE染色表明CES1高表达能够明显抑制血管内膜损伤后的内膜增生,降低炎症反应,减少血管狭窄,免疫组化及实时荧光定量PCR和Western blot结果显示CES1高表达能够降低血管内膜中TLR-4的蛋白及基因表达。结论 CES1高表达能够下调损伤血管内TLR-4的表达从而抑制炎症反应,减轻血管损伤后狭窄。
- 甄为罗俊生霍晓川关宁王之赫邱建武
- 关键词：羧酸酯酶TLR-4血管损伤TLR-4
- 微囊型脑膜瘤的诊断和治疗被引量：3
- 2012年
- 微囊型脑膜瘤是颅内良性肿瘤，1993年WHO将其归类为脑膜瘤的病理类型之一。国外文献在1978年最先报道了2例，而国内相关文献报道较少，结合我院2007年1月至2011年10月收治的11例病理确诊为微囊型脑膜瘤患者的临床及影像学特点，对相关资料进行总结。
- 曲敏罗俊生邱建武衣服新张春黎铁伟关宁梁峰
- 关键词：微囊型脑膜瘤颅内良性肿瘤影像学特点病理类型病理确诊
- 瑞舒伐他汀对TPH-1巨噬细胞清道夫受体CD_(36)、SR-AⅠ表达的影响
- 2011年
- 目的观察瑞舒伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的TPH-1巨噬细胞清道夫受体CD36和SR-AⅠ表达的影响。方法体外培养TPH-1巨噬细胞,分三组置6孔培养板中。对照组为正常生长的TPH-1巨噬细胞;ox-LDL组加入100 mg/L的ox-LDL培养24 h,诱导巨噬细胞泡沫化;瑞舒伐他汀组加入100 mg/L的ox-LDL培养24 h,诱导巨噬细胞泡沫化,然后加入瑞舒伐他汀10μmol/L培养2 h。检测各组细胞内清道夫受体CD36、SR-AⅠ蛋白及其mRNA。结果与对照组相比,ox-LDL组CD36、SR-AⅠ蛋白及其mRNA表达增加(P均<0.05);与ox-LDL组相比,瑞舒伐他汀组CD36、SR-AⅠ蛋白及mRNA表达明显降低(P均<0.05)。结论瑞舒伐他汀可降低ox-LDL诱导的TPH-1巨噬细胞中清道夫受体CD36、SR-AⅠ的表达。
- 苗野罗俊生冯旭关宁霍小川
- 关键词：瑞舒伐他汀氧化低密度脂蛋白泡沫细胞清道夫受体
- 人胆固醇酯水解酶对泡沫细胞的影响及相关机制的研究
- 2014年
- 目的探讨人胆固醇酯水解酶（hCEH）表达对泡沫细胞的影响及相关机制。方法利用含hCEH的慢病毒转染RAW264．7小鼠单核巨噬细胞，转染成功后巨噬细胞泡沫化。油红O染色和高效液相色谱分析hCEH对细胞内脂滴堆积情况及游离胆固醇含量变化的影响；Western blot检测ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）、ATP结合盒转运蛋白G1（ABCG1）的表达情况。结果转染72h后，荧光细胞数量最多，接近50％，hCEH在细胞内大量表达；随着时间的延长，油红O染色阳性细胞数逐渐减少，细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量逐渐下降；Western blot显示在0～8h，ABCA1和ABCG1表达逐渐增加，8h达高峰，以后逐渐减少。结论hCEH表达可以促进巨噬细胞表面ABCA1、ABCG1的表达，并且ABCA1、ABCG1之间存在一定的协同性，从而有效增加了游离胆固醇外流、减少胆固醇酯在细胞内聚积，抑制泡沫细胞形成。
- 关宁王超霍晓川顾立学罗俊生
- 关键词：游离胆固醇泡沫细胞
- 大蒜素通过增强转化生长因子β1的表达抑制平滑肌细胞增殖
- 2013年
- 目的观察大蒜素是否能够通过增强转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达抑制血管平滑肌细胞的增殖。方法构建表达TGF-β1 siRNA的载体、转染平滑肌细胞,通过RT-PCR和Western Blot观察TGF-β1的表达情况;通过MTT比色法检测空白组、TGF-β1 siRNA、大蒜素10μg/ml+TGF-β1 siRNA组和大蒜素10μg/ml组在24 h,48 h和72 h内对平滑肌细胞增殖的影响;通过Western Blot检测各组在48 h后TGF-β1、激活蛋白-1(AP1)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况;通过对细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)生成的检测观察各组在作用48 h后血管壁氧化应激反应情况。结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示TGF-β1 siRNA明显下调TGF-β1的表达;与其他组相比Allicin组细胞的生长显著降低(P<0.05),并且随时间的延长抑制作用明显加大,抑制率分别为25.13%、33.12%和43.05%;Western blot检测结果显示与其他组相比大蒜素组TGF-β1表达明显增强,而增殖相关基因AP1和PCNA的表达明显被抑制;作用48 h大蒜素组细胞内ROS为64,与其他组相比大蒜素组ROS生成明显降低。结论大蒜素可以通过增强TGF-β1的表达抑制平滑肌细胞增殖。
- 张凤香关宁李晨光孙大鹏罗俊生
- 关键词：转化生长因子-Β1大蒜素SIRNA血管平滑肌细胞
