吴杰
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
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- 内蒙古分离株M3253羊种布鲁菌omp31基因的表达及抗原性分析
- 2011年
- 为了在大肠杆菌中表达羊种布鲁菌omp31基因并鉴定重组蛋白的抗原性,试验采用PCR技术从内蒙古分离株M3253羊种布鲁菌中扩增得到布鲁菌omp31基因片段,插入pMD18-T载体克隆测序,并将目的基因插入原核表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET-30a-omp31,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达该基因,并用SDS-PAGE和Western-blot检测该蛋白。结果表明:成功构建了重组质粒pET-30a-omp31,并在大肠杆菌中成功表达了omp31基因,融合蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。说明布鲁菌omp31基因成功表达,重组蛋白可与羊种布鲁菌阳性血清发生特异性反应。
- 吴杰吴树清刘艳琴
- 关键词：抗原性
- 马耳他布鲁菌omp25的原核表达与免疫原性检测
- 2012年
- 为在大肠杆菌中表达马耳他布鲁菌omp25基因并鉴定重组蛋白的抗原性,从马耳他布鲁菌中用聚合酶链反应技术(PCR)扩增得到布鲁菌omp25基因片段,并将目的基因插入原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-omp25转入大肠杆菌Rosetta中表达,用SDS-PAGE和Western-blot检测表达蛋白。结果显示成功构建了重组质粒pET-32a-omp25,并在大肠杆菌Rosetta中获得了重组蛋白,重组蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。表明重组质粒pET-32a-omp25可以在大肠杆菌Rosetta中成功表达,并且重组蛋白可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白有良好的免疫原性,该研究为以后疫苗的研制及布鲁菌病的检测打下良好的基础。
- 吴杰吴树清李东兴刘艳琴张明月海岩
- 关键词：布鲁菌免疫原性
- 重组马耳他布鲁菌OMP31蛋白用于间接ELISA诊断抗原的研究
- 本研究是对马耳他布鲁菌omp31基因进行原核表达,并建立了以重组OMP31蛋白,作为间接ELISA方法的检测抗原,检测阳性血清中因感染牛种布鲁菌而致病的血清。主要研究结果如下：
1.布鲁菌omp31的原核表达与抗...
- 吴杰
- 关键词：布鲁菌原核表达ELISA
- 文献传递
- 羊种布鲁菌omp25的原核表达与免疫原性检测
- 2012年
- 目的在大肠杆菌中表达羊种布鲁菌omp25基因并鉴定重组蛋白的免疫原性。方法从羊种布鲁菌中用聚合酶链反应技术(PCR)扩增得到布鲁菌omp25基因片段,并将目的基因插入原核表达载体PET-32a中,构建重组质粒PET-32a/omp25转入大肠杆菌E.coli Rosetta中并进行诱导表达,用SDS-PAGE和western-blot检测表达蛋白。结果成功构建了重组质粒PET-32a/omp25,并在大肠杆菌Rosetta中获得了重组蛋白,重组蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。结论重组质粒PET-32a/omp25可以在大肠杆菌Rosetta中成功表达,并且重组蛋白可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白有良好的免疫原性,该研究为疫苗的研制及布鲁菌病的检测打下良好的基础。
- 吴杰吴树清李东兴刘艳琴张明月海岩
- 关键词：布鲁菌免疫原性
- 布鲁菌外膜蛋白OMP25的原核表达
- 2011年
- 为了克隆布鲁菌外膜蛋白OMP25基因并构建基因的原核表达系统,试验采用聚合酶链反应(PCR)扩增得到布鲁菌基因组OMP25基因片段,T-A克隆后测定核苷酸序列,将目的基因定向插入原核表达载体pET-32a,经双酶切和DNA测序,再将构建的重组质粒转化到E.coilDH5α、Rosetta,经IPTG诱导后用SDS-PAGE检测重组蛋白pET32a-OMP25的表达情况。结果表明:经DNA测序显示OMP25基因序列和插入位点正确,成功构建了重组质粒pET32a-OMP25,经IPTG诱导表达出以包涵体形式存在的长为43 ku的OMP25融合蛋白;经Western-blot检测,OMP25融合蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明重组蛋白具有良好的反应原性。
- 刘艳琴吴树清吴杰
- 关键词：布鲁菌分离株重组质粒蛋白纯化
