吴昊昱
- 作品数：8 被引量：14H指数：3
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- 发文基金：吉林省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤的治疗研究
- 目的:建立急性肾损伤的新型生物疗法,从受损组织功能修复和抑制损害因素两个方面,以骨髓间充质干细胞(BMSC)联合维生素E对急性肾损伤进行治疗,为急性肾损伤的临床生物治疗模式提供一定的理论参考和技术支持。方法:将获取的雄性...
- 刘朋飞冯业童董超刘迪吴璇吴昊昱石毅周余来
- 结直肠癌细胞外泌体的制备及其促单核细胞增殖作用被引量：4
- 2013年
- 目的:从结直肠癌细胞系中分离鉴定外泌体,初步研究结直肠癌来源的外泌体潜在的免疫学特性,为外泌体在结直肠癌免疫学治疗中的应用提供依据。方法:超速离心法从HCT116和SW480 2种结直肠癌细胞系培养上清中分离提取正常细胞外泌体和热休克细胞外泌体,进一步用220nm的滤膜进行纯化获得纯度较高的外泌体。采用透射电镜观察所提取外泌体表征形态,聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析细胞和外泌体的蛋白组成,检测外泌体促进外周血单个核细胞(PBMCs)的增殖功能。结果:透射电镜下正常的外泌体和细胞热休克获得的外泌体形态相近,均呈现典型的圆形或椭圆形外泌体结构,直径为50～100nm。聚丙烯酰胺凝胶电泳,结直肠癌细胞裂解物与结直肠癌细胞系来源外泌体的蛋白组成不同,与未处理和经热休克处理的结直肠癌细胞比较,外泌体对PBMCs的增殖有更强的促进作用(P<0.05),热休克作用可使外泌体诱导的PBMCs的增殖程度显著升高(P<0.05)。结论 :超速离心法和滤膜过滤方法可有效地从结直肠癌细胞系中提取外泌体,细胞裂解物和外泌体的蛋白组成差异可能是造成免疫学特性差异的主要原因,将细胞经热休克处理可增强外泌体的免疫原性。
- 董超刘迪冯业童刘朋飞吴璇吴昊昱周余来
- 关键词：结直肠肿瘤外泌体热休克
- 骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤的治疗研究
- 目的探索建立急性肾损伤的新型生物疗法。方法首先分离大鼠骨髓间充质干细胞;以庆大霉素为肾损害因素,分别在体内外验证骨髓间充质干细胞联合维生素E对肾脏细胞的保护性作用。结果体外实验表明,骨髓间充质干细胞联合维生素E对肾小管上...
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- 关键词：骨髓间充质干细胞维生素E急性肾损伤生物治疗
- 文献传递
- 大鼠肾小管上皮细胞的分离鉴定及其增殖活力分析被引量：3
- 2013年
- 目的:建立一种大鼠肾小管上皮细胞的分离鉴定方法,分析所获得细胞的增殖活力,为肾损伤等肾脏疾病的体外分析实验提供理论基础和技术支持。方法:采用Ⅱ型胶原酶消化法分离肾小管节段,并用Percoll密度梯度离心法进一步纯化肾小管,常规条件下对肾小管节段进行贴壁培养,待细胞爬出后,用免疫组织化学方法检测细胞角质素-18(CK-18)的表达情况,采用流式细胞术对第0、1和2(P0、P1、P2)代细胞的CK-18表达情况进行分析,用CCK-8方法检测各代细胞的增殖活力。结果:肾小管节段培养24h后,可见细胞从节段内爬出;培养72h后,细胞呈铺路石样密集生长。随着传代进行,P0、P1和P2代细胞CK-18的表达效率分别为95.9%、91.5%和76.8%,肾小管上皮细胞逐渐死亡,P2代细胞较P1代细胞增殖活力明显减弱(P<0.05),同时培养体系中杂细胞增多。结论:该方法经济可靠、简便易行,但是所分离的肾小管上皮细胞只可在体外传代2次,不能长期培养,仅P0、P1代细胞可供体外分析实验使用。
- 刘朋飞黄秀英董超冯业童吴昊昱刘迪吴璇周余来孙波
- 关键词：肾小管上皮细胞
- 结肠癌源性exosomes的分离及其相关免疫学性质被引量：4
- 2012年
- 目的分离结肠癌细胞株的exosomes,并分析其在致敏抗原呈递细胞及激活相关效应细胞过程中的作用。方法差速离心法分离体外培养的正常exosomes和经热休克处理的sw1116细胞(Heat shocked sw1116,HS-sw1116)分泌的exosomes(Heat shocked exosomes,HS-Exo),并在电子显微镜下观察exosomes和HS-Exo的形态结构;SDS-PAGE初步分析exosomes和HS-Exo的蛋白组分,CCK-8法检测其促外周血单个核细胞(Peripheral blood monouclear cells,PBMCs)增殖的能力。结果电子显微镜观察,exosomes和HS-Exo的形态学结构无明显差异,其平均直径约为150 nm;exosomes和HS-Exo的蛋白条带分布情况基本相同,在高相对分子质量区域蛋白分布较多;exosomes比sw1116细胞更易引起PBMCs的增殖反应,HS-sw1116细胞和HS-Exo促PBMCs增殖的作用比sw1116细胞和exosomes更明显(P<0.05)。结论结肠癌sw1116细胞株可分泌exosomes,其比肿瘤细胞更易引起PBMCs的增殖,热休克处理可进一步增强细胞和exosomes的促PBMCs增殖的能力,exosomes在结肠癌免疫治疗方面具有重要的应用价值。
- 冯业童刘朋飞吴昊昱刘迪董超吴璇周余来孙波
- 关键词：结肠癌EXOSOMES热休克免疫治疗
- NaF与H_2O_2对大鼠真皮成纤维细胞血管内皮生长因子表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:比较不同剂量的氟化钠(NaF)与过氧化氢(H2O2)对成纤维细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探索促进VEGF表达的简单有效的方法,为优化组织工程真皮培养条件提供理论参考。方法:酶消化法分离大鼠皮肤成纤维细胞,以不同剂量NaF(0.05和0.50 mmol.L-1)、H2O2(10 nmol.L-1和10μmol.L-1)以及两者联合(NaF 0.05mmol.L-1,H2O210μmol.L-1)分别作用于成纤维细胞,在第0、24及48h采用CCK-8法测定细胞的增殖活性,在第48小时采用ELISA法和免疫组织化学法测定其对VEGF表达的影响。结果:不同剂量NaF、H2O2以及两者联合作用对成纤维细胞增殖无抑制作用,与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);NaF实验组和H2O2实验组的VEGF表达量均明显提高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而NaF与H2O2两者联合作用效果最为明显,可提高40%(P<0.05)。结论:NaF与H2O2联合作用能在不影响成纤维细胞正常增殖的前提下,有效地促进VEGF的表达。
- 吴昊昱吴璇魏振宏刘朋飞董超冯业童刘迪石毅孙波
- 关键词：成纤维细胞血管内皮生长因子过氧化氢
- 非灌流法分离大鼠肝星形细胞及其鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的采用非灌流法分离大鼠肝星形细胞(Hepatic stellate cell,HSC),并进行鉴定。方法采用非灌流法结合酶消化法分离大鼠肝脏细胞,密度梯度离心进一步分离HSC,油红染色检测HSC胞质中的脂滴,免疫组化法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)、结蛋白(Desmin)及神经胶质酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达。结果非灌流法结合酶消化法可成功分离大鼠HSC;密度梯度离心纯化的HSC经油红染色,细胞核周围可见红色脂滴;该细胞中α-SMA、结蛋白及GFAP的免疫组化染色结果均呈阳性,细胞着色率可达90%以上。结论成功建立了大鼠HSC的非灌流分离模式,所获得的HSC纯度较高,该方法稳定简便,具有一定的推广应用价值。
- 刘朋飞周余来冯业童吴昊昱刘迪董超吴璇石毅
- 关键词：肝星形细胞细胞分离
- 骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤的治疗研究
- <正>目的:建立急性肾损伤的新型生物疗法,从受损组织功能修复和抑制损害因素两个方面,以骨髓间充质干细胞(BMSC)联合维生素E对急性肾损伤进行治疗,为急性肾损伤的临床生物治疗模式提供一定的理论参考和技术支持。方法:将获取...
- 刘朋飞冯业童董超刘迪吴璇吴昊昱石毅周余来
