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吴静: 作品数：77 被引量：287H指数：7; 供职机构：安徽理工大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学机械工程文化科学更多>>

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pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用被引量：2: 2014年; 目的构建结核分枝杆菌Ag85B抗原基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的DNA疫苗,探究其抗结核分枝杆菌保护效应。方法构建pCMV-LC3-Ag85B重组质粒并转染RAW264.7细胞,Western blot法检测目的蛋白的表达水平。分别以pCMV、pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-Ag85B质粒免疫BALB/c小鼠。末次免疫2周后,Ag85B刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平。末次免疫3个月后,用H37Rv标准株尾静脉注射感染小鼠,计数肺和脾脏结核分枝杆菌载量。结果 pCMV-LC3-Ag85B在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性。与pCMV-Ag85B免疫组相比,pCMV-LC3-Ag85B免疫组的IL-2、IFN-γ分泌显著增加,而肺和脾脏内结核分枝杆菌载量降低。结论 pCMV-LC3-Ag85B可显著增强Th1型免疫应答,并显示较好的抗结核分枝杆菌免疫保护效应。; 胡东杨小康王婉邢应如王文洋杜昭弘尤其章力陈丽萍吴静张荣波; 关键词：LC3 AG85B 免疫保护

pET28a-PTD-Ag85B质粒构建及原核表达条件的优化被引量：1: 2015年; 目的构建p ET28a-PTD-Ag85B原核表达载体,并对其在E.coli BL21(DE3)中表达条件进行优化。方法将TAT-PTD序列插入到用限制性内切酶Nhe I和Bam H I双酶切的p ET28a质粒中,获得p ET28a-PTD重组质粒;RT-PCR法扩增Ag85B基因并将其克隆至p ET28a-PTD质粒中,获得p ET28a-PTDAg85B重组质粒。将重组质粒p ET28a-PTD-Ag85B转化至大肠杆菌,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导PTD-Ag85B融合蛋白表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达产物。筛选最适诱导剂浓度、诱导温度和时间,尿素复性包涵体,并用His-tag离子亲和层析柱分离纯化融合蛋白。结果成功构建p ET28aPTD-Ag85B重组质粒,在E.coli BL21中能高效表达PTD-Ag85B融合蛋白。结论成功表达及纯化了PTD-Ag85B蛋白,为获得大量PTD-Ag85B融合蛋白提供了技术储备。; 杜昭弘王婉戴京京何江王文洋杨小康邢应如尤其穆敏胡东吴静张荣波; 关键词：AG85B 原核表达融合蛋白

Ⅰ型胶原α2、鳞状细胞癌相关抗原表达与食管鳞癌的相关性研究被引量：4: 2021年; 目的探讨Ⅰ型胶原α2(COL1A2)和鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)与临床病理特征的关系。方法TIMER 2.0和GEPIA数据库分析COL1A2在肿瘤及食管癌中的表达,化学发光法检测血清中SCCAg的水平,免疫组化法检测食管鳞癌组织和癌旁正常组织中COL1A2蛋白的表达。生存分析采用GEPIA数据库,基因集富集分析采用GSEA数据库。结果GEPIA数据库分析显示,食管鳞癌中COL1A2的表达高于正常组织(P<0.05),食管鳞癌TNM分期及与COL1A2的表达相关(P<0.05)。SCCAg在食管鳞癌患者中的阳性率为48.6%,其在高分化食管鳞癌患中表达增高(P<0.05)。COL1A2蛋白在食管鳞癌中强阳性率为73.5%,显著高于癌旁组织5.6%(P<0.05)。COL1A2过表达与食管鳞癌分化程度及其临床分期相关(P<0.05)。GEPIA数据库分析显示高表达COL1A2的患者无瘤生存率显著降低(P<0.05)。GSEA分析表明差异基因主要集中在粘着斑通路、细胞外基质结构组分、内质网内腔、细胞外结构组织。结论血清SCCAg的高表达对食管鳞癌诊断及其分化程度预测有一定的应用价值,而食管鳞癌组织COL1A2的高表达与食管鳞癌的进展及预后不良有关,对食管鳞癌的预后的判断有一定的临床参考价值,有望成为食管鳞癌新的治疗靶点。; 邢应如邢应如张雪胡万发苗传龙吴静吴静; 关键词：食管鳞癌病理特征 SCCAG

胚胎干细胞培养方法研究进展被引量：1: 2010年; 吴静胡东张荣波; 关键词：胚胎干细胞细胞培养方法自我更新能力永生化细胞端粒酶活性 OCT-4

居室内毒素含量与儿童过敏性哮喘相关性调查被引量：4: 2007年; 目的了解居室内毒素含量对儿童过敏性哮喘患病率的影响。方法向安徽省安庆、淮南地区2986名8或12岁在校儿童父母发放哮喘标准调查表,动态浊度法检测儿童床铺尘内毒素含量,放射性变应原荧光酶免疫吸附实验（RAST-FEIA）检测其血清中特异性IgE（sIgE）含量。结果最终具有完整资料儿童为904人,居室内毒素含量与儿童过敏性哮喘患病率呈负相关（OR=0．48, 95%CI：0．32～0．72,P＜0．05）,与过敏性致敏呈负相关（OR=0．65,95%CI：0．49～0．94,P＜0．05）,与非过敏性哮喘及哮鸣无显著相关。与正常人群相比,过敏性致敏、哮鸣、哮喘者的内毒素水平显著升高（M-W U 15 138．0,P＜0．01;M-W U 4858．0,P＜0．01;M-W U 4041．0,P＜0．01）。结论居室内毒素的早期暴露可能是预防儿童过敏性哮喘及致敏产生的保护因素之一。; 胡东张荣波吴静; 关键词：哮喘内毒素

LC3-LpqH增强Ag85B抗结核分枝杆菌DNA疫苗的免疫保护作用被引量：2: 2014年; 目的探讨微管相关蛋白轻链3-脂蛋白前体-LpqH(LC3-LpqH)DNA佐剂对Ag85B抗结核分枝杆菌(MTB)DNA疫苗免疫保护作用的影响。方法分别用纯化的pCMV-Ag85B、pCMV-LpqH/pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-LpqH/pCMV-Ag85B、pCMV质粒DNA对BALB/c小鼠进行3次肌肉注射免疫。末次免疫2周后,ELISA检测血清中抗Ag85B IgG亚型及滴度。Ag85B刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4、IL-10分泌水平。末次免疫3个月后,用MTB标准毒株H37Rv尾静脉注射感染小鼠,计数肺和脾脏MTB载量并观察肺组织病理变化。结果与Ag85B免疫组相比,LC3-LpqH/Ag85B免疫组抗Ag85B的IgG2a水平显著提高,而IgG1水平显著降低,并伴随IL-2、IFN-γ分泌增加及IL-4、IL-10减少,肺和脾脏内MTB载量降低,肺组织病变程度减轻。结论 LC3-LpqH可显著增强Ag85B抗MTB疫苗的Th1型免疫应答,并显示较好的免疫保护效应。; 胡东杨小康陈功吴静王婉戴京京陈天义张荣波; 关键词：结核分枝杆菌 DNA疫苗免疫保护

自然戒断期成瘾药物依赖者CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞的变化特征及意义被引量：6: 2013年; 目的研究自然戒断期成瘾药物依赖者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)及外周血单个核细胞(PBMC)中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达水平的变化,探讨成瘾药物对成瘾药物依赖者体内Treg的影响。方法采集自然戒断6个月和18个月半的成瘾药物依赖者各40例及30例健康人的外周血,使用流式细胞仪检测Treg,用RT-PCR检测PBMC中TGF-β1 mRNA表达水平。结果与对照组比较,戒断18个月组Treg、TGF-β1 mRNA含量显著增高,而戒毒6个月组未发现显著性变化。结论成瘾药物对依赖者Treg的影响是长期性的,其介导的Treg异常,可能是引起成瘾药物依赖者免疫功能紊乱的原因之一。; 王文洋张荣波邢应如张世武胡东吴静何江杨小康付计锋赵辉胡乐林; 关键词：调节性T细胞

农村生活对儿童特应性致敏的影响: 2008年; 目的探讨农村生活对预防儿童特应致敏的保护作用。方法于2004—2005年,向2986名在校儿童[农村儿童(农村出生,现住农村),转居儿童(农村出生后转入城镇生活),城镇儿童(出生于城镇,现住城镇)]父母发放标准调查表,以放射性变应原荧光酶免疫吸附实验(RAST-FEIA)检测儿童血清中特异性IgE(sIgE)含量。结果与城镇儿童比较,农村儿童及转居儿童的特应性致敏危险度呈统计学降低(农村儿童:OR=0.32,95%CI:0.11-0.62;转居儿童:OR=0.51,95%CI:0.28-0.92),并且三者间有统计学趋势(P<0.05)。同时,农村儿童及转居儿童对屋尘螨致敏的危险度低于城镇儿童(农村儿童:OR=0.23,95%CI:0.08～0.57;转居儿童:OR=0.43,95%CI:0.21～0.87),三者亦有统计学趋势(P<0.05)。结论农村生活对预防儿童特应性致敏的发生可能有保护作用。; 吴静胡东朱钰张荣波; 关键词：儿童农村变应原

Rab7在自噬体和溶酶体融合过程作用的研究进展被引量：4: 2015年; 自噬体与溶酶体的有效融合是细胞发挥自噬功能对细胞内多余物质进行降解和再利用的关键。自噬体与溶酶体的融合受控于复杂的信号通路网络,涉及多个环节及众多分子的协同作用,并与内吞机制有部分重叠。Ras相关蛋白7(Rab7,小GTP酶家族的成员)可能是自噬体与溶酶体的融合进程中最为重要的分子之一,在指导自噬体成熟、胞内负荷运输及与溶酶体的对接与融合过程中发挥重要调节功能。自噬体与溶酶体的融合障碍可引起先天性及适应性免疫应答异常,导致炎症、肿瘤及胞内微生物感染的加重。因此控制Rab7的活性可能成为治疗这些疾病的潜在靶点。; 胡东王婉吴静张荣波; 关键词：自噬溶酶体

pET28a-Streptag I-SbpA-Ag85B重组质粒的表达与鉴定: 2014年; 目的应用分子克隆技术获得纳米级Ag85B蛋白并对其进行鉴定和免疫学特性检测.方法利用S-layer/Streptag I这一具有自我组装能力的纳米模式嵌合结核杆菌分泌的Ag85B蛋白基因,将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,并在大肠杆菌中表达Ag85B蛋白,表达后的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果原核表达重组质粒pET28a-Streptag I-SbpA-Ag85B成功构建,并可在大肠杆菌中诱导表达,得到的Streptag I-Sbpa-Ag85B蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确,重组蛋白能被结核患者血清识别.结论重组后的Ag85B蛋白具有较强的免疫反应性.所建立的原核表达体系为新型结核疫苗研制提供了一个新的思路.; 杜久伟胡东吴静王文洋杨小康许礼发张荣波; 关键词：AG85B 原核表达纳米免疫原性

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