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海南捕鸟蛛毒素-IV突变体的固相合成和生理活性分析被引量：9: 2005年; 海南捕鸟蛛毒素_IV(HNTX_IV)是从我国海南捕鸟蛛粗毒中分离出的一种TTX_敏感型的钠离子通道阻断剂 ,由 35个氨基酸残基组成 ,含 3对二硫键。为了研究HNTX_IV结构与功能的关系 ,用芴甲氧羰基 (Fomc)固相多肽合成方法合成了用丙氨酸 (Ala)替代HNTX_IV第 12位丝氨酸 (Ser12 )的突变体S12A_HNTX_IV和替代第 2 9位精氨酸 (Arg2 9)的突变体R2 9A_HNTX_IV。合成的突变体经谷胱甘肽法氧化复性和纯化后 ,分别用MALDI_TOF质谱进行分子量鉴定 ,用一维核磁共振波谱法分析空间结构的变化 ,膜片钳电生理方法分析生物学活性。结果表明 ,Ser12和Arg2 9被Ala突变后没有明显影响分子的空间结构 ,S12A_HNTX_IV的生物学活性与天然HNTX_IV的相近 ,提示Ser12与HNTX_IV的生物学活性无关或关系不大 ;而R2 9A_HNTX_IV的生物学活性下降了 15 5倍 ,说明Arg2 9是与HNTX_IV生物学活性相关的关键残基之一。推测R2 9A_HNTX_IV活性的降低是由于Ala替代Arg后改变了HNTX_IV与受体作用的位点 ,而不是由于毒素分子整体空间结构变化所致。; 徐侠熊霞李冬玲肖玉成王贤纯梁宋平; 关键词：固相多肽合成突变体

1.海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ突变体的固相合成和生理活性分析;2.大鼠背根神经节细胞质膜蛋白质组学研究: 为了研究HNTX-Ⅳ结构与功能的关系，用芴甲氧羰基(Fomc)固相多肽合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代HNTX-Ⅳ第12位丝氨酸(Ser12)的突变体S12A-HNTX-Ⅳ和替代第29位精氨酸(Arg29)的突变体R...; 徐侠; 关键词：固相多肽合成突变体背根神经节细胞; 文献传递

1.海南捕鸟蛛毒素-IV突变体的固相合成和生理活性分析2.大鼠背根神经节细胞质膜蛋白质组学研究: 徐侠; 关键词：固相多肽合成突变体背根神经节细胞凝胶电泳

Arg26和Lys27突变对海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ生物活性影响被引量：2: 2005年; 海南捕鸟蛛毒素Ⅳ(hainantoxin-Ⅳ,HNTX-Ⅳ)是一种新型的从海南捕鸟蛛粗毒中分离纯化的作用于河豚毒素敏感型(tetrodotoxinsensitive,TTXS)钠通道阻断剂.采用2D1HNMR技术解析HNTXⅣ的空间结构为胱氨酸抑制剂结模体,为进一步阐述HNTX-Ⅳ结构与功能的关系,应用固相Fmoc方法化学合成了用丙氨酸代替海南捕鸟蛛毒素Ⅳ第26位精氨酸的单残基突变体R26AHNTXⅣ和第27位赖氨酸的单残基突变体K27AHNTXⅣ.合成的突变体用谷胱甘肽法氧化复性并通过反相高效液相色谱(RPHPLC)纯化.通过MALDITOF质谱测定突变体的分子量.通过核磁共振谱仪测定突变体的空间结构.通过全细胞膜片钳实验比较天然HNTX-Ⅳ(nHNTX-Ⅳ)和两个突变体分子的生物学活性.结果发现,nHNTX-Ⅳ的R26或K27被突变后的空间结构没有发生明显变化.R26AHNTX-Ⅳ能明显抑制TTXS钠电流,K27AHNTX-Ⅳ对TTXS钠电流无明显影响.说明第26位的精氨酸与HNTX-Ⅳ的生物学活性无关,而第27位赖氨酸则是HNTX-Ⅳ的关键残基.; 熊霞徐侠李冬玲陈平梁宋平; 关键词：海南捕鸟蛛突变体固相多肽合成生物活性

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徐侠