张菁
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 胆汁酸对糖脂及能量代谢调节作用的研究进展被引量：8
- 2016年
- 胆汁酸由胆固醇在肝内合成,是胆汁的主要有机成分。以往对胆汁酸功能的认识主要是其在促进脂类营养物质的消化和吸收方面的作用。近年来研究发现,胆汁酸还是一种有效的内分泌代谢调节因子,能够激活多种核受体和膜受体介导的信号通路,在调节其自身代谢、糖脂代谢的稳态以及能量代谢方面发挥着重要作用。深入研究胆汁酸及其代谢调节通路可为肥胖、糖尿病等代谢性疾病的治疗提供新的方向。
- 陈淑芹张菁方启晨
- 关键词：2型糖尿病肥胖胆汁酸法尼酯衍生物X受体
- 成纤维细胞生长因子19转录活性及上游结合元件分析
- 2017年
- 目的构建FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,并研究分析其启动子区的转录活性和结合元件。方法设计特异性引物PCR扩增基因组DNA,得到长为3323bp的FGF19基因启动子区片段,将此PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-Basic Vector,获得全长为3323bp的FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒。在此基础上设计特异性引物,构建5'端系列缺失荧光素酶报告基因质粒。通过瞬时转染实验检测所构建质粒的相对荧光素酶活性,分析不同启动子区片段对FGF19基因转录活性的影响,并用软件预测影响启动子转录活性的关键转录因子。结果构建了7个FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,经双酶切和测序验证均正确。瞬时转染及荧光素酶报告基因分析实验发现启动子区-2351^-2316是调控FGF19启动子转录活性的重要序列,且在线软件预测该序列存在潜在的转录因子位点。结论 FGF19基因启动子区-2351^-2316是调控其启动子转录活性的关键位置。
- 徐宜兰陈淑芹张菁白宁宁方启晨
- 关键词：转录调控启动子质粒构建
- 肠道菌群与糖尿病关系的研究进展被引量：9
- 2017年
- 糖尿病的发生率正在不断上升,已成为威胁人类健康和生活质量的全球性疾病。但对于糖尿病的病因尚未完全明确,目前认为主要是遗传和环境因素共同作用的结果。研究发现,人体肠道菌群的代谢活动与宿主营养、代谢与免疫功能密切相关,是影响糖尿病的一个重要环境因素。本文主要就肠道菌群与糖尿病的关系的最新研究进展进行综述。
- 白宁宁张菁方启晨
- 关键词：肠道菌群糖尿病血糖代谢
- 白藜芦醇在调控二硫键氧化还原酶类似蛋白基因表达中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨白藜芦醇对二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)基因转录的影响。方法将25μmol/L白藜芦醇加入HepG2细胞和3T3-L1细胞,干预24h后收获细胞,用于后续实验提取RNA和蛋白;以二甲基亚砜(DMSO)处理组作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测3T3-L1细胞和HepG2细胞DsbA-L mRNA和蛋白表达水平。以荧光素酶报告基因实验分析白藜芦醇对DsbA-L基因启动子活性的影响。采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测白藜芦醇对转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子1区域Sp1结合位点的结合能力的影响。采用Western印迹法检测Sp1蛋白表达水平。结果在3T3-L1细胞和HepG2细胞中,白藜芦醇处理组DsbA-L蛋白和DsbA-L mRNA的表达水平均显著高于DMSO对照组(P值均<0.05)。白藜芦醇处理组的DsbA-L基因启动子报告基因质粒p(-186to+432)Luc的相对荧光素酶活性显著高于DMSO对照组(P<0.05);与包含该Sp1结合位点的DsbA-L基因启动子报告基因质粒p(-186to+432)Luc相比,不包含该Sp1结合位点的两个报告基因质粒,Sp1位点缺失突变的p(-186to+432)Luc mut和3’端部分缺失的p(-186to+391)Luc在白藜芦醇干预后的相对荧光素酶活性与DMSO对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与DMSO对照组相比,白藜芦醇处理后转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子区DNA特异结合形成的DNA-Sp1复合物的条带灰度减弱。白藜芦醇处理后3T3-L1细胞和HepG2细胞中Sp1的蛋白表达均显著低于DMSO对照组(P值均<0.05)。结论白藜芦醇通过抑制Sp1表达,上调DsbA-L基因的转录,从而促进DsbA-L蛋白的表达。
- 杨文静方启晨张菁任伟宋倩倩贾伟平
- 关键词：白藜芦醇启动子SP1
- 超高效液相色谱-串联质谱法检测人微量血清中9种胆汁酸及其临床意义被引量：4
- 2015年
- 目的 :分析糖尿病患者与正常对照组微量血清中胆汁酸各组分水平的差异,并探讨与血糖的关系。方法 :建立测定微量血清中9种胆汁酸的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)方法。选取15例糖尿病患者和10名正常对照者作为研究对象。血清样本经乙腈沉淀蛋白,采用Waters Atlantis T3柱分离,以甲醇-水(含乙酸)为流动相,用负离子多反应监测模式分析,检测空腹血清胆汁酸浓度。并且分析血清胆汁酸水平在2组间的差异及其与血糖和胰岛素的关系。结果:正常人体血清中以游离型胆汁酸和甘氨结合型胆汁酸为主。相比于健康对照组,糖尿病患者血清中甘氨鹅脱氧胆酸[7.24(3.34,10.83)mg/L比15.71(11.39,27.12)mg/L,P<0.05]和甘氨胆酸[1.41(0.96,1.88)mg/L比2.38(1.50,3.45)mg/L,P<0.05]显著升高,而2组甘氨脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸、胆酸无显著性差异。空腹血糖与甘氨鹅脱氧胆酸及甘氨胆酸水平呈正相关(r=0.470,r=0.405,均P<0.05)。结论:建立了一种在微量血清中同时检测9种胆汁酸的灵敏、有效的UHPLC-MS/MS方法,为深入研究胆汁酸在疾病中的作用提供了一定的基础。利用该方法初步发现甘氨酸结合型胆汁酸(甘氨鹅脱氧胆酸和甘氨胆酸)水平在糖尿病患者血清中比例增加,提示胆汁酸组分的改变可能与糖代谢异常有关。
- 张菁许静静方丽杨一鸣周虎方启晨贾伟平
- 关键词：胆汁酸超高效液相色谱-串联质谱2型糖尿病
- 成纤维细胞生长因子21的生理作用与机制研究进展被引量：3
- 2013年
- 成纤维细胞生长因子21（FGF21）是成纤维细胞生长因子（FGF）家族的一个成员，以内分泌的方式发挥激素样作用。研究发现，FGF21参与调节糖脂类代谢，包括增加肥胖个体胰岛素敏感性、降低甘油三酯浓度、减轻体重、改善与肥胖相关的高血糖和高血脂等。此外，FGF21在饥饿与餐后状态、生长激素抵抗等一些生理过程中也发挥着重要的作用。FGF21的生理作用使得其有望在治疗代谢性疾病方面成为极具吸引力的药物靶点。
- 张菁李华婷方启晨
- 关键词：成纤维细胞生长因子生长激素抵抗激素样作用脂类代谢减轻体重
- 人二硫键氧化还原酶类似蛋白基因启动子克隆和上游抑制元件分析
- 2016年
- 目的克隆Dsb A-L基因启动子,并对其活性进行初步分析。方法以人基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增Dsb A-L基因5'端2115bp片段(从翻译起始点ATG上游-2128^-14区域)。将PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-basic。随后,构建5'端系列缺失的报告基因质粒。将构建的一系列质粒转染3T3-L1和HEK 293细胞,检测荧光素酶活性。利用在线软件MAPPER预测转录调控关键序列潜在的转录因子结合位点。通过Real-time PCR比较这些转录因子在肥胖和正常人脂肪组织中的表达。结果成功构建人Dsb A-L启动子报告基因质粒。系列缺失分析表明-2128^-1302区域是影响转录活性的关键序列。MAPPER软件预测此区域可能与一些转录因子结合。比较这些转录因子在肥胖患者和正常人脂肪组织中的表达情况,发现其中NF-κB和FOXO1在肥胖患者中表达显著增加,进一步推测NF-κB和FOXO1可能是人Dsb A-L基因启动子上游的调控抑制因子。结论成功构建人Dsb A-L基因启动子系列缺失质粒,初步分析了其上游可能存在的关键调控元件,为进一步的转录调控研究奠定了基础。
- 陈淑芹徐宜兰白宁宁张菁方启晨贾伟平
- 关键词：转录调控启动子
