刘艳琴
- 作品数：7 被引量：16H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技攻关计划国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 内蒙古分离株M3253羊种布鲁菌omp31基因的表达及抗原性分析
- 2011年
- 为了在大肠杆菌中表达羊种布鲁菌omp31基因并鉴定重组蛋白的抗原性,试验采用PCR技术从内蒙古分离株M3253羊种布鲁菌中扩增得到布鲁菌omp31基因片段,插入pMD18-T载体克隆测序,并将目的基因插入原核表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET-30a-omp31,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达该基因,并用SDS-PAGE和Western-blot检测该蛋白。结果表明:成功构建了重组质粒pET-30a-omp31,并在大肠杆菌中成功表达了omp31基因,融合蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。说明布鲁菌omp31基因成功表达,重组蛋白可与羊种布鲁菌阳性血清发生特异性反应。
- 吴杰吴树清刘艳琴
- 关键词：抗原性
- 布鲁氏菌检测技术的研究进展被引量：15
- 2008年
- 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的,以流产和发热为特征的一种全世界广泛分布的人畜共患慢性细菌传染病,严重威胁着人和多种动物的生命健康。布鲁氏菌可感染人类、多种家畜和野生动物,导致巨大的经济损失和严重的公共卫生问题。因此,该病的检测工作也是预防其发生的重要组成部分。笔者综述了免疫学ELISA、胶体金、PCR等布鲁氏菌的检测技术,这些技术均能准确、快速、特异性地检测出布鲁氏菌。
- 张彦婷刘艳琴赵林立周雨霞
- 关键词：布鲁氏菌
- 牛布鲁氏菌Omp25基因的克隆与原核表达及抗原特异性研究
- 布鲁菌(Brucella)是革兰氏阴性兼性的细胞内寄生菌，是一种由布鲁菌引起的人畜共患传染病,给畜牧业的发展和人类的健康造成极大的危害。准确的诊断对有效控制和消灭布鲁菌病是相当重要的，探索寻找合适的布鲁菌诊断性抗原一直是...
- 刘艳琴
- 关键词：基因克隆原核表达抗原特异性人畜共患
- 文献传递
- 马耳他布鲁菌omp25的原核表达与免疫原性检测
- 2012年
- 为在大肠杆菌中表达马耳他布鲁菌omp25基因并鉴定重组蛋白的抗原性,从马耳他布鲁菌中用聚合酶链反应技术(PCR)扩增得到布鲁菌omp25基因片段,并将目的基因插入原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-omp25转入大肠杆菌Rosetta中表达,用SDS-PAGE和Western-blot检测表达蛋白。结果显示成功构建了重组质粒pET-32a-omp25,并在大肠杆菌Rosetta中获得了重组蛋白,重组蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。表明重组质粒pET-32a-omp25可以在大肠杆菌Rosetta中成功表达,并且重组蛋白可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白有良好的免疫原性,该研究为以后疫苗的研制及布鲁菌病的检测打下良好的基础。
- 吴杰吴树清李东兴刘艳琴张明月海岩
- 关键词：布鲁菌免疫原性
- 羊种布鲁菌omp25的原核表达与免疫原性检测
- 2012年
- 目的在大肠杆菌中表达羊种布鲁菌omp25基因并鉴定重组蛋白的免疫原性。方法从羊种布鲁菌中用聚合酶链反应技术(PCR)扩增得到布鲁菌omp25基因片段,并将目的基因插入原核表达载体PET-32a中,构建重组质粒PET-32a/omp25转入大肠杆菌E.coli Rosetta中并进行诱导表达,用SDS-PAGE和western-blot检测表达蛋白。结果成功构建了重组质粒PET-32a/omp25,并在大肠杆菌Rosetta中获得了重组蛋白,重组蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。结论重组质粒PET-32a/omp25可以在大肠杆菌Rosetta中成功表达,并且重组蛋白可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白有良好的免疫原性,该研究为疫苗的研制及布鲁菌病的检测打下良好的基础。
- 吴杰吴树清李东兴刘艳琴张明月海岩
- 关键词：布鲁菌免疫原性
- 牛布鲁氏菌OMP25的原核表达及表达产物的免疫学特性被引量：1
- 2011年
- 目的研究布鲁氏菌外膜蛋白OMP25的克隆、测序和表达,并对其进行免疫特性检测。方法采用PCR技术对牛布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因进行了扩增和克隆测序,并成功构建了原核表达质粒pGEX-OMP25。将其转入E.coliBL21,经IPTG诱导表达,用电洗脱纯化后获得了高纯度的目的蛋白。纯化后的蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫家兔得到了较高效价的抗血清。结论通过ELISA、Western-blotting分析及特异性检测试验,证明目的蛋白不仅具有抗原性且有良好的免疫反性。
- 刘艳琴海岩吴树清
- 关键词：流产布鲁氏菌免疫特性
- 布鲁菌外膜蛋白OMP25的原核表达
- 2011年
- 为了克隆布鲁菌外膜蛋白OMP25基因并构建基因的原核表达系统,试验采用聚合酶链反应(PCR)扩增得到布鲁菌基因组OMP25基因片段,T-A克隆后测定核苷酸序列,将目的基因定向插入原核表达载体pET-32a,经双酶切和DNA测序,再将构建的重组质粒转化到E.coilDH5α、Rosetta,经IPTG诱导后用SDS-PAGE检测重组蛋白pET32a-OMP25的表达情况。结果表明:经DNA测序显示OMP25基因序列和插入位点正确,成功构建了重组质粒pET32a-OMP25,经IPTG诱导表达出以包涵体形式存在的长为43 ku的OMP25融合蛋白;经Western-blot检测,OMP25融合蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明重组蛋白具有良好的反应原性。
- 刘艳琴吴树清吴杰
- 关键词：布鲁菌分离株重组质粒蛋白纯化
