周长青
- 作品数：20 被引量：51H指数：4
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程天文地球更多>>
- miR-378对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响
- 背景 研究miR-378对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞生长增殖、细胞凋亡等生物学行为的影响,为进一步改善骨髓间充质干细胞在梗死心肌中的生存提供新方法.目的：观察miR-378转染后的骨髓间充质干细胞耐受缺血缺氧及促进血...
- 郭天柱邢越侯婧瑛周长青钟婷婷郑韶欣王彤
- 关键词：骨髓间充质干细胞缺血缺氧血管生成
- 心肌干细胞移植可改进心力衰竭大鼠室颤阈值和电生理的稳定性被引量：6
- 2011年
- 背景:心肌干细胞移植后是否引起或加重心肌梗死患者的心律失常是治疗的关键问题。目的:观察心肌干细胞对心力衰竭大鼠室颤阈值和电生理稳定性的影响。方法:开胸结扎20只SD大鼠左前降支冠状动脉,2周后选取其中的10只局部梗死心肌内注射PKH26荧光标记的由PBS悬浮的心肌干细胞,另10只局部梗死心肌内注射等量PBS。治疗6周后,再次开胸检测梗死边缘区的心电生理特性和室颤阈值。实验结束后,摘取心脏行病理切片,检查PHK26标记的心肌干细胞是否在梗死区内生存并表达连接蛋白43及α-肌动蛋白。结果与结论:与对照组相比,心肌干细胞移植组单极电图激动恢复时间及纠正的激动恢复时间明显缩短,电刺激所激发的恶性心律失常明显减少,室颤阈值明显提高。PHK26标记的心肌干细胞在梗死边缘区内被发现并表达连接蛋白43和α-肌动蛋白。提示心肌干细胞移植能改善心力衰竭大鼠心电生理的稳定性和提高室颤阈值;心肌干细胞可在体内表达心肌细胞和连接蛋白的标记。
- 王彤郑韶欣周长青翁胤仑温主治黄辉王景峰
- 关键词：心肌干细胞心律失常室颤阈值心肌梗死
- 长链非编码RNA-H19对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞生存和血管再生能力的影响被引量：3
- 2018年
- 背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植后其在局部梗死组织中的生存力低下,形成新生血管的密度较低,在一定程度上影响了其治疗的效率。长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)被证实与骨髓间充质干细胞分化及血管形成密切相关。目的:体外观察lncRNA-H19对骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下生存和血管再生能力的影响,并探讨其可能机制。方法:体外培养的骨髓间充质干细胞分为5组:MSCs+H19组、MSCs+H19对照组(MSCs+H19 NC组),MSCs+si-H19组、MSCs+si-H19对照组(MSCs+si-H19 NC组)和MSCs组。其中MSCs+H19组和MSCs+H19NC组分别予以转染lncRNA-H19及lncRNA-H19 scramble RNA阴性对照,MSCs+si-H19组和MSCs+si-H19NC组分别转染lncRNA-H19 siRNA及lncRNA-H19 siRNA scramble阴性对照,体外缺血缺氧条件(无血清,体积分数为1%O_2)下培养24 h,MTS法检测细胞增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。取细胞培养基上清液分别刺激人脐静脉内皮细胞,观察血管形成情况。Western blot检测各组血管内皮生长因子A表达。结果与结论:(1)与MSCs组及MSCs+H19 NC组相比,MSCs+H19组增殖能力显著增强,凋亡显著减少,血管管腔样结构明显增多(P<0.01);(2)与MSCs组及MSCs+si-H19 NC组相比,MSCs+si-H19组增殖能力显著减弱,凋亡显著增加,血管管腔样结构明显减少(P<0.01);(3)与MSCs组及MSCs+H19 NC组相比,MSCs+H19组血管内皮生长因子A表达显著增高;(4)与MSCs组及MSCs+si-H19 NC组相比,MSCs+si-H19组血管内皮生长因子A表达显著减少;(5)结果表明,lncRNA-H19促进骨髓间充质干细胞在体外缺血缺氧环境下的生存并增强其血管形成能力,此作用可能与其上调血管内皮生长因子A表达相关。
- 侯婧瑛汪蕾龙会宝吴浩伍权华钟婷婷周长青郭天柱陈旭翔王彤
- 关键词：缺血缺氧干细胞骨髓间充质干细胞血管再生
- miR-378对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 背景:研究miR-378对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞生长增殖、细胞凋亡等生物学行为的影响,为进一步改善骨髓间充质干细胞在梗死心肌中的生存提供新方法。目的:观察miR-378转染后的骨髓间充质干细胞耐受缺血缺氧及促进血管形成的能力。方法:体外培养的骨髓间充质干细胞分为未转染组和转染组,未转染组为未转染miR-378的骨髓间充质干细胞,转染组则采用化学合成的miR-378模拟物转染SD大鼠骨髓间充质干细胞;将两组骨髓间充质干细胞置于缺血缺氧(无血清,体积分数为1%O2、5%CO2,94%N2)环境中培养24 h后,应用锥虫蓝染色计数法、MTS法检测两组细胞在不同时间点的生长及增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况;将两组缺血缺氧后的培养基上清液分别刺激人脐静脉内皮细胞,观察血管形成情况。结果与结论:缺血缺氧干预后48 h和72 h,转染组的骨髓间充质干细胞活细胞数明显高于未转染组(均为P<0.01);转染组的骨髓间充质干细胞表现出较高的增殖能力,缺血缺氧干预后24 h及48 h细胞增殖升高较未转染组明显,差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05);缺血缺氧后转染组骨髓间充质干细胞的凋亡比例明显下降(P<0.05)。两组细胞均可促进血管腔样结构形成,但转染组血管管腔样结构较未转染组显著增多(P<0.01)。研究结果提示miR-378可促进缺血缺氧后骨髓间充质干细胞的生长增殖并抑制其在缺血缺氧条件下的细胞凋亡,同时可提高其促血管生成的能力。
- 郭天柱邢越侯婧瑛周长青钟婷婷郑韶欣王彤
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞缺血缺氧国家自然科学基金
- LncRNA-Braveheart促进骨髓间充质干细胞在体外向心肌样细胞分化被引量：2
- 2017年
- 背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但整体效果并不太理想,骨髓间充质干细胞在体内局部梗死微环境中的分化效率低下,其向心肌细胞分化的能力极其有限。目的:采用lncRNA-Bvht体外转染骨髓间充质干细胞,观察其对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响。方法:构建含lncRNA-Bvht的病毒载体p LVX-IRES-Zs Green1-lncRNA-Bvht,对骨髓间充质干细胞进行lncRNA-Bvht转染并检测转染效率。分离培养C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞,并将第3代细胞分为3组:骨髓间充质干细胞组、空载体组和lncRNA-Bvht组。各组细胞培养48 h后用5-氮杂胞苷进行诱导分化24 h再进行正常培养2周,荧光显微镜观察骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化情况,免疫荧光染色、Western blot、qRT-PCR检测心肌分化标记物肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达。结果与结论:①诱导分化后细胞形态发生改变,细胞之间形成连接,排列方向趋于一致;②免疫荧光检测结果显示lncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白表达呈现强阳性;肌钙蛋白T阳性细胞的比例显著增加;③qRT-PCR和Western blot检测结果显示lncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达较空载体组和骨髓间充质干细胞组均明显升高(P<0.01);④结果提示,lncRNA-Bvht转染能够有效促进骨髓间充质干细胞在体外向心肌样细胞发生分化。
- 侯婧瑛龙会宝周长青吴浩郭天柱钟婷婷伍权华汪蕾郑韶欣王彤
- 关键词：骨髓间质干细胞
- 早期开髓缓解急性根尖脓肿伴颊间隙感染引起的疼痛被引量：3
- 2019年
- 目的评价对上颌磨牙急性根尖脓肿伴颊间隙感染患者进行早期患牙开髓的疼痛缓解效果,为临床提供参考。方法2015年7月至2019年3月由中山大学孙逸仙纪念医院口腔科收治的122例由上颌磨牙引起的急性根尖脓肿伴颊间隙感染患者(男71例、女51例),年龄16~63岁。采用随机数字表法分层分组、单盲、交叉、自身对照,按照切开排脓前是否接受开髓处理分为开髓组(男36例、女25例,共61例)和对照组(男35例、女26例,共61例),用视觉模拟评分法(VAS)评定患者切开排脓前、切开排脓后即刻、30min、1h、4h、12h、24h、2d、4d、7d的疼痛分值。采用SPSS25.0统计软件对VAS值进行分析。结果两组患者在切开排脓前VAS值差异无统计学意义(F=0,P=0.39)。切开排脓后即刻、30min、1h、4h、12h、24h开髓组的VAS值均显著低于相应对照组的VAS值,差异均有统计学意义(P<0.001),而切开排脓后2、4和7d开髓组的VAS值与相应对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。所有患者均无并发症。结论上颌磨牙急性根尖脓肿伴颊间隙感染可在切开排脓前进行开髓引流从而缓解疼痛。
- 秦泽曼黄卓珊周长青范松王洁琪陈睿
- 关键词：疼痛测定开髓
- 用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向关系被引量：5
- 2016年
- 目的:构建长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)萤光素酶报告质粒,利用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)的靶向关系。方法:通过生物信息学网站RegRNA2.0预测获取小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p潜在的互补结合位点。将H19及其突变体克隆到萤光素酶载体psi CHECK-2中,构建H19野生型和突变型质粒,并采用酶切和测序方法鉴定psi CHECK-2-H19载体是否构建成功。将H19野生型和突变型质粒分别与miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照或miR-199a-5p抑制剂阴性对照在293T细胞中共转染。收集细胞后通过双萤光素酶报告系统检测不同组别的萤光素酶活性,从而对lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向调节关系进行验证。结果:构建的重组萤光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确,双萤光素酶报告基因检测显示,与miR-199a-5p模拟物阴性对照组相比,miR-199a-5p模拟物组H19野生型报告基因的萤光素酶活性显著降低,下降约49%左右(P<0.01),而miR-199a-5p抑制剂组H19野生型报告基因的萤光素酶活性较miR-199a-5p模拟物组明显增高(P<0.01)。miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照以及miR-199a-5p抑制剂阴性对照对H19突变型的萤光素酶活性均无明显影响。结论:lncRNA-H19能够靶向结合miR-199a-5p,并在转录后水平对其有直接抑制作用。
- 侯婧瑛周长青郑韶欣郭天柱龙会宝伍权华钟婷婷吴浩汪蕾王彤
- 复方利多卡因泰唑含漱缓解急诊牙龈疼痛的临床效果被引量：1
- 2019年
- 目的:探讨含漱复方利多卡因泰唑(甲硝唑漱口液)缓解急诊牙龈疼痛的临床效果。方法:72例急诊牙龈疼痛患者采用分层随机分组、单盲、交叉、自身对照的方法,按照含漱复方利多卡因泰唑、泰唑、0.9%氯化钠溶液,分为观察组、泰唑组和对照组各24例。采用视觉模拟评分量表(VAS)评定患者就诊时、含漱10ml药剂10 min后即刻、30 min、1 h、6 h、12 h、24 h的疼痛分值。结果:三组患者在含漱前VAS值无明显差异(P=0.845);在含漱结束后即刻,观察组的VAS值均明显低于泰唑组和对照组(P<0.05),而泰唑组和对照组无明显差异(P=0.081)。含漱后30 min和1 h,观察组VAS值均低于相应泰唑组(P<0.05),且观察组和泰唑组的VAS值均低于相应对照组(P<0.05);在含漱结束后6 h、12 h,观察组VAS值和泰唑组均低于相应对照组(P<0.05),而观察组和泰唑组无明显差异(P值分别为0.594和0.324);在24 h时,观察组VAS值和泰唑组无明显差异(P=0.381),均小于相应对照组(P<0.05)。结论:复方利多卡因泰唑用于缓解急诊牙龈疼痛效果好,且起效快、安全、便捷。
- 秦泽曼周长青陈睿李逸安邬微微任思琦范松黄卓珊
- 关键词：疼痛测定利多卡因甲硝唑漱口液
- HIF-1α/apelin/APJ通路在缺氧预处理促进心肌干细胞增殖和向心肌样细胞分化中的作用被引量：3
- 2017年
- 背景:课题组前期研究显示心肌干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但心肌干细胞在局部心肌梗死组织中的生存及心肌分化效率低下。目的:体外实验观察缺氧预处理对心肌干细胞增殖和向心肌样细胞分化的影响并探讨HIF-1α/apelin/APJ通路在其中的作用。方法:体外培养的心肌干细胞分为缺氧组(体积分数为1%O2)和常氧组(体积分数为20%O2),培养24 h后,MTS法检测两组细胞的增殖情况,Western blot检测缺氧诱导因子1α、apelin、APJ的表达;两组细胞用5-氮杂胞苷诱导分化24 h,再进行正常培养2周,Western blot检测缺氧诱导因子1α、apelin、APJ以及c Tn T的表达;免疫荧光染色观察c Tn T阳性的心肌样细胞的比例。结果与结论:(1)与常氧组比较,缺氧组在培养24 h后的增殖率和A490值均显著增高(P<0.01);(2)与常氧组比较,缺氧组在培养24 h和诱导分化2周后缺氧诱导因子1α、apelin和APJ的蛋白表达量均明显增高(P<0.01);(3)与常氧组比较,缺氧组诱导分化2周后c Tn T阳性的心肌样细胞的比例显著增加(P<0.01),c Tn T蛋白表达量明显增高(P<0.01);(4)结果表明,缺氧预处理能够促进心肌干细胞的增殖和向心肌样细胞发生分化,此效应可能与缺氧诱导因子1α/apelin/APJ通路的激活相关。
- 汪蕾侯婧瑛龙会宝吴浩周长青郭天柱伍权华钟婷婷陈旭翔王彤
- 关键词：分化缺氧预处理
- 骨髓间充质干细胞改进心衰大鼠心肌细胞的收缩性被引量：1
- 2011年
- 背景:骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死已被证明能明显改善心功能。目的:观察骨髓间充质干细胞对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞收缩舒张功能的影响。方法:开胸结扎10只SD大鼠左前降支冠状动脉,制备心肌缺血模型,随机抽签法分为2组,实验组造模4周后在梗死心肌内注射荧光标记的5×1010L-1骨髓间充质干细胞,对照组单纯注射PBS。结果与结论:与左前降支冠状动脉结扎前相比,造模4周后两组大鼠心功能明显下降(P<0.01);经骨髓间充质干细胞治疗后实验组的心功能得到明显改善(P<0.05)。实验组心肌细胞收缩幅度较对照组显著增加,收缩速度显著增快(P<0.01)。且荧光显微镜发现有经骨髓间充质干细胞分化而来具有收缩功能的心肌细胞。提示经骨髓间充质干细胞治疗后的大鼠心肌细胞其收缩舒张功能显著增强,是骨髓间充质干细胞治疗心衰大鼠导致心功能改善的主要机制之一。
- 王彤郑韶欣周长青翁胤仑温主治
- 关键词：心肌细胞骨髓间充质干细胞心力衰竭心功能收缩性
