单超
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：福建农林大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选被引量：6
- 2009年
- 从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库。将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体。进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争ELISA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、3B3和4A2。
- 庄振宏李兰孙宪连张新艳单超汪世华王宗华
- 关键词：黄曲霉毒素B1单链抗体抗体库
- 斑马鱼血管紧张素转换酶(ACE)的生物信息学分析被引量：3
- 2009年
- 采用生物信息学方法对模式生物斑马鱼中的血管紧张素转换酶进行了系列预测分析。结果表明,斑马鱼中有两个ACE基因,它们所编码的蛋白分别由1 324和785个氨基酸组成,其中1个是酸性蛋白,在水中不稳定,没有信号肽,属线粒体跨膜蛋白;另一个为酸性水溶性稳定蛋白,有信号肽。它们均含保守的Pfam Pep-tidase_M2结构域,属于M2家族蛋白。通过ESTs搜索发现这两个基因在斑马鱼不同组织和不同发育期的表达情况存在较大的差异。同源性比对和系统发育分析表明,斑马鱼ACE蛋白与低等脊椎动物(红原鸡、热带爪蟾等)、高等脊椎动物(人、鼠等)的同源性较高,达60%以上,说明ACE蛋白在系统演化上比较保守。
- 刘淑集吴成业单超王爱荣王宗华
- 关键词：斑马鱼血管紧张素转换酶生物信息学
- 抗利什曼原虫表面糖蛋白和脂磷酸聚糖单链抗体库的构建及其应用
- 利什曼原虫病是一种由白蛉叮咬传播的,由利什曼原虫引起的传染性寄生虫病,广泛分布在亚、非、欧、拉美等洲的热带及亚热带地区。主要可以引起三类利什曼病:皮肤利什曼病,皮肤黏膜型利什曼病和内脏利什曼病。利什曼病痊愈后能产生稳固的...
- 单超
- 关键词：利什曼原虫单链抗体抗体库
- 文献传递
- IgM型单克隆抗体之scFv库的建立与筛选被引量：1
- 2009年
- 从一个抗脂磷酸聚糖IgM型单克隆抗体细胞的mRNA中经RT-PCR克隆重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),然后将VH、Linker和VL连接成scFv,并克隆到载体pCANTAB-5E,转Escherichia coliTG1感受态细胞,构建了单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到噬菌体展示的抗体库。将抗体库用于"淘洗—富集—扩增"3轮以后,得到针对脂磷酸聚糖特异性的噬菌体抗体。测序结果表明,该scFv的VH基因序列全长390 bp,编码127个氨基酸;VL基因序列全长341 bp,编码113个氨基酸。二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FR)、3个抗原互补决定区(CDR)及抗体特征性的2个半胱氨酸残基。
- 单超李兰王宗华
- 关键词：单链抗体抗体库
- 血管紧张素转换酶的克隆及序列分析
- 2011年
- 根据GenBank上公布的小鼠血管紧张素转换酶(ACE)基因序列,经多重比较设计1对特异性引物,从小鼠Balb/c肺部组织中提取总RNA,进行RT-PCR。产物经纯化回收,克隆到pMD-18T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。测序结果显示,该片段全长4 023 bp,开放阅读框(ORF)包含3 985 bp,编码1 328个氨基酸,相对分子质量为152.77 kD,等电点6.35。此序列与GenBank已登录的小鼠ACE同源性达99%,差异的5个碱基位于基因的非关键部位,说明小鼠ACE成功克隆。经同源性比较分析,达50%以上相同性的物种有17个,且符合种属之间的进化关系。因此,该序列可于研究物种亲缘关系或遗传距离的理想标记,为下一步研究其在酵母中的表达、生物活性和应用奠定了一定的基础。
- 刘淑集单超吴成业王宗华王茵刘智禹
- 关键词：血管紧张素转换酶克隆
