杨晚竹
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 供职机构：北京协和医学院血液病医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 流式细胞术操作软件在小鼠造血干细胞检测中的应用比较被引量：3
- 2015年
- 目的 :探讨流式细胞术中不同分析软件在小鼠造血干细胞分析中的特点和差异。方法 :使用小鼠骨髓细胞悬液作为实验材料,在BD Aria III和BD Influx流式细胞仪上检测小鼠造血干细胞,分别应用FACSDiva、FACSSortware软件对检测数据进行分析,并比较分析结果。结果:FACSDiva和FACSSortware软件在参数调节、补偿调节、圈门、数据保存和分选设置方面存在细微差异,均可以实现多色流式分析和高速流式分选。结论:FACSDiva和FACSSortware软件分析同一样本所得结果有较高的一致性,均是使用流式细胞仪不可或缺的工具。
- 梁昊岳杨晚竹程雪莲王金宏
- 关键词：流式细胞术造血干细胞
- 显微成像分析技术在中性粒细胞运动及吞噬功能研究中的应用被引量：3
- 2015年
- 目的:使用转盘式激光共聚焦显微镜及显微图像处理软件对中性粒细胞的运动及吞噬功能进行分析与评估。方法:使用Percoll分离液分离小鼠骨髓中性粒细胞,用PE荧光标记后与FITC标记的酵母聚糖颗粒(Zymosan)混匀,置于转盘式激光共聚焦显微镜下进行多通道时间序列成像。使用Volocity和Image J分析中性粒细胞的运动及吞噬相关参数,包括形态变化、运动轨迹、伪足振荡、结合吞噬指数,得出时间序列下各项参数的变化趋势。结果:中性粒细胞在受到Zymosan诱导后趋化作用明显,大部分细胞在短时间内发生极性化,在40分钟内能快速结合Zymosan,行使吞噬功能。结论:使用显微成像技术结合图像处理分析技术可准确、定量地分析中性粒细胞运动及吞噬功能,直观快速地对中性粒细胞的生理学状态进行初步评估。通过这项技术,得到正常生理状态下中性粒细胞对Zymosan的快速响应情况,为今后中性粒细胞相关功能学研究提供了参考依据。
- 杨晚竹高亚男梁昊岳程雪莲于文颖陈婷汪晓敏袁卫平
- 关键词：图像定量分析中性粒细胞
- 全内角反射技术与转盘式共聚焦技术在细胞膜表面的成像比较被引量：2
- 2016年
- 转盘式共聚焦成像是一种高速、高分辨率成像技术,可以在高时间分辨率和空间分辨率的水平观察固定细胞内目标蛋白的分布及活细胞内目标蛋白的动态变化。全内角反射成像是一种观察距离玻片表面某个限定区域内蛋白质的分布和变化的成像技术,常用于观察固定细胞以及活细胞表面的亚细胞结构。该文以中性粒细胞和神经胶质瘤细胞作为观察对象,通过观测固定细胞膜表面蛋白质的分布以及追踪膜标记活细胞的动态变化对两种成像方法进行了比较。结果发现,就目前技术水平而言,二者均可以采集到清晰的细胞边缘,但全内角反射可以拍摄到更清晰的细胞膜表面结构,它在动态拍摄过程中光漂白相对较低,在快速捕捉过程中能够更加全面的捕捉到一个完整的运动过程。
- 于文颖耿广峰张辰陈婷梁昊岳程雪莲白杨杨晚竹
- 关键词：细胞成像
- 两种流式细胞术分析软件用于检测小鼠骨髓造血干祖细胞的方法比较被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨流式细胞术中两种不同分析软件在小鼠造血干细胞(HSC)分析中的特点和差异。方法:使用小鼠骨髓细胞悬液作为实验材料,采用BD AriaⅢ流式细胞仪检测小鼠造血干祖细胞(HSPCs),分别应用BD FACSDiva Software v6.1.3和FlowJo 7.6.1软件对检测数据进行分析,并对比分析其数据结果。结果:FACSDiva与FlowJo软件在数据导入、数据显示、圈门、补偿调节、数据导出和特色分析等存在细微差异,各项检测指标均可实现多色流式细胞分析功能。结论:FACSDiva和FlowJo软件分析同一样本所得结果具有较高的一致性。
- 付伟超梁昊岳王楠于文颖程雪莲任怡然杨晚竹陈婷白杨董芳
- 关键词：流式细胞术造血干祖细胞
- BD Influx流式细胞分选仪参数调试和最佳条件的设定被引量：8
- 2014年
- 目的:探索BD Influx流式细胞仪分选细胞亚群的调试参数和最佳设定条件。方法:使用两种质控试剂Rainbow Beads和Accudrop Beads作为实验材料,对BD Influx流式细胞仪的针孔、液流、荧光通道、前向角散射光信号、液滴频率、振幅和液滴延迟等参数进行优化。结果:使用型号为100μm的喷嘴,在液流聚焦清楚、液柱打入废液收集管的正中央、荧光光斑进入针孔中央且最亮、前向角散射(FSC)光光斑进入针孔中央且最亮、断点最高、液流分叉呈稳定的亮点、振幅为5.20±1.00以及液滴延迟为35.20±2.00等最佳设定条件下,其细胞样本分选纯度可达99%,工作效率可达95%。结论:流式细胞仪分选参数条件的设定,可为获得高纯度、高活性的细胞提供快速调试方法。
- 梁昊岳杨晚竹程雪莲纪庆张岘王金宏
- 关键词：流式细胞术细胞分选
- Rheb在人急性髓系白血病中的作用研究被引量：3
- 2016年
- 目的:通过检测Rheb在成人急性髓系白血病患者(AML)骨髓细胞中的表达,探讨Rheb在AML发生发展中的作用。方法:选择27例AML患者和29例特发性血小板减少性紫癜(ITP)初诊患者的骨髓单个核细胞(BMMNC),用实时定量PCR(RT-PCR)方法检测Rheb的表达水平;分析Rheb表达水平与AML患者年龄、分型、融合基因、脾脏肿大、肝脏肿大相关性。比较Rheb高表达组与Rheb低表达组患者生存时间的差异。构建过表达Rheb的HL-60细胞,应用不同浓度阿糖胞苷处理HL-60细胞和过表达Rheb的HL-60细胞,用CCK-8法检测细胞增殖情况并计算IC_(50)。结果:Rheb在AML患者骨髓单核细胞中表达与ITP患者骨髓单核细胞的表达相比较没有明显差异。Rheb高表达患者相对预后较好,对阿糖胞苷治疗敏感。Rheb表达量与患者年龄、分型、融合基因和肝肿大不相关,与脾脏肿大相关(P<0.05)。体外实验表明,在AML细胞系HL-60中过表达Rheb,可以提高细胞对阿糖胞苷敏感性(IC50=0.54μmol/L)。结论:Rheb低表达可以预示不良预后,且与AML患者脾脏肿大相关,对阿糖胞苷治疗不敏感。
- 汪晓敏徐乔竹高亚男高娟李明浩杨晚竹王建祥袁卫平
- 关键词：RHEBMTOR急性髓系白血病阿糖胞苷HL-60细胞
- BD FACSAriaIII流式细胞仪在血液学中的使用分析研究被引量：4
- 2014年
- 目的:对BD FACSAriaIII流式细胞仪在应用中出现的故障原因进行分析、研究,为在科研工作中正确使用该仪器提供依据。方法:通过对2012-2013年实验血液学国家重点实验室技术平台BD FACSAriaIII流式细胞仪的使用情况进行统计,对使用过程中出现的常见故障和需要由厂商工程师现场解决的故障进行统计,总结出高发故障的原因及解决方法。结果:通过对BD FACSAriaIII流式细胞仪的故障进行分析,为高通量流式细胞分选仪的正确使用提供指导,提高仪器运行的稳定性。结论:正确的使用和良好的维护有助于保证BD FACSAriaIII流式细胞仪的正常运行,从而确保科研工作的顺利进行。
- 梁昊岳程雪莲杨晚竹王金宏
- 关键词：流式细胞仪
