李小光
- 作品数：17 被引量：29H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 检测博尔纳病病毒RNA的RACE技术的建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的3′RACE(rapid amplification of cDNA ends)方法。方法根据已知的BDV p40基因序列设计上游引物sp1;提取BDV(H1766株)持续感染OL细胞的总RNA,用引物sp1和oligo dT进行3′RACE扩增,将PCR产物克隆到pGEM-T载体并转化到大肠埃希菌中,制备阳性菌落的目的质粒,进行序列测定和同源性比对;同时对检测BDV RNA的3′RACE方法的特异性和敏感性进行分析。结果建立了检测BDV RNA的3′RACE技术;所获得的BDV p40基因的3′末端扩增产物的核苷酸序列与已知BDV(H1766株)p40基因的核苷酸序列同源性为100%;本方法对BDV RNA(mRNA)具有特异性,但对BDV p40基因重组质粒无扩增结果;并且可以检测到0.04 ng以上含量的BDV感染细胞的总RNA。结论检测BDV RNA的3′RACE技术可以排除实验室污染造成的BDV基因扩增的假阳性,并可用于进一步分析BDV基因序列的特点以及评价BDV相关基因的表达情况。
- 钱钧李小光包丽丽宋武琦翟爱霞陈小贝李玉军车洋张凤民
- 关键词：博尔纳病病毒
- 癫痫患者脑组织海马神经元的形态变化和神经元特异性烯醇化酶表达被引量：3
- 2008年
- 目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和正常无精神与神经疾病的尸检者（20例）。HE染色，光镜下观察脑组织中海马区齿状回颗粒细胞层神经元形态学改变；免疫组织化学方法检测NSE表达，比较两组NSE阳性表达率。结果癫痫患者脑组织海马颗粒细胞层中均可见核固缩的神经元，约占全部神经元的15．80％，还可见到肿胀的神经元：NSE阳性表达的神经元呈棕黄色，在出现核固缩的神经元中，发生NSE阳性表达占28．66％；癫痫病人脑组织海马NSE阳性表达率为（7．9±5．6）％。对照组脑组织海马神经元形态正常，细胞核大而圆，位于胞体中央。核仁明显，NSE阳性表达率为（39．0±17．4）％。与对照组相比，癫痫患者含棕黄色颗粒的神经元数目减少，两组NSE阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=-5．13，P〈0．01）。结论癫痫患者脑组织中海马神经元形态改变和NSE表达异常．可能是癫痫患者发病的主要因素之一。
- 谷佳睿李小光谷佳傲林志国靳占峰刘玉芳张凤民
- 关键词：癫痫海马神经元特异性烯醇化酶
- 实时定量RT-PCR检测博尔纳病病毒方法的建立被引量：5
- 2007年
- 目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR)方法。方法设计BDV-p40基因特异性引物和探针,优化反应条件;并以已知的BDV-p40基因扩增产物的克隆为标准品,建立标准曲线;然后对已知BDV RNA进行实时定量RT-PCR的特异性和敏感性检测。结果建立了特异检测BDV RNA的实时定量RT-PCR技术,并且可以检测到感染细胞中1个拷贝以上BDV RNA。结论本技术可以直接用于BDV感染的检测和定量分析。
- 钱钧包丽丽贾丽娜李小光佟雷宋武琦翟爱霞李玉军张凤民
- 关键词：博尔纳病病毒逆转录聚合酶链反应实时PCR
- 一种抗菌中药组合物及其应用
- 本发明公开了一种抗菌中药组合物及其应用，属于中药技术领域，该抗菌中药组合物由黄柏提取物、汉麻茎叶提取物混合而成。采用该中药组合物可以制成不同剂型的抗菌药物。本发明的抗菌中药组合物具有良好的抗菌作用，在抑制大肠杆菌和金黄色...
- 许超千李小光白云龙张明宇张勇钱华杨宝峰
- 文献传递
- 病毒分离和PCR-RFLP法对急性结膜炎标本中腺病毒感染及其型别的分析被引量：7
- 2005年
- 目的 分析2 0 0 3年下半年收集的哈尔滨医科大学第一临床医学院急性结膜炎标本中的腺病毒( Adenovirus,Ad V)感染情况及其型别。方法 采集5 9例临床确诊为急性结膜炎患者的结膜拭子标本,在观察和分析接种细胞的病变( CPE)情况的基础上,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析( PCR- RFL P)法,特异性检测CPE阳性细胞中腺病毒核酸的存在情况,并对PCR阳性扩增产物进行病毒型别的分析。结果 70 .7% ( 4 1/5 9)的急性结膜炎标本接种于培养细胞后可以引起明显的CPE;其中,5 3.6 % ( 2 2 / 4 1)的CPE阳性标本可以扩增出腺病毒核酸,RFL P分析证实6 8.18% ( 15 / 2 2 )的腺病毒感染为Ad3型,31.82 % ( 7/ 2 2 )的腺病毒感染为Ad7。结论2 0 0 3年下半年哈尔滨市急性结膜炎主要以腺病毒3、7型感染为主。提示结合病毒分离培养和PCR- RFL P方法。
- 李莉宋武琦李小光马培林张凤民
- 关键词：腺病毒感染标本病毒分离限制性片段长度多态性分析RFLP分析
- 博尔纳病病毒抗原免疫的杂交瘤细胞系的评价被引量：1
- 2007年
- 目的评价博尔纳病病毒(BDV)抗原免疫的杂交瘤细胞系的产生抗体能力与抗体特异性。方法随机抽取2株由BDV抗原免疫的杂交瘤细胞系H1和H2,通过体内和体外方法制备单克隆抗体,通过间接免疫荧光、免疫印迹和间接酶联免疫吸附3种试验方法对制备的抗体进行特异性鉴定及效价测定。结果杂交瘤细胞系H1和H2可以产生一定效价的单克隆抗体,并对BDV的P24和P40抗原具有特异性。结论由杂交瘤细胞系H1和H2产生的单克隆抗体可以用于检测BDV特异性抗原。
- 贾丽娜张凤民宋武琦李小光钱钧包丽丽陈小贝翟爱霞张庆猛
- 关键词：博尔纳病病毒单克隆抗体免疫荧光试验免疫印迹试验
- 内蒙地区发热患者血清中冠状病毒抗体的检测
- 2007年
- 目的分析内蒙地区发热患者中冠状病毒的感染情况。方法以SARS冠状病毒感染Vero细胞涂片为冠状病毒抗原片,用间接免疫荧光法分别检测55例发热患者和68例正常人血清中冠状病毒的IgG、IgM抗体。结果发热患者血清中冠状病毒IgG抗体和IgM抗体阳性率分别为29.1%(16/55)和10.9%(6/55),而正常人血清中只检测到2.9%(2/68)的IgG抗体,且未检测到IgM抗体,2组患者的IgG和IgM抗体阳性率比较差异均有显著性;随机选取7例患者的IgG阳性血清进行SRAS冠状病毒的特异性抗体封闭实验,结果有6例血清仍为阳性,有1例血清转为阴性,说明冠状病毒IgG抗体阳性血清中85.7%为普通冠状病毒特异性,14.3%为SARS冠状病毒特异性。结论普通冠状病毒是内蒙地区发热患者的主要病原体之一,部分患者还存在SARS冠状病毒的既往感染。
- 包丽丽钱钧福泉李桂梅宋武琦李小光贾丽娜生田和良张凤民
- 关键词：发热患者冠状病毒间接免疫荧光抗体
- 博尔纳病病毒感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响被引量：3
- 2006年
- 目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况;并采用半定量RT-PCR方法检测BDV感染大鼠脑组织中多巴胺2(D2)受体和5-羟色胺2α(5-HT2α)受体基因的mRNA转录情况。结果病毒接种后新生大鼠的BDV感染阳性率为88·89%。病毒感染大鼠脑组织中5-HT2α受体和D2受体基因的mRNA转录水平均明显低于对照组,差异有统计学意义。结论BDV感染可以明显抑制新生大鼠脑组织中D2受体和5-HT2α受体基因的mRNA转录,提示单胺类受体基因的转录与表达参与BDV感染的致病过程。
- 董云霞李小光宋武琦李玉军李桂梅马培林生田和良张凤民
- 关键词：逆转录聚合酶链反应血清素转录
- 博尔纳病病毒p40基因重组质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的构建博尔纳病病毒p40基因重组表达质粒。方法通过PCR方法扩增获得博尔纳病病毒p40基因的完整序列,将此片段定向克隆到pEGFP-N1载体多克隆位点区,筛选重组阳性菌株,提取重组质粒,利用PCR方法和核酸序列测定验证重组质粒构建的正确性。结果成功构建博尔纳病病毒p40基因重组表达质粒。结论本文构建的重组质粒将为研究博尔纳病病毒p40基因在真核细胞中的功能和作用提供实验依据。
- 车洋答嵘宋武琦李小光钱钧翟爱霞陈小贝张凤民
- 关键词：博尔纳病病毒基因重组PCR
- 博尔纳病病毒接种Wistar大鼠脑组织中病毒基因组的原位检测
- 2009年
- 本文旨在用原位杂交法探讨博尔纳病病毒(BDV)接种Wistar大鼠脑组织中BDV基因组的分布情况。DIG RNA labeling kit标记BDV p24正链探针后,用斑点实验检测该探针的标记效率,斑点杂交法检测该探针的特异性。在其标记效率与特异性均达到实验要求后,用该探针对颅内接种BDV(H1766株)的Wistar大鼠脑组织中BDV基因组进行原位杂交检测。结果发现,接种3周后,BDV感染主要发生在皮质和海马,仅少量发生在丘脑和下丘脑;接种6周后,皮质和海马的BDV感染仍然存在,且丘脑和下丘脑的BDV感染明显增强,说明BDV在大鼠脑组织中的分布范围随着感染时间的延长而逐步扩大。本文建立的原位杂交法可用于检测BDV在Wistar大鼠脑组织内的分布与迁移情况。
- 刘爱平李玉军李小光宋武琦李爱梅周淑如张凤民
- 关键词：博尔纳病病毒原位杂交斑点杂交
