叶文华
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：甘肃省医学科学研究院更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学理学更多>>
- 肠炎沙门菌脂多糖抗原的制备及其生物学特性被引量：1
- 2011年
- 目的制备肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis,SE)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)抗原,并鉴定其生物学特性。方法分别用热酚水法和水饱和冷酚法提取SE LPS抗原,免疫BALB/c小鼠,制备LPS单克隆抗体。采用蒽酮-硫酸法测定LPS多糖含量,考马斯亮蓝染色法测定其蛋白含量,SDS-PAGE分析其分子结构,Western blot分析其反应原性,间接ELISA法分析其特异性。结果热酚水法水相LPS粗提物中的多糖和蛋白含量分别约为3.413 mg/ml和46μg/ml,水饱和冷酚法水相LPS粗提物中的多糖和蛋白含量分别约为2.248 mg/ml和31μg/ml;提取的LPS呈现明显的梯度型条带;制备的2株抗LPS单抗(1D3和2E5)均能与提取的LPS发生特异性反应;制备的LPS除了与伤寒沙门菌A～F多价血清发生交叉反应外,与其他各种肠道菌单价或多价血清均未发生反应。结论热酚水法和水饱和冷酚法均可制备出活性、纯度均较好的LPS,但水饱和冷酚法操作简单,且提取的样品纯度高,特异性和反应原性良好,可用于肠炎沙门菌特异性抗原位点单抗的制备及免疫学检测。
- 鲁学萍杜惠芬李克生连晓雯刘红亮袁明叶文华
- 关键词：沙门菌肠炎脂多糖类抗原
- 兰州地区恶性肿瘤患者弓形虫抗体IgG和IgM检测结果对比分析被引量：4
- 2010年
- 采用间接ELISA法对兰州地区435例不同临床类型恶性肿瘤患者血清中的弓形虫抗体IgG和IgM进行检测，以50例健康体检者作为对照，对前者伴发弓形虫病的情况进行统计，得出兰州地区不同临床类型恶性肿瘤患者伴发弓形虫病的特点及规律。
- 连晓雯李克生杜惠芬袁明叶文华周永奇
- 关键词：恶性肿瘤弓形虫病
- 高效价抗人血红蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 2007年
- 目的制备高效价抗人血红蛋白（Hb）单克隆抗体并对其进行鉴定。方法用纯化人血红蛋白免疫Balb／c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选分泌抗人Hb单克隆抗体的细胞株，将阳性细胞株接种于小鼠腹腔制备单克隆抗体并对腹水抗体进行纯化，测定抗体亚类，分析其敏感性、特异性及纯化抗体的相对亲和力。结果共获得3株单克隆抗体杂交瘤细胞株，均与人Hb有较高的亲和力，其敏感性可达0．5μg/ml，而且与人肌红蛋白（Mb）及各种动物血红蛋白、肌红蛋白均无交叉反应。结论3株单克隆抗体杂交瘤细胞株有较好的特异性，与人Hb有较高的亲和力。
- 杜惠芬李克生袁明叶文华连晓雯
- 关键词：人血红蛋白单克隆抗体
- 抗人β_2微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：5
- 2008年
- 目的:制备抗人β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:用高纯度的β2-MG免疫BALB/C小鼠,按常规技术制备针对β2-MG不同抗原表位的单克隆抗体,并对其进行纯化,测定抗体亚类、抗原表位分析等。结果:筛选出10株抗人β2-MG杂交瘤细胞株,ELISA间接法证实这组单克隆抗体仅与β2微球蛋白反应,而与其他蛋白无交叉反应,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2a,1株为IgA,1株为IgM。结论:获得特异性的抗人β2微球蛋白单克隆抗体,为试剂盒的开发研究奠定基础。
- 杜惠芬李克生连晓雯袁明叶文华
- 关键词：Β2微球蛋白单克隆抗体
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7脂多糖抗原的提取鉴定及间接ELISA法的建立被引量：8
- 2011年
- 目的提取并纯化具有强免疫反应性和高特异性的肠出血性大肠杆菌O157∶H7(E.coliO157∶H7)脂多糖(LPS)抗原,并研究其在E.coliO157∶H7 LPS抗体检测中的应用。方法应用热酚水法提取E.coliO157∶H7 LPS抗原,同时收集水相和酚相LPS,并对其产率、纯度及免疫反应性进行分析比较,用酸解法制备O-特异性多糖(O-SP),并以不同的LPS为包被抗原,建立间接ELISA法检测E.coliO157∶H7 LPS抗体。结果大分子量的E.coliO157∶H7 LPS优先溶于酚相,而水相中含有更多的小分子量LPS,与水相LPS相比酚相LPS具有更高的免疫反应性和纯度,酚相LPS经酸解去脂得到的O-SP具有更高的反应特异性。结论酚相LPS和O-SP都可用于E.coliO157∶H7 LPS抗体的ELISA检测,O-SP具有更高的特异性,是检测E.coliO157∶H7 LPS特异性抗体的理想材料。
- 刘红亮陈学忠李克生杜惠芬陈应泰连晓雯鲁学萍袁明叶文华
- 关键词：脂多糖间接ELISA
