唐夏莉
- 作品数：11 被引量：105H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金杭州市科技发展计划项目浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 苦参碱抑制肺癌A549细胞增殖及诱导细胞自噬的研究被引量：13
- 2017年
- 目的:研究苦参碱(matrine)对肺癌A549细胞增殖及自噬的影响。方法:应用matrine作用肺癌A549细胞后,MTT法检测细胞增殖活性;吖啶橙染色(AO)法在荧光显微镜下观察细胞自噬状态;蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达情况;GFP-LC3质粒转染实验观察细胞胞质中绿色点状聚集的自噬泡。结果:matrine可以显著抑制肺癌A549细胞的增殖(P<0.01),随着给药时间和剂量的增加,matrine对肺癌细胞的生长抑制率显著上升,并呈一定的时间-剂量依赖关系。matrine作用于肺癌A549细胞48 h后,细胞内酸性滤泡染成亮红色荧光比例增多,其中以0.5 mg/m L和1.0 mg/m L浓度较为明显,蛋白质印迹法检测实验即选择0.5mg/m L和1.0 mg/m L作为实验浓度。与对照组相比,matrine0.5 mg/m L和1.0 mg/m L组LC3-Ⅱ/GAPDH蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与matrine0.5 mg/m L组相比,matrine0.5 mg/m L+3-MA组LC3-Ⅱ/GAPDH蛋白表达水平显著下降(P<0.01);与matrine1.0 mg/m L组相比,matrine1.0 mg/m L+3-MA组LC3-Ⅱ/GAPDH蛋白表达水平也显著下降(P<0.01)。GFP-LC3转染实验选择matrine1.0 mg/m L于肺癌A549细胞中进行验证,结果显示转染GFP-LC3质粒的细胞在1.0 mg/m L处理后,细胞胞质中出现绿色点状聚集的自噬泡,而正常培养组极少细胞有自噬泡形成;同时转染GFP-Control对照质粒的细胞在1.0 mg/m L处理及正常培养条件下均未观察到点状聚集的自噬泡产生。结论:matrine抑制肺癌A549细胞的增殖并诱导细胞发生自噬。
- 周晓芳李菲方慧徐佳丹李影影唐夏莉
- 关键词：肺癌苦参碱细胞增殖自噬
- 安罗替尼联合氯喹促进人非小细胞肺癌细胞系H1299凋亡被引量：9
- 2021年
- 目的探讨安罗替尼和氯喹(CQ)单用及联用对人非小细胞肺癌系H1299存活率、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法安罗替尼与CQ单用及两药联合处理H1299细胞,MTT法检测细胞的存活率;划痕愈合和Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力;Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;Western blot检测自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬底物p62蛋白表达。结果安罗替尼联合CQ组对H1299细胞存活率、侵袭及迁移抑制效应优于安罗替尼组(P<0.05);安罗替尼单用时较对照组的细胞凋亡增加,当安罗替尼联合CQ作用时细胞凋亡增加更显著。安罗替尼随浓度增加明显上调自噬标志物蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和下调自噬底物蛋白p62;CQ可显著上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62表达水平;与单用CQ组相比,20μmol/L安罗替尼联合CQ组更加显著上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和下调p62。结论安罗替尼联合氯喹可显著抑制H1299细胞的存活率、迁移和侵袭,促使细胞凋亡;其机制可能通过自噬发挥抗肿瘤作用。
- 刘细帮朱林芝焦德敏唐夏莉陈君胡旭钢陈清勇
- 关键词：氯喹凋亡
- miRNA-126对肺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭及EGFR/AKT/mTOR信号通路的影响被引量：40
- 2016年
- 目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-126对肺癌A549细胞功能的影响及相关的作用机制。方法:利用脂质体试剂Lipofectamine 2000将miRNA-126转染入肺癌A549细胞中,采用real-time PCR法检测转染后各组细胞中miRNA-126的表达;MTT法检测细胞活力;台盼蓝拒染实验检测细胞存活数目;细胞集落培养实验观察转染后细胞集落形成;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;Western blot法检测EGFR/AKT/mTOR通路中各蛋白水平的变化。结果:Real-time PCR结果显示,转染miRNA-126组细胞中的miRNA-126表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01),而阴性对照组与空白对照组无显著变化;A549细胞转染miRNA-126模拟物后,细胞增殖和集落形成能力均呈明显下降(P<0.01);肺癌细胞的迁移和侵袭能力也受到明显抑制(P<0.01);Western blot结果显示,转染miRNA-126组细胞中EGFR/AKT/mTOR通路相关蛋白p-EGFR、p-AKT和p-mTOR的水平均有明显降低(P<0.01)。结论:miRNA-126可以显著降低肺癌A549细胞中p-EGFR、p-AKT和p-mTOR的蛋白水平,进而可能抑制其细胞增殖和迁移侵袭能力。
- 唐夏莉焦德敏陈君王剑陈清勇
- 关键词：肺癌
- 姜黄素下调mTOR诱导人肺癌A549细胞自噬的研究被引量：15
- 2014年
- [目的]研究姜黄素诱导人肺癌A549细胞自噬现象及与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的关系。[方法]采用CCK-8法检测姜黄素对A549细胞增殖的抑制作用;采用吖啶橙染色(AO)及转染GFP-LC3质粒荧光显微镜下观察姜黄素处理后A549细胞的自噬现象;采用Western blot法检测微管相关蛋白轻链Ⅱ(LC3Ⅱ)、微管相关蛋白轻链Ⅰ(LC3Ⅰ)、mTOR表达的变化。[结果]姜黄素对人肺癌A549细胞增殖有明显抑制作用,且成明显的剂量—时间依赖关系。AO染色结果显示,与对照组相比,姜黄素40μmol/L组及Rapa组细胞内酸性滤泡染成亮红色荧光比例增多;与姜黄素40μmol/L组相比,姜黄素40μmol/L+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组及3-MA组亮红色荧光比例下降。细胞转染GFP-LC3后姜黄素40μmol/L组和Rapa组胞浆内点状的绿色荧光斑点明显;与姜黄素40μmol/L组相比,姜黄素40μmol/L+3-MA组及3-MA组胞浆内点状的绿色荧光斑点明显比例有所下降。Western blot法检测结果显示,与对照组相比,姜黄素40μmol/L组作用24h后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达显著升高(P<0.05),姜黄素40μmol/L+3-MA组LC3Ⅱ/LC3-Ⅰ表达低于姜黄素40μmol/L组(P<0.05)。姜黄素40μmol/L组mTOR表达显著下降(P<0.01),姜黄素40μmol/L+3-MA组mTOR表达高于姜黄素40μmol/L组(P<0.05)。[结论]姜黄素能够明显抑制A549细胞增殖并诱导A549细胞发生自噬,同时还能够明显抑制mTOR蛋白的表达水平,其机理可能与mTOR的信号通路有关。
- 何聪陈清勇王剑唐夏莉焦德敏
- 关键词：姜黄素哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 血浆纤维蛋白原水平与非小细胞肺癌患者烟草暴露、临床疗效及其预后的相关性分析
- 2021年
- 目的探讨血浆纤维蛋白原水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者烟草暴露、临床疗效及其预后的相关性。方法100例NSCLC患者作为观察组,100例健康体检者作为对照组,测定所有研究对象的血浆纤维蛋白原水平,分析NSCLC患者纤维蛋白原表达水平与烟草暴露、临床疗效的关系。通过访问癌症基因组图谱(TCGA)数据库,分析纤维蛋白原表达量与烟草暴露NSCLC患者临床病理特征及预后的关系。结果NSCLC患者纤维蛋白原水平显著高于健康者(P<0.001)。NSCLC患者烟草暴露会增加纤维蛋白原的表达(P<0.001),治疗有效者的纤维蛋白原水平显著低于治疗无效者(P<0.05)。治疗有效组中烟草暴露与非烟草暴露患者治疗后的纤维蛋白原水平均显著降低(P<0.05),治疗无效组患者治疗前、后的纤维蛋白原水平无明显变化。TCGA数据库分析显示,纤维蛋白原表达与患者烟草暴露呈正相关(P<0.01),纤维蛋白原高表达的患者更易出现淋巴结转移、TNM分期多处于晚期(P<0.05),总生存时间(OS)显著低于纤维蛋白原低表达的患者(P<0.01)。NSCLC患者纤维蛋白原过表达与烟草暴露、淋巴结转移、TNM分期及其预后相关。结论血浆纤维蛋白原可作为NSCLC患者临床疗效监测和预后预测的一种指标。
- 胡旭钢唐夏莉刘细帮陈清勇
- 关键词：纤维蛋白原烟草暴露非小细胞肺癌临床疗效预后
- PlexinB2基因沉默的人肺癌稳定细胞株及其构建方法
- 本发明涉及生物医学研究领域，具体地说涉及一种PlexinB2基因沉默的人肺癌稳定细胞株及其构建方法。该细胞株的建立是利用慢病毒载体将PlexinB2基因转染入肺癌细胞，并经药物抗性筛选获得PlexinB2基因沉默的稳定细...
- 陈清勇陈峥立唐夏莉
- 文献传递
- 姜黄素通过下调nectin-4抑制肺癌PC-9细胞的迁移和侵袭被引量：8
- 2017年
- 目的:探讨姜黄素对肺癌PC-9细胞迁移和侵袭的抑制作用及其与nectin-4表达的关系。方法:用MTT、划痕修复和Transwell小室实验检测姜黄素对肺癌PC-9细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;用Western blot技术检测姜黄素对nectin-4表达及AKT通路的影响;经siRNA干扰nectin-4后观察姜黄素对PC-9细胞活力、迁移、侵袭及AKT通路的影响。结果:姜黄素能抑制PC-9细胞活力,10、20μmol/L姜黄素组与对照组相比,划痕修复率降低,穿膜细胞数目显著下降。姜黄素作用肺癌PC-9细胞24 h后,nectin-4表达下调。转染siNectin-4 48 h和72 h后,siNectin-4组比对照组的细胞活力显著降低(P<0.01),划痕修复率及穿膜细胞数目显著下降(P<0.01)。姜黄素与siNectin-4均抑制了PC-9细胞AKT通路的激活。姜黄素与siNectin-4联用时细胞活力降低(P<0.01),划痕修复率、细胞侵袭能力及AKT磷酸化水平下降。结论:在肺癌PC-9细胞中,姜黄素通过下调nectin-4表达、调控下游AKT通路来抑制细胞迁移和侵袭。
- 陈君焦德敏唐夏莉王剑李优陈清勇
- 关键词：姜黄素肺癌细胞迁移细胞侵袭
- 基于TCGA和GEO分析TTK在肺腺癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2021年
- 目的挖掘酪氨酸和苏氨酸蛋白激酶(TTK)在肺腺癌(LUAD)中的表达与临床病理特征及预后的联系。方法从肿瘤基因图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)下栽LUAD组织的TTK表达数据和临床资料,比较TTK在LUAD组织和正常肺上皮组织中的表达差异,分析其与临床病理参数的相关性,并评价TTK与患者预后的关联。结果相比于正常肺上皮组织,TTK在包括LUAD的泛癌组织中的表达显著升高。TTK的表达与患者TNM分期呈正相关,且在有吸烟史的患者中表达更高。相比于EGFR野生型的患者,EGFR突变的患者TTK表达显著下调a生存分析提示TTK表达越高,患者的总体生存率越低;多因素Cox回归结果表明TTK是LUAD患者独立预后因子e结论肺腺癌中TTK的表达明显升高,并与肿瘤的恶性表型及不良预后密切相关,可作为预后监测及药物治疗的新型分子标志物。
- 胡旭钢唐夏莉刘细帮陈清勇
- 关键词：肺腺癌列线图
- 姜黄素通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制TGF-β1诱导的肺癌细胞上皮间质转化被引量：18
- 2016年
- [目的]探讨姜黄素对TGF-β诱导的肺癌A549细胞上皮间质转化、侵袭转移的影响及其可能的机制。[方法]通过转化生长因子TGF-β1诱导肺癌细胞株A549发生上皮间质转化;利用不同浓度姜黄素干预由TGF-β1诱导的肺癌A549细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力变化,Western blot法检测上皮表型标记蛋白E-cadherin和间质表型标记蛋白N-cadherin、Vimentin的表达及PI3K/AKT/m TOR信号通路中AKT、mTOR磷酸化的情况,并利用PI3K抑制剂LY290004、mTOR抑制剂Rapamycin通过上述方法对姜黄素的作用进行印证。[结果]与对照组相比,姜黄素显著增加A549细胞E-cadherin的表达,抑制N-cadherin和Vimentin蛋白及TGF-β1刺激p-AKT和p-m TOR的表达,且呈明显的剂量—时间依赖关系;同时抑制TGF-β诱导的侵袭迁移。[结论 ]姜黄素可通过PI3K/AKT/m TOR通路明显抑制TGF-β1诱导的肺癌A549细胞上皮间质转化,降低其侵袭迁移能力。
- 李优王剑牟好焦德敏唐夏莉陈君陈清勇
- 关键词：姜黄素上皮间质转化TGF-Β1
- 肺癌转移特异性microRNA表达谱的建立及其应用研究
- 陈清勇吴玉泉焦德敏王剑李玉陈君严杰宋嘉徐炜唐夏莉
- 该研究应用microRNA芯片检测具有高低不同转移潜能肺癌细胞株95C (低转移)和95D（高转移）的miRNA表达，生物信息学分析建立了肺癌转移特异性的miRNA表达谱；采用生物信息学分析，荧光素酶报告实验和QPCR技...
- 关键词：
- 关键词：肺癌生物信息学动物实验
