林雅宁
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 供职机构：解放军第175医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 放射治疗联合树突细胞免疫治疗恶性肿瘤的研究进展被引量：1
- 2013年
- 放射治疗(放疗)是恶性肿瘤的主要治疗手段之一,对肿瘤细胞具有细胞毒作用,但放疗在对肿瘤细胞杀伤的同时,对患者的免疫系统也有一定的影响。树突细胞是目前已知最强的抗原呈递细胞,参与肿瘤免疫的数个关键环节,对打破体内的免疫抑制状态、诱导肿瘤细胞特异性免疫反应发挥着重要作用。放疗与免疫治疗联合应用具有强大的协同作用。该文就放疗和树突细胞对肿瘤患者免疫功能的影响、放疗联合树突细胞治疗肿瘤的研究与应用状况等予以综述。
- 林雅宁徐忠玉
- 关键词：肿瘤树突状细胞免疫功能
- 去乙酰化酶SIRT5的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的克隆小鼠的Sirt5基因,及制备SIRT5多克隆抗体。方法提取小鼠肝细胞总RNA进行RT-PCR,PCR法扩增Sirt5基因,将此基因克隆至pET-28a载体,转化E.coli BL21(DE3),经异丙-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,利用Ni 2+-NTA亲和层析柱纯化;纯化的目的蛋白免疫Bal/c小鼠后,收获血清并鉴定。结果成功构建了Sirt5原核表达载体,并能在宿主菌E.coli BL21(DE3)中高效表达;利用纯化的蛋白制备了理想的多克隆抗体。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的SIRT5蛋白并制备了多克隆抗体,为进一步研究奠定了基础。
- 徐忠玉林雅宁许艺玲
- 关键词：克隆多克隆抗体
- 黄曲霉毒素B1致毒中尿素循环关键基因的研究和CPS1的生物学研究
- 肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是常见的的恶性肿瘤之一,探讨肝癌发生发展的分子机制、寻找肝癌早期诊断的生物学标志,这对肝癌早期诊断和治疗具有重要的临床意义。黄曲霉毒素B1(Aflato...
- 林雅宁
- 关键词：黄曲霉毒素B1尿素循环
- 结核分枝杆菌去乙酰化酶2的克隆及酶学研究
- 2015年
- 目的构建结核分枝杆菌去乙酰化酶2(Sir2)原核表达载体,并进行表达纯化及酶学研究。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,聚合酶链反应扩增Sir2基因,构建pET-28a-Sir2重组质粒,在E.coli BL2(DE3)中诱导表达蛋白,经Ni 2+-NTA柱纯化,最后通过去乙酰化酶试验测定Sir2酶活的最适反应温度和pH值,以及吡嗪酰胺对其酶活的影响。结果成功构建了Sirt2原核表达载体,并能在E.coli BL21(DE3)中高效表达。随后对纯化的Sir2蛋白进行依赖于NAD+的去乙酰化活性研究,得到该酶的最适反应温度是25℃,最适反应pH值是9.0。在偏酸性环境中,吡嗪酰胺对酶活有抑制,而在偏碱性环境中,没有抑制作用。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的Sir2蛋白并获得其酶活最适反应温度和最适pH值,及吡嗪酰胺对其有抑制效果,为研究抗结核药物吡嗪酰胺的抑菌机制提供一定基础。
- 林雅宁董剑徐忠玉
- 关键词：结核分枝杆菌去乙酰化酶基因克隆蛋白纯化吡嗪酰胺
- 耻垢分枝杆菌DNA末端结合蛋白Ku的表达、纯化及酶学性质研究
- 2013年
- 目的构建耻垢分枝杆菌末端结合蛋白Ku原核表达载体,并进行表达纯化及酶学测定。方法以耻垢分枝杆菌str.MC2 155基因组DNA为模板,PCR法扩增ku基因,构建pQE-30-ku重组质粒,在表达宿主菌E.coli M15中诱导表达蛋白,Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,最后通过凝胶迁移电泳实验测定Ku蛋白与5′粘末端、3′粘末端和平末端3种不同末端DNA结合情况。结果成功构建了ku原核表达载体pQE-30-ku,并能在宿主菌E.coli M15中表达,纯化后具有结合不同末端DNA的酶活性。结论 Ku基因克隆到原核宿主菌中能进行表达、纯化,纯化后的蛋白具有结合不同末端DNA的生物学活性,为分枝杆菌非同源末端连接的研究奠定了基础。
- 林雅宁董智聪占景华徐忠玉
- 关键词：分枝杆菌属聚合酶链反应
- 结核分枝杆菌ligC基因的克隆表达及酶学性质研究
- 2014年
- 目的构建结核分枝杆菌H37Rv的ligC原核表达载体，并进行表达纯化及酶学测定。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，PCR法扩增ligC基因，构建pQE-30-ligC重组质粒，在表达宿主菌E．coliM15中诱导表达蛋白，经Ni2＋-NTA亲和层析柱纯化，最后ATP酶活性检测。结果成功构建了ligC原核表达载体pQE-30-ligC，并能在宿主菌E．coliM15中表达，纯化后具有ATP酶活性。结论LigC基因克隆到原核宿主菌中能进行表达纯化，纯化后的蛋白具有ATP酶生物学活性。
- 林雅宁徐忠玉
- 关键词：分枝杆菌属基因聚合酶链反应连接酶
- 结核分枝杆菌H37Rv尿嘧啶糖苷酶基因的克隆、表达及酶学性质分析
- 2013年
- 本研究旨在构建结核分枝杆菌H37Rv尿嘧啶糖苷酶UNG的原核表达载体及酶学分析,为结核分枝杆菌的碱基切除修复系统的研究奠定基础。提取结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA,PCR法扩增ung基因,构建pQE-30-ung重组质粒,在表达宿主菌E.coli M15中诱导表达蛋白,经Ni 2+-NTA亲和层析柱和凝胶过滤层析纯化,通过表面等离子共振试验观察该蛋白与错配DNA结合的情况。结果显示,成功构建了原核表达载体pQE-30-ung,并能在宿主菌E.coli M15中表达,纯化后的酶具有识别异常DNA活性,为进一步研究奠定了基础。
- 徐忠玉林雅宁
- 关键词：结核分枝杆菌表达纯化表面等离子共振
- 黄曲霉毒素B1诱发昆明鼠高血氨的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨黄曲霉毒素B1对昆明鼠血氨浓度的影响。方法用黄曲霉毒素B1注射昆明鼠10周,每2周测定1次昆明鼠鼠血氨浓度。结果毒素组昆明鼠血氨浓度从40μmol/L上升到170μmol/L,同时毒素组的血氨浓度相对于对照组呈上升趋势。结论黄曲霉毒素B1可诱发昆明鼠高血氨,推测黄曲霉毒素B1会干扰尿素循环。
- 林雅宁徐忠玉
- 关键词：黄曲霉毒素B1小鼠近交系
- 血清CEA、NSE、CYFR21-1水平检测在肺癌诊断和鉴别诊断的应用价值被引量：7
- 2012年
- 目的探讨血清CEA、NSE、CYFR21-1水平在肺癌诊断和鉴别诊断的应用价值。方法采用电化学发光法,检测102例肺癌患者、52例肺良性病变患者和30例健康体检者血清CEA、NSE、CYFR21-1水平。结果血清CEA、NSE、CYFR21-1水平与病理类型有关,CEA水平升高以肺腺癌为主,敏感性为53.49%;CYFR21-1水平升高以肺鳞癌为主,敏感性为62.85%;NSE升高以小细胞肺癌为主,敏感性为77.27%。结论 CEA联合NSE、CYFR21-1检测可提高对肺腺癌的敏感性,CYFR21-1单项或联合NSE检测可用于肺鳞癌的诊断和鉴别诊断,单纯NSE检测即对小细胞肺癌的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
- 徐忠玉林雅宁梁声强
- 关键词：肺肿瘤癌胚抗原神经元特异性烯醇化酶
- AFB1对昆明鼠肝组织和人肝细胞CPS1表达的影响
- 2014年
- 观察黄曲霉毒素B1(aflatoxin Bl,AFB1)对昆明鼠肝组织和人肝细胞(Chang liver)中氨甲酰磷酸合成酶1(carbamoylphosphate synthetase 1,CPS1)表达的影响。将20只雄性昆明鼠随机分成正常组和实验组,实验组用AFB1注射10周后采用实时荧光定量PCR法检测肝组织中CPS1的mRNA表达变化;AFB1处理人肝细胞株Chang liver细胞12h,24h,36h,48h后,实时荧光定量PCR法检测CPS1的mRNA表达变化。结果显示与正常组对比,实验组小鼠CPS1的mRNA表达下调。同时AFB1处理人肝细胞后CPS1的mRNA表达在不同时间段发生一定的下调,暗示AFB1抑制昆明鼠肝组织和人肝细胞中CPS1的mRNA表达。
- 徐忠玉林雅宁
- 关键词：黄曲霉毒素B1人肝细胞
